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国家科技支撑计划(2009BADB4B01)

作品数：10 被引量：87H指数：6
相关作者：李一经徐守振尹燕博姜艳平唐丽杰更多>>
相关机构：东北农业大学青岛农业大学西南民族大学更多>>
发文基金：国家科技支撑计划中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科技资源平台项目更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 10篇中文期刊文章

领域

  • 9篇农业科学
  • 2篇生物学

主题

  • 4篇杆菌
  • 4篇大肠杆菌
  • 3篇病毒
  • 2篇疫病
  • 2篇新城疫
  • 2篇新城疫病
  • 2篇新城疫病毒
  • 2篇灭活
  • 2篇活性
  • 1篇动物
  • 1篇动物疫苗
  • 1篇胸腺
  • 1篇胸腺肽
  • 1篇胸腺肽Α
  • 1篇血清
  • 1篇血清培养
  • 1篇鸭源
  • 1篇鸭源致病性大...
  • 1篇疫苗
  • 1篇致病性大肠杆...

机构

  • 4篇东北农业大学
  • 3篇青岛农业大学
  • 3篇西南民族大学
  • 1篇阿坝州中等职...

作者

  • 4篇李一经
  • 3篇唐丽杰
  • 3篇姜艳平
  • 3篇尹燕博
  • 3篇徐守振
  • 2篇乔薪瑗
  • 2篇于学辉
  • 2篇崔文
  • 2篇葛俊伟
  • 1篇刘敏
  • 1篇宋定州
  • 1篇汤承
  • 1篇汪淼
  • 1篇岳华
  • 1篇乔薪媛
  • 1篇杨晓农
  • 1篇刘群
  • 1篇王远微
  • 1篇哈卓
  • 1篇苏晓蕊

传媒

  • 3篇中国畜牧兽医
  • 2篇东北农业大学...
  • 2篇中国预防兽医...
  • 1篇中国家禽
  • 1篇动物医学进展
  • 1篇畜牧兽医学报

年份

  • 1篇2015
  • 3篇2012
  • 2篇2011
  • 4篇2010
共 10 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
猪圆环病毒2型Cap蛋白在杆状病毒系统表达及鉴定被引量：10
2012年
通过PCR方法扩增猪圆环病毒2型(pcv-2)中的缺失核定位序列的ORF2基因,将其克隆到Bac-N-Blue杆状病毒表达系统的pMelBacB载体中,得到阳性重组质粒pMel-ORF2。将其与Bac-N-Blue DNA体外重组,在脂质体的介导下,转染处于对数生长期的Sf9细胞,获得重组杆状病毒并在Sf9细胞上表达重组蛋白。通过SDS-PAGE、Western-blot和间接免疫荧光法(IFA)鉴定表明,Cap蛋白在昆虫-杆状病毒系统获得了表达,为Cap蛋白作为pcv-2检测抗原进行猪圆环病毒特异性抗体的检测提供了物质基础。
宋月姜艳萍崔文李一经
关键词：重组杆状病毒SF9细胞
牦牛大肠杆菌的分离鉴定及系统发育分析被引量：6
2012年
本试验旨在研究牦牛源大肠杆菌的遗传进化关系,明确其与人和其他动物大肠杆菌的亲缘关系。采集来源于四川省甘孜州、阿坝州的60份临床健康成年牦牛肛门棉拭子样本,接种于麦康凯琼脂培养基上进行细菌的分离培养,通过常规形态学、培养特性、生化特征和16SrRNA PCR检测的研究,确定49株为大肠杆菌。对其中9株牦牛源大肠杆菌进行16SrRNA克隆、测序,经系统发育分析发现牦牛菌株组内同源性为98.8%～99.9%,与GenBank中其他菌株的同源性为94.0%～100%。结果表明,牦牛源大肠杆菌与牛源菌株的遗传距离最近,与羊源菌株的遗传距离最远,与人、猪、鸭、鸡源菌株的遗传距离较近,其中有2株菌与人肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7和志贺氏菌聚为一支,从遗传进化的关系看其有可能成为人类的潜在病原菌。
任丽倩于学辉宋定州甄康娜覃蔚王远微
关键词：大肠杆菌牦牛RRNA系统发育分析
^(60)Coγ射线对新城疫病毒、H9N2亚型禽流感病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的灭活研究
2011年
用60 Coγ射线对不同状态不同体积的鸡新城疫病毒(NDV)、H9N2亚型禽流感(H9N2AIV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)进行辐照,研究60 Coγ射线对灭活疫苗中病毒的灭活效果。结果表明,6.0kGy 60 Coγ射线辐照对冷冻和液态下5000和10000mL的NDV、H9N2亚型AIV和PRRSV均不能灭活,辐照后NDV和H9N2亚型AIV冷冻尿囊液的HA效价降低而液态尿囊液的HA效价升高;液态下,60 Coγ射线能够灭活250mL细胞培养液中的PRRSV,不能灭活250、5000和10000mL尿囊液中的NDV和H9N2AIV,250mL与5000、10000mL的NDV HA效价间差异显著(P<0.05)。60 Coγ射线辐照对液态的PRRSV细胞培养液灭活效果良好,有望用于灭活苗的病毒灭活。
徐守振王新尹燕博
关键词：新城疫病毒H9N2亚型禽流感病毒灭活
四种不同灭活剂对新城疫病毒的灭活效果研究被引量：10
2011年
为探索甲醛、β-丙内酯(BPL)、二乙烯亚胺(BEI)和盐酸聚六亚甲基胍(PHMG)对新城疫病毒(NDV)的最佳灭活条件,试验采用不同浓度梯度的甲醛、BPL、BEI和PHMG对NDV进行不同时间的灭活处理,通过血凝(HA)试验、无菌检验和灭活检验确定灭活效果。结果显示,37℃下,NDV的最佳灭活条件为0.1%～0.2%的甲醛灭活22～24h、0.02%～0.025%的BPL灭活9～10h、2%～3%的PHMG灭活16～20h,该研究为筛选规模化生产ND疫苗所需的理想灭活剂提供了依据。
徐守振王新尹燕博
关键词：新城疫病毒甲醛灭活
猪前胸腺肽α在大肠杆菌中的表达及其生物学活性鉴定被引量：1
2015年
为原核表达具有生物活性的重组前胸腺肽α(proTα),本实验利用人工合成的330 bp proTα DNA编码序列,构建重组表达质粒pET-proTα,将其转化于大肠杆菌Rosetta进行诱导表达,采用MTT方法测定重组蛋白对小鼠脾细胞和胸腺细胞增殖的影响。SDS-PAGE结果显示proTα重组蛋白以可溶形式表达,分子量约32 ku。重组蛋白经镍柱亲和层析纯化后获得具有生物活性的蛋白,在体外能够明显促进小鼠胸腺和脾淋巴细胞增殖活性,与轮状病毒共同免疫小鼠能够提高轮状病毒VP6蛋白的特异性抗体水平,并提高抗原刺激下脾细胞分泌IFN-γ水平。本研究首次确认了proTα蛋白在小鼠体内具有佐剂活性,为proTα生物活性的进一步研究及其作为疫苗佐剂的开发奠定基础。
王錾彧唐丽杰乔薪媛姜艳平崔文李一经
关键词：大肠杆菌表达生物学活性
动物疫苗中常用抗原灭活剂的研究进展被引量：41
2010年
作者介绍了当前动物灭活疫苗的灭活类型,对60Coγ射线、甲醛、β-丙内酯(BPL)、N-乙酰乙烯亚胺(AEI)、二乙烯亚胺(BEI)和盐酸聚六亚甲基胍(PHMG)等几种常用抗原灭活剂的特点、灭活机制、研究应用现状进行了综述,并对抗原灭活剂的发展方向进行了展望。
徐守振尹燕博王新
关键词：疫苗
98株鸭源致病性大肠杆菌氨基糖苷类耐药基因型与耐药表型的比较被引量：11
2010年
旨在调查鸭致病性大肠杆菌氨基糖苷修饰酶耐药基因(AMEs基因)的携带情况,探讨耐药基因与氨基糖苷类抗生素耐药表型的相关性。对98株鸭致病性大肠杆菌采用了K-B法,选用氨基糖苷类抗生素链霉素、新霉素、庆大霉素、阿米卡星、大观霉素和卡那霉素进行药敏试验,用建立的检测氨基糖苷类AMEs主要基因的四重PCR方法对上述菌株进行分子检测,并随机选取耐药基因ant(3″)-Ⅰa、aac(3)-Ⅱa和aph(3′)-Ⅱa各3个阳性扩增进行克隆测序,对药敏试验结果和基因检测结果进行比较分析。结果表明,98株鸭致病性大肠杆菌有67株对上述氨基糖苷类药物中的一种或多种耐药,耐药率为68.4%(67/98);有49株扩增出AMEs基因,AMEs基因的检出率为50%(49/98),其中ant(3″)-Ⅰa的检出率为30.6%(30/98),aac(3)-Ⅱa为13.3%(13/98),aph(3′)-Ⅱa为3.1%(3/98),ant(3″)-Ⅰa+aac(3)-Ⅱa为2.0%(2/98)、aac(3)-Ⅱa+aph(3′)-Ⅱa为1.0%(1/98),未检出aac(6′)-Ⅰb基因;序列分析结果表明,扩增产物与GenBank中的相应序列有很高的同源性(>99%);AMEs耐药基因与耐药表型的符合率为73.1%(49/67),符合率从高到低依次为大观霉素60%(3/5)、庆大霉素55%(11/20)、链霉素33.3%(22/66)、卡那霉素19%(4/21)、新霉素12.5%(1/8)、阿米卡星0%(0/3)。另外有4株细菌检测到相关耐药基因但耐药表型为敏感,而有22株耐药表型为耐药却未检测到相关耐药基因。鸭致病性大肠杆菌氨基糖苷类耐药基因以ant(3″)-Ⅰa和aac(3)-Ⅱa两种为主,耐药性与相关耐药基因的检出率基本呈正相关。
于学辉黄兰杨晓农刘群
关键词：致病性大肠杆菌氨基糖苷类多重PCR耐药基因耐药表型
Vero细胞无血清培养基研究进展被引量：6
2012年
Vero细胞是世界卫生组织和我国生物制品规程认可的生产人和动物疫苗的细胞系。为了避免外来污染和血清中不确定成分对细胞生长及其下游工作带来的影响,用无血清培养基或化学成分明确的培养基培养Vero细胞已成为病毒疫苗生产的一个重要发展趋势。Vero细胞无血清培养基的组成包括基础培养基和添加因子两大部分,常见的添加因子有转铁蛋白、胰岛素、微量元素、生长因子和维生素等。论文对Vero细胞无血清培养基的研究进展做一综述,以期为Vero细胞的无血清培养基研制及疫苗的生产提供参考。
苏晓蕊岳华汤承
关键词：VERO细胞无血清培养
大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位在干酪乳杆菌中的分泌表达及其GM1结合活性分析
2010年
为获得表达大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)的乳酸菌表达系统,并分析其免疫反应性和神经节苷脂受体(GM1)结合活性,本研究将编码LTB蛋白的eltb基因片段插入干酪乳杆菌分泌型表达载体pPG-2中,构建重组质粒pPG-2-eltb,电转化于干酪乳杆菌393中。筛选获得重组干酪乳杆菌,应用western blot和间接ELISA方法鉴定LTB表达情况,并检测其与GM1结合活性。结果显示,目的蛋白以分泌形式表达,可被LTB阳性血清识别。GM1-ELISA试验结果证实表达的LTB可与牛GM1特异性结合。表明LTB蛋白在重组干酪乳杆菌获得了表达,并且具有免疫反应活性和佐剂活性,为以LTB为分子佐剂研制乳酸菌黏膜疫苗奠定基础。
葛俊伟姜艳平汪淼刘敏乔薪瑗唐丽杰李一经
关键词：干酪乳杆菌
大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位在大肠杆菌中的表达及其特性研究被引量：5
2010年
将大肠杆菌不耐热性肠毒素B亚单位(LTB)基因eltb克隆到表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21/DE3/plyss。采用SDS-PAGE和Western blot分析,结果表明,在大肠杆菌中高效表达了LTB蛋白,其产量约为细菌总蛋白的20%,GM1-ELISA方法鉴定目的重组蛋白可与GM1结合,具有潜在的佐剂活性;由纯化的重组蛋白免疫小鼠制备的抗血清效价为1:16000,并且可以特异性识别天然毒素。结果表明,所表达的LTB有良好的抗原性和佐剂活性,制备的抗血清具有良好的免疫活性,为下一步以LTB作为佐剂的黏膜疫苗研究提供基础材料。
葛俊伟姜艳平杨敏哈卓乔薪瑗唐丽杰李一经
关键词：活性
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