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鼻咽癌HSP90β的表达及临床意义被引量：4: 2005年; 目的:探讨鼻咽癌组织中HSP90β表达及其与组织分级、预后之间的关系。方法:应用免疫组化SP法检测50例鼻咽癌组织中HSP90β的表达情况,并分析其表达与鼻咽癌临床与预后之间的关系。结果:鼻咽癌中HSP90β阳性率高于鼻咽部正常组织,而且鼻咽癌分化程度越低,HSP90β的表达越强;HSP90β阴性表达者5年生存率明显高于阳性者。结论:说明HSP90β过度表达可能与鼻咽癌的发生、发展以及预后有关。; 赵菊梅刘涛田聆魏于全梁传余; 关键词：鼻咽癌组织免疫组化SP法

人热休克蛋白90β-cDNA基因克隆及其真核表达载体的构建: 2006年; 本研究旨在克隆人热休克蛋白90β(HSP90β)基因,构建其真核表达载体pcDNA3.1(+)-hHSP90β,为研究hHSP90β的基因治疗奠定实验基础。按Invitrogen公司操作说明用TRIzolReagent提取鼻咽癌总RNA,并经RT-PCR获得hHSP90βcDNA。用纯化的hHSP90βcDNA与PGEMEasyTVector连接,挑选白色菌落进行鉴定,结果为重组质粒,命名为PGEM-hHSP90β。将PGEM-hHSP90β及pcDNA3.1(+)质粒经AflII和Xbal双酶切、胶回收纯化酶切片段后,体外连接酶切片段,使其定向重组,再将重组DNA转化XL1-blue,经复苏后,在含Ampr的LB固体培养基上筛选出阳性克隆。挑取的LB固体培养基上的单菌落经酶切及测序鉴定,证实为阳性克隆,即hHSP90β与pcDNA3.1(+)体外重组成功,命名为pcDNA3.1(+)-hHSP90β。采用体外重组技术,成功地将人HSP90β插入了真核表达载体pcDNA3.1(+)中。; 刘涛赵菊梅田聆魏于全梁传余

热休克蛋白90β在鼻咽癌组织中的表达及与预后的关系被引量：5: 2005年; 目的:探讨热休克蛋白90β在鼻咽癌中的表达,评估其在鼻咽癌预后中的作用。方法:用免疫组织化学方法检测50例鼻咽癌组织和鼻咽部炎性组织中热休克蛋白90β的表达情况,分析其与临床病理特征的关系及对预后的影响。结果:HSP90β在鼻咽部炎性组织、鼻咽癌组织中的阳性表达率分别为24·0%、56·0%,在鼻咽癌中的表达阳性率明显高于鼻咽部炎性组织(P<0·01)。鼻咽癌中的HSP90β阳性表达与肿瘤的分化程度有关,随着鼻咽癌分化程度的降低,HSP90β的阳性表达率升高。HSP90β阴性表达者的预后显著优于HSP90β阳性表达者(P<0·05)。结论:HSP90β在鼻咽癌中的表达明显增强,HSP90β过度表达可能与鼻咽癌的发生、发展以及预后有关,HSP90β有可能成为判断鼻咽癌预后的指标之一。; 赵菊梅刘涛田聆梁传余; 关键词：鼻咽癌免疫组化

结直肠癌疫苗研究进展被引量：1: 2004年; 结直肠癌有广泛的抗原基础 ,针对这些抗原可以设计多种类型疫苗 ,近年来结直肠癌疫苗研究发展较快 ,在寻找新治疗靶点、疫苗联合应用、改变疫苗转运及接种方式等都取得了一定进展。现就结直肠癌疫苗的设计形式及研究进展作一综述。; 王永生田聆魏于全; 关键词：结肠直肠癌癌症疫苗

EBV-LMP1与HSP90真核双表达质粒的构建及体外表达被引量：1: 2006年; 目的从鼻咽癌组织中克隆EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)与热休克蛋白90β(HSP90β)基因,构建其真核双表达质粒pIRES-LMP1-HSP90β,并检测其在体外的表达。方法提取鼻咽癌组织总RNA,逆转录PCR获得LMP1基因片段和HSP90β基因片段,将二者连接于真核双表达质粒pIRES中,测定序列后,用脂质体包裹转染COS细胞,采用RT-PCR和Westernblot检测LMP1和HSP90β的表达。结果核酸序列测定证实本实验所构建的质粒正确,该双表达质粒在体外转染COS细胞后可表达LMP1和HSP90β分子。结论实验所构建的pIRES-LMP1-HSP90β双表达质粒能在体外同时表达LMP1和HSP90β分子。; 赵菊梅刘涛田聆魏于全文艳君; 关键词：潜伏膜蛋白1 鼻咽癌

鼻咽癌相关抗原的血清学筛选与鉴定被引量：4: 2004年; 目的　有关鼻咽癌肿瘤抗原的研究还仍然集中于研究EB病毒与鼻咽癌的相互关系上 ,而有关鼻咽癌细胞本身的肿瘤抗原的研究到目前为止还几乎是空白。采用SEREX技术筛选与鉴定鼻咽癌相关肿瘤抗原。方法　从鼻咽癌肿瘤组织中提取mRNA ;构建鼻咽癌cDNA表达文库 ;利用SEREX技术筛选鼻咽癌cDNA表达文库 ;对阳性克隆进行测序、生物信息学分析。结果　①构建的鼻咽癌cDNA表达文库大小为 1.9× 10 8个重组子。②筛选出 10个阳性克隆。③测序 :有 8个阳性结果。④生物信息学分析 :除了一些已知的抗原如MAGE外 ,发现一个热休克蛋白基因家族的新成员 ,其在染色体水平上与HSPCB有 84 %的同源性 ,在氨基酸水平上有 97%的同源性。; 谢可田聆魏于全邓洪新赵霞李炯文艳君; 关键词：鼻咽癌抗原血清学 CDNA表达文库

鼻咽癌HSP70和HSP90β的表达及临床意义被引量：5: 2005年; 目的:探讨鼻咽癌组织中HSP70和HSP90β的表达及其与组织分级、预后之间的关系。方法:应用免疫组织化学SP法分别检测50例鼻咽癌组织中HSP70和HSP90β的表达情况,并分析二者表达与鼻咽癌临床与预后的关系。另取10例鼻咽部正常组织作为正常对照。结果:鼻咽癌中HSP70和HSP90β阳性率高于正常组织,而且鼻咽癌分化程度越低,HSP70和HSP90β的表达越强;HSP90β和HSP70阴性表达者5年生存率明显高于阳性者(P<0.05)。结论:HSP90β和HSP70的过度表达与鼻咽癌的发生、发展以及预后有关。; 刘涛梁传余田聆魏于全赵菊梅; 关键词：鼻咽肿瘤热休克蛋白70

异亮氨酸拉链修饰的可溶性CD40L在巴斯德毕赤酵母中的表达被引量：1: 2006年; 为了获得异亮氨酸拉链修饰的可溶性CD 40L(IZ-sCD 40L)在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达,首先用PCR和重叠PCR的方法得到了IZ-sCD 40L基因片段,然后构建了巴斯德毕赤酵母表达质粒pP ICZαA-IZ-sCD 40L,核酸测序分析表明IZ-sCD 40L的基因片段正确克隆到pP ICZαA质粒中,将其线性化后,电转化到巴斯德毕赤酵母G S115中,PCR筛选阳性重组菌株,经表型鉴定后,用甲醇进行诱导表达,经SDS-PAGE和W estern b lot印迹杂交结果证实了表达产物为重组IZ-sCD 40L的融合蛋白。; 杜小波田聆王永生刁鹏王国庆魏于全; 关键词：可溶性CD40L 巴斯德毕赤酵母

肿瘤相关抗原17-1A在毕赤酵母中的表达与鉴定被引量：1: 2006年; 目的利用P ich ia p astoris酵母表达系统表达糖基化的肿瘤相关抗原17-1A,为进一步设计肿瘤蛋白疫苗提供研究基础。方法通过RT-PCR从小鼠肾组织中扩增17-1A的cDNA,将其定向克隆到pP ICZαA质粒上,获得重组质粒pP ICZαA-17-1A,测序正确后,重组质粒电转化到P ich ia p astoris酵母菌株G S115中,在甲醇诱导下,利用其AOXⅠ基因的α信号肽,分泌表达17-1A抗原糖蛋白,并对获得的蛋白进行SDS-PAGE及W estern b lot分析鉴定。结果构建了pP ICZαA-17-1A重组质粒,通过电转化将目的基因整合入酵母基因组中,重组毕赤酵母表达能够表达17-1A抗原并检测到抗原发生了糖基化。结论能够通过毕赤酵母表达系统稳定表达糖基化的肿瘤相关抗原17-1A。; 王永生田聆刁鹏胡敏杜小波魏于全; 关键词：肿瘤相关抗原蛋白表达肿瘤疫苗

热休克蛋白与肿瘤的研究进展被引量：11: 2004年; 热休克蛋白 (HSPs)是一组重要的应激蛋白 (SP) ,在正常状态下有少量表达 ,应激状态下则明显提高。研究表明 ,热休克蛋白在肿瘤组织中表达异常 ,具有抑制细胞凋亡作用。从肿瘤组织中提取的HSP 肽复合物携带有多个T细胞表位 ,通过与抗原呈递细胞 (APC)上的受体结合而内化 ,经MHC I类途径激活特异性CTL和记忆性T细胞 ,引发机体细胞免疫反应 ,产生针对某种肿瘤内所有肿瘤细胞杀伤的效力 ,从而解决肿瘤抗原调变、很难鉴定来自病人自身癌组织的特异性抗原等问题。HSP -肽复合物作为疫苗用于肿瘤特异性免疫治疗。; 刘涛田聆魏于全赵菊梅梁传余; 关键词：热休克蛋白肿瘤结构特点生物学功能

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