福建省自然科学基金(2006J0419)
- 作品数:5 被引量:48H指数:5
- 相关作者:曹敏杰刘光明梁银龙苏文金张凌晶更多>>
- 相关机构:集美大学上海海洋大学更多>>
- 发文基金:福建省自然科学基金福建省科技计划重点项目福建省科技计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 文蛤特异性过敏原免疫识别的初步研究被引量:5
- 2009年
- 目的:贝类是人类最优质的食用蛋白资源之一,也是联合国粮农组织公布的八大类过敏食物之一,贝类过敏反应严重影响着过敏人群的身体健康和生活质量,为此开展贝类过敏原的识别检测研究很有必要。方法:通过问卷调查初步了解食物过敏现状,获取自诉贝类过敏患者血清和正常人阴性对照血清,采用特异性IgE检测试剂盒筛选贝类过敏血清,应用组织捣碎提取蛋白、聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹等实验方法研究文蛤特异性过敏原。结果:文蛤肌肉主要蛋白的相对分子量约为200kD以上、200、90、80、70、46、36和24kD,其中能被贝类过敏血清特异性识别的90kD组分约占文蛤肌肉总蛋白的10%~20%,且主要为盐溶性蛋白。结论:文蛤的特异性过敏原为90kD蛋白组分。
- 刘光明曹敏杰梁银龙蔡朝辉苏文金
- 关键词:文蛤特异性过敏原聚丙烯酰胺凝胶电泳
- 厦门市几种食品中致癌真菌污染的检测
- 本实验研究建立食品中致癌真菌污染的培养分离结合实时荧光聚合酶链式反应(PCR)检测技术,对厦门地区一些可能污染真菌的食品进行监测.按照国家标准方法GB/T4789.15-2003进行食品检样的真菌分离培养,从11种食品检...
- 刘光明张明河谢荣珍刘伟牛建军蔡慧农
- 关键词:食品科学荧光PCR基因检测
- 文献传递
- 虾类过敏原的识别、纯化和检测技术研究被引量:16
- 2008年
- 虾类是人类优质的食用蛋白资源之一,也是联合国粮农组织公布的八大类过敏食物之一。虾类过敏反应严重影响着过敏人群的身体健康和生活质量,为此开展虾类过敏原的识别、纯化和检测技术研究非常必要。通过问卷调查初步了解食物过敏现状,获取自诉虾类过敏患者血清和正常人阴性对照血清,采用特异性IgE检测试剂盒筛选虾类过敏血清。提取南美白对虾蛋白,进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫印迹识别虾类过敏蛋白,并对患者识别率最高的虾类的主要过敏原进行分离纯化。采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫印迹和酶联免疫吸附测定等方法对纯化虾蛋白进行检测分析。患者识别的南美白对虾致敏原的分子质量依次约为200、175、116、85和36kDa,通过硫酸铵盐析及等电点沉淀等方法可以得到电泳纯的虾主要过敏蛋白。免疫印迹结果证实纯化的虾蛋白是具有过敏原性的原肌球蛋白,在此基础上,建立了虾原肌球蛋白的酶联免疫吸附测定方法。
- 刘光明沈苑曹敏杰梁银龙杨景成苏文金
- 关键词:南美白对虾纯化免疫检测
- 鱼类肌肉中过敏蛋白的检测与分析被引量:9
- 2008年
- 采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western blot)方法,分别对淡水鱼(鲤鱼、鲢鱼、鲫鱼)和海水鱼(黄鳍鲷、金鲳)等5种鱼肌肉,鳕鱼丸、鲢鱼丸两种鱼糜制品以及鲮鱼、沙丁鱼、鳗鱼3种鱼罐头中过敏原(小清蛋白)的含量进行了分析.结果显示,应用抗蛙小清蛋白单克隆抗体(PARV-19)可以分别在5种鱼白色肉和红色肉的肌浆蛋白中检测到特异性杂交条带,其分子量大小约为12-14.4ku,且白色肉中的含量明显高于红色肉.但在5种鱼的肌原纤维蛋白、2种鱼糜制品和3种鱼罐头中,均未检测到小清蛋白.因此得到结论,无论是淡水鱼还是海水鱼,小清蛋白主要存在于白色肉肌浆蛋白中;经过加工的鱼制品中小清蛋白的含量有很大程度的降低.
- 汪宁王锡昌蔡秋凤刘光明曹敏杰
- 关键词:小清蛋白鱼糜SDS-PAGEWESTERNBLOT
- 蟹类原肌球蛋白基因的克隆与表达被引量:12
- 2009年
- 通过分子生物学技术方法,分别克隆得到锯缘青蟹(Scylla serrata)、中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)和三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)的原肌球蛋白基因序列。测序结果表明,三个基因的序列长度均为855 bp,编码284个氨基酸残基,三者氨基酸序列同源性为99.3%。三种蟹的原肌球蛋白基因序列与GenBank中其他甲壳类动物的原肌球蛋白具有很高的同源性。将锯缘青蟹的原肌球蛋白基因与pGEX-4T-3载体连接后,经IPTG诱导得到分子量约为61 ku的融合表达蛋白。通过与甲壳类过敏患者血清的免疫印迹反应,证实融合表达的原肌球蛋白具有过敏原性,表明原肌球蛋白是蟹类的主要过敏原之一。该融合蛋白有望用于甲壳类食物过敏诊断试剂的开发与应用。
- 梁银龙曹敏杰郭川苏文金张凌晶刘光明
- 关键词:锯缘青蟹中华绒螯蟹三疣梭子蟹原肌球蛋白克隆
- 鲤鱼小清蛋白的纯化及其过敏原性鉴定被引量:8
- 2009年
- 目的:分离纯化鲤鱼小清蛋白(parvalbumin),并对其进行过敏原性鉴定,为建立鱼类过敏原检测技术奠定基础。方法:采用硫酸铵分级盐析和阴离子交换层析纯化鲤鱼小清蛋白,采用点杂交和特异性IgE检测试剂盒筛选鱼类过敏者血清,应用聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹技术分析确定纯化目标蛋白的性质。结果:硫酸铵分级盐析和阴离子交换层析纯化方法可以得到电泳纯单一目标蛋白;小鼠抗蛙小清蛋白单克隆抗体免疫印迹实验表明,所得纯化蛋白是小清蛋白。此外,免疫杂交结果显示,鱼类过敏者血清能与纯化的小清蛋白发生特异性结合,从而证实了鲤鱼小清蛋白的过敏原性。
- 刘光明梁银龙苏文金张凌晶郭翎琳曹敏杰
- 关键词:鲤鱼小清蛋白纯化