武汉市青年科技晨光计划(20015005048)
- 作品数：4 被引量：12H指数：2
- 相关作者：刘启功孙玉梅李永东郑向阳李文更多>>
- 相关机构：华中科技大学河南省胸科医院更多>>
- 发文基金：武汉市青年科技晨光计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 携hVEGF_(165)基因的重组腺病毒载体的构建及鉴定
- 2004年
- 目的 构建携带人血管内皮生长因子 16 5 (hVEGF165)基因的重组腺病毒载体。方法 将hVEGF165cDNA亚克隆到腺病毒中间载体pACCMV·pLpA ,再与pJM17共转染人胚肾 2 93细胞 ,获得载hVEGF165基因的复制缺陷型重组腺病毒 ,感染体外培养的兔主动脉血管平滑肌细胞 (VSMC) ,通过RT PCR和Westernblot检测VEGF表达情况 ,并观察表达产物VEGF对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)增殖的影响。结果 重组腺病毒感染VSMC 4 8h后有VEGFmRNA转录及蛋白质的表达 ,并呈剂量依赖性地促进HUVEC增殖。结论 构建的重组腺病毒载体在VSMC中能够有效表达目的基因 ,且能有效促进HUVEC增殖 ,为hVEGF165基因的实际应用奠定了基础。
- 刘启功陆再英张卫东颜进
- 关键词：VEGF165重组腺病毒载体HUVECVSMC亚克隆
- 一氧化氮在VEGF介导的内皮细胞增殖与分泌效应中的作用被引量：7
- 2004年
- 目的 :探讨一氧化氮在血管内皮生长因子 (VEGF)介导的血管内皮细胞增殖与分泌效应中所起的作用 ,了解VEGF可能的作用机制。方法 :将体外培养的兔主动脉内皮细胞分成对照组、VEGF处理组和VEGF +N -硝基 -L -精氨酸甲酯 (L -NAME)处理组 ,采用四氮唑盐WST - 1比色法、放免法和酶联免疫双抗体夹心法分别检测吸光值及内皮素 - 1和Ⅷ因子辅因子水平。结果 :VEGF处理组吸光值明显高于VEGF +L -NAME处理组 ,且均高于对照组 (P <0 .0 1) ;VEGF处理组内皮素 - 1和Ⅷ因子辅因子水平明显低于VEGF +L -NAME处理组 ,且均低于对照组(P <0 .0 5和P <0 .0 1) ;提示VEGF能促进内皮细胞增殖 ,抑制内皮细胞分泌内皮素 - 1和Ⅷ因子辅因子 ,而L -NAME能部分拮抗VEGF的上述作用。结论 :一氧化氮在VEGF促进内皮细胞增殖及抑制内皮细胞分泌内皮素 - 1和Ⅷ因子辅因子中起中介作用 ,VEGF可能部分通过一氧化氮起作用 ,一氧化氮是VEGF作用机制中的一个重要信号通路。
- 刘启功李永东
- 关键词：内皮生长因子一氧化氮N-硝基-L-精氨酸甲酯细胞
- 球囊导管转导血管内皮生长因子对局部血管内皮细胞生长的影响(英文)被引量：3
- 2008年
- 背景:血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)能促进实验性动脉成形及支架置入后血管内皮迅速再生,使血栓形成减少,新生内膜厚度和管腔狭窄程度减轻。目的:在建立动脉粥样硬化兔模型基础上,观察局部转染VEGF基因对被扩张动脉内皮形成的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2004-11/2006-11在华中科技科技大学同济医学院微生物实验室完成。材料:高脂饲养建立动脉粥样硬化兔模型,20只模型兔随机分为对照和基因治疗组两组,每组10只。方法:基因治疗组利用球囊导管扩张左肾动脉开口上段腹主动脉并导入pcDNA3.0载体介导的hVEGF165,对照组导入空载体。主要观察指标:术后1,2,4周MRI观察左肾动脉开口处上段被扩张腹主动脉的管腔面积。术后2,4周处死家兔取材,采用HMIAS-2000高清晰度彩色医学图文分析系统观察内膜面积/中膜面积比值,采用Ⅷ因子相关抗原免疫组织化学染色观察血管内皮细胞再生情况。结果:利用球囊导管能成功转导pcDNA3.0/hVEGF165。基因治疗组术后2,4周管腔面积大于对照组(P<0.05),内膜面积/中膜面积比值小于对照组(P<0.05);基因治疗组扩张血管内皮细胞再生在术后2周即完成,而对照组到4周才完成。结论:转导pcDNA3.0/hVEGF165基因能够促进局部血管内皮化,明显减轻再狭窄程度及内膜增厚。
- 孙玉梅刘启功郑向阳
- 关键词：血管内皮生长因子经皮腔内冠脉成形术再狭窄基因疗法
- 血管内皮生长因子预防血管成形术后再狭窄的机制研究被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)预防血管成形术后再狭窄的机制。方法:用高脂饲养建立实验性动脉粥样硬化家兔模型,将VEGF作用于正常健康兔和动脉粥样硬化家兔主动脉血管内皮细胞(VEC)。采用亚硝酸还原法测一氧化氮(NO),放免法测内皮素(ET)、6-酮-前列腺素1α(6-keto-PGF1α),采用发色底物显色法测定血浆纤溶酶原激活物(t-PA)和纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)活性。并用WST-1比色法观察VEGF对上述VEC增殖的影响。结果:与空白对照组(VEGF 0μg/L)比较,10μg/L、20μg/L VEGF处理组NO、6-keto-PGF1α、PAI均明显增加,而ET、t-PA、t-PA/PAI均明显降低,并呈剂量依赖性。与正常健康兔VEC(正常VEC)比较,动脉粥样硬化家兔VEC(异常VEC)分泌ET、PAI、t-PA均明显增加,而NO、6-keto-PGF1α、t-PA/PAI均明显降低。结论:动脉粥样硬化家兔伴有内皮功能异常,而VEGF能促进正常和异常VEC的增殖并分泌NO、PGI2、PAI,而抑制ET、t-PA的分泌,使t-PA/PAI降低。
- 孙玉梅刘启功阎继锋杨鹏伟王忠民李文兰云霞
- 关键词：动脉粥样硬化血管内皮生长因子血管内皮细胞再狭窄
