浙江省“钱江人才计划”(QJD0702014)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 相关机构：浙江理工大学休斯敦大学更多>>
- 发文基金：浙江省“钱江人才计划”浙江省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 家蚕30kDa载脂蛋白19G1前体的生物信息学分析及克隆表达
- 2009年
- 从本实验室构建的家蚕蛹cDNA文库中发现了一条编码低分子量30 kDa载脂蛋白19G1前体(lowmolecular mass 30 kDa lipoprotein 19G1 precursor)的EST序列(GeneBank登录号:AY568957),在NCBI数据库中比对后得知该基因的ORF长为771 bp,与基因组比对后发现该基因的ORF不含内含子,由单一外显子编码256个氨基酸残基的蛋白质,该蛋白属于家蚕30K蛋白家族,预测分子量约为29.5 kDa,等点电为7.29;信号肽分析显示该蛋白很可能存在信号肽。根据该基因ORF进行引物设计,以家蚕基因组为模板,PCR扩增获得该基因,将其克隆到pET-28a(+)载体中并导入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,裂解菌作SDS-PAGE分析,结果表明该蛋白前体成功表达,为研究其功能打下了基础。
- 陈晓平于威张耀洲
- 关键词：家蚕克隆生物信息学分析
- SHP-2蛋白NSH2结构域的原核表达和同位素标记
- 2010年
- SHP-2蛋白是一种含有两个SH2结构域的磷酸酶。SHP-2的N端SH2结构域是细胞因子或病毒因子激活该蛋白的分子内靶点。对shp2基因进行信息学分析,设计引物通过PCR克隆出人SHP-2蛋白N端SH2结构域(NSH2)的DNA序列。重组到原核表达载体pGEX-2T中,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功高效率表达了可溶性NSH2蛋白。对蛋白进行15N同位素标记和纯化,并浓缩获得达到进行核磁滴定法结构研究的蛋白样品。
- 牛皋郭江峰高晓莲张耀洲
- 关键词：SHP-2SH2结构域同位素标记HSQC
