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吉林市科技发展计划项目(200805)

作品数：4 被引量：5H指数：1
相关作者：陈立志刘晓颖姚志利冯二凯陆伟更多>>
相关机构：中国农业科学院特产研究所江苏科技大学厦门大学更多>>
发文基金：吉林市科技发展计划项目吉林省科技发展计划基金国家科技攻关计划更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 3篇农业科学
  • 2篇生物学

主题

  • 4篇坏死梭杆菌
  • 4篇杆菌
  • 1篇亚种
  • 1篇溶血活性
  • 1篇双重PCR
  • 1篇片段
  • 1篇开放阅读框
  • 1篇克隆
  • 1篇PCR
  • 1篇LAMP

机构

  • 4篇中国农业科学...
  • 2篇江苏科技大学
  • 1篇军事医学科学...
  • 1篇厦门大学

作者

  • 4篇刘晓颖
  • 4篇陈立志
  • 3篇姚志利
  • 1篇王克坚
  • 1篇冯二凯
  • 1篇冯凯
  • 1篇冯书章
  • 1篇王燕
  • 1篇张秀华
  • 1篇王秀东
  • 1篇赵利芳
  • 1篇陆伟

传媒

  • 2篇特产研究
  • 2篇动物医学进展

年份

  • 2篇2010
  • 2篇2009
共 4 条 记 录，以下是 1-4
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排序方式：
坏死梭杆菌白细胞毒素研究进展被引量：2
2009年
坏死梭杆菌白细胞毒素(Lkt)是一组对反刍动物白细胞特别是多形性白细胞(PMNs)有特异性毒性作用的细胞外毒素,被认为是坏死梭杆菌感染动物的主要毒力因子。白细胞毒素的物理稳定性较低,高温或极端pH环境中都能使白细胞毒素活性丧失。研究发现,白细胞毒素开放阅读框(ORF)全长9 726bp,由3个基因(lktB、A和C)组成,结构基因是第2个基因(lktA)。白细胞毒素对白细胞的毒性作用有剂量依赖性,并且溶血活性较低,不能在豚鼠猪皮肤上形成皮肤坏死症状。
冯二凯陈立志刘晓颖
关键词：坏死梭杆菌开放阅读框溶血活性
坏死梭杆菌白细胞毒素基因SH片段的克隆与表达被引量：1
2009年
坏死梭杆菌白细胞毒素是坏死杆菌病的主要致病因子,白细胞毒素基因(lkt)是其编码基因。以分离到的国内牛源坏死梭杆菌FN(A)菌株F4基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增白细胞毒素基因SH片段,克隆至pMD18-T载体上,以BamHⅠ和HindⅢ酶切的目的片段SH与相应酶切的pET32a载体连接构建pET32a-SH重组表达质粒,经转化E coli BL21(DE3)后用IPTG进行蛋白诱导,SDS-PAGE检测重组蛋白表达情况。结果表明:扩增基因序列大小为1800bp,SDS-PAGE检测重组蛋白有效表达,表达得到大小为80.2kDa的目的蛋白,采用镍柱亲和层析方法纯化SH重组蛋白,获得了纯度达95%的重组蛋白;经West-ern-blot证实,该蛋白对抗坏死杆菌阳性血清具有反应活性。
赵利芳陈立志张秀华冯书章王克坚刘晓颖陆伟冯凯王秀东姚志利
关键词：坏死梭杆菌克隆
通过双重PCR方法区分坏死梭杆菌亚种被引量：1
2010年
基于已发表的坏死梭杆菌白细胞毒素启动子区序列,设计3条特异性引物L7、L8和L9。L7和L8分别与Fnn和Fnf的特异性序列结合,L9与两个亚种序列相匹配。分别扩增出1 076bp和809bp的特异性片段。试验结果表明,这些引物具有高度的特异性和敏感性,能够检测坏死梭杆菌基因组DNA的最小量为10pg/μL,建立的双重PCR体系可用于区分坏死梭杆菌亚种。
姚志利刘晓颖陈立志冯凯王燕刘振铸李玉文
关键词：坏死梭杆菌双重PCR
坏死梭杆菌检测方法研究进展被引量：1
2010年
坏死梭杆菌是一种严格厌氧的革兰阴性(G-)杆菌,可以依据坏死梭杆菌的菌体形态、菌落特征、生化试验、耐药性试验、酶特性试验等进行检测。根据坏死梭杆菌的16 S rRNA基因序列、16 S～23 SrRNA基因间序列以及rpoB基因序列,可以对其进行菌种水平上的鉴定;根据坏死梭杆菌的gyrB基因序列和白细胞毒素操纵子启动子区序列,可以对坏死梭杆菌进行亚种水平的鉴别。环介导的等温扩增(LAMP)技术的发展也为坏死杆菌病的快速诊断提供了检测方法。
姚志利陈立志刘晓颖
关键词：坏死梭杆菌PCRLAMP
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