四川省科技支撑计划(2010NZ0106)
- 作品数：13 被引量：60H指数：4
- 相关作者：廖党金叶勇刚李江凌谢晶罗丹丹更多>>
- 相关机构：四川省畜牧科学研究院中国农业大学洪雅县畜牧兽医局更多>>
- 发文基金：四川省科技支撑计划国家科技支撑计划国家奶牛产业技术体系项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- EMA-PCR检测金黄色葡萄球菌活菌的方法被引量：4
- 2013年
- 根据金黄色葡萄球菌(SA)耐热核酸酶编码基因(nuc基因)设计特异性引物,对试验菌株进行PCR检测,结果显示,金黄色葡萄球菌扩增出大小为480bp的特异性条带,而其他对照菌株未扩增出条带。由于传统PCR技术无法区分样品中的死细菌与活细菌,从而使检测结果往往出现很高的假阳性。本试验利用EMA能穿过死细菌的细胞膜并在光激活的作用下能与基因组DNA共价结合,从而能抑制死菌DNA进行PCR扩增的特性,建立了一种快速、有效的检测金黄色葡萄球菌活菌的EMA-PCR方法,较传统PCR大大提高了检测的准确性和可靠性,该方法检测灵敏度可达15CFU/mL。
- 赵素君李江凌谢晶曹冶王秋实叶勇刚罗丹丹叶健强廖党金
- 关键词：金黄色葡萄球菌
- 若尔盖县牦牛及藏系绵羊寄生虫病调查被引量：6
- 2012年
- 本文通过剖检20头牦牛和镜检30份新鲜藏系绵羊粪便,对若尔盖县牛羊进行了寄生虫病调查。结果表明:感染牛羊的寄生虫主要为前后盘吸虫、鞭虫、仰口线虫、绦虫和牛蝇蛆,其中前后盘吸虫的危害最大。
- 叶勇刚易军李双年廖党金唐木克王林保
- 关键词：寄生虫牦牛藏系绵羊
- 养殖场环境中链球菌胞外蛋白因子PCR检测方法建立
- 2013年
- 为了快速检测养殖场环境中链球菌的污染情况,试验利用链球菌胞外蛋白因子核苷酸特异序列设计引物,建立养殖场环境中链球菌的PCR快速检测方法。结果表明:从链球菌标准阳性株中获得大小为197 bp的特异性目的片段,而肠毒性大肠杆菌、沙门杆菌、金黄色葡萄球菌等均不能检出;10倍系列稀释结果显示该方法敏感性可达到单个菌株;在处理环境样品时,能检测到4×103cfu/g的环境链球菌。说明该方法具有简单、快速、准确的特点,大大缩短了检测环境中致病性猪链球菌的时间。
- 曹冶谢晶赵素君王秋实于吉锋罗丹丹叶勇刚李兴玉李江凌魏甬廖党金
- 关键词：链球菌
- 奶牛源坏死梭杆菌四川株分离鉴定及生物学特性分析被引量：1
- 2013年
- 从四川规模化奶牛场患腐蹄病的奶牛蹄部分离坏死梭杆菌,采用常规实验室检测方法对其进行分离鉴定,并进行坏死梭杆菌分离条件、保存条件、实验动物致死和感染试验以及药敏试验。结果:不同的分离方法导致坏死梭杆菌的分离率不同,坏死梭杆菌在不同的保存条件下存活时间不同;攻毒后死亡小鼠注射部位形成脓肿;绵羊蹄部感染坏死梭杆菌后蹄部灌脓,形成脓肿;药敏试验表明坏死梭杆菌对林可霉素、洁霉素、强力霉素、阿莫西林、氨苄青霉素、头孢唑啉高度敏感,对头孢拉定、青霉素中度敏感,对卡那霉素、氧氟沙星、四环素、链霉素耐药。
- 谢晶廖党金汪明叶勇刚曹冶赵素君李江凌罗丹丹王秋实潘保良
- 关键词：坏死梭杆菌奶牛生物学特性
- 一种适合检测养殖场环境中链球菌的PCR检测方法被引量：2
- 2013年
- 根据溶菌酶释放蛋白的编码序列特点设计引物,以建立养殖场环境中链球菌的PCR快速检测方法。结果在链球菌参考株都扩增到885 bp特异性目的片段,而肠毒素性大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等均不能检出;10倍系列稀释结果显示,本方法敏感性可达到检测单个菌株;对处理环境样品时,能检测到4×103CFU/g的环境链球菌。该方法具有简单、快速、准确的特点,大大缩短了检测环境中致病性猪链球菌的时间。
- 王秋实曹冶谢晶赵素君于吉锋罗丹丹叶勇刚李兴玉李江凌魏甬廖党金
- 关键词：溶菌酶释放蛋白链球菌
- 奶牛场常用乳头药浴剂抑菌效果观察
- 2012年
- 采用平板细菌计数法对四个牛场奶牛乳头药浴前、后的细菌总数进行统计分析。结果显示A、B、C三个牛场乳头药浴前与药浴后的细菌总数差异极显著(P<0.05),D牛场乳头药浴前与药浴后的细菌总数无统计学差异(P>0.05)。表明A^C场奶牛乳头药浴剂效果较好,D场效果欠佳。此外,对培养的细菌进行革兰氏染色和镜检,结果显示主要有沙门氏菌、大肠杆菌、葡萄球菌和枯草芽孢杆菌,与文献报道相符。
- 罗丹丹王文贵于吉峰叶勇刚廖党金汪明谢晶李江凌
- 关键词：细菌计数差异显著性检验革兰氏染色
- 坏死梭杆菌QL03株绵羊感染模型的建立及免疫保护性试验被引量：3
- 2012年
- 坏死梭杆菌是奶牛腐蹄病的重要致病菌。用奶牛源坏死梭杆菌QL03分离株以不同浓度菌量感染绵羊蹄部,通过观察绵羊蹄部感染情况、病理变化和动物回归试验,建立了坏死梭杆菌分离株绵羊感染模型。并通过绵羊免疫保护性试验验证了绵羊作为奶牛源坏死梭杆菌QL03分离株动物模型的可行性,为进一步研究坏死梭杆菌有效的疫苗奠定实验基础。
- 谢晶廖党金叶勇刚林毅赵新元涂悒曹冶赵素君李江凌罗丹丹于吉峰
- 关键词：坏死梭杆菌腐蹄病绵羊免疫
- 犊牛腹泻病流行情况调查与解决措施被引量：28
- 2012年
- 通过对5个牛场和1个散养区共930头犊牛进行调查,结果发现,犊牛腹泻发病率为30%～72%,平均为49.5%;死亡率为0.5%～2.0%,平均为1.4%。犊牛腹泻病有明显的季节性,冬季和春季多发。病因主要为消化不良、细菌感染、病毒感染、寄生虫感染、气候变化、饲喂霉变饲料等。建议采取加强牛场环境卫生管理、改善饲养环境、调整饲料结构、定期驱虫及加强冬春季预防工作等应对措施。
- 廖党金叶勇刚汪明何万平徐文福潘保良李江凌谢晶王秋实罗丹丹于吉锋
- 关键词：犊牛腹泻病
- 肠出血性大肠杆菌O157∶H7 EMA-PCR检测技术的建立被引量：5
- 2012年
- 肠出血性大肠杆菌O157∶H7是一种重要的人畜共患传染病病原菌。为建立一种特异、灵敏的O157∶H7新型检测技术,以O157抗原基因(rfbE基因)为模板设计特异性引物,利用叠氮溴化乙锭(ethidium monoazide bromide,EMA)处理菌液,沸水浴法制备细菌裂解液,优化PCR条件,建立一种快速、有效的O157∶H7活菌EMA-PCR检测方法。结果显示:EMA-PCR可从rfbE基因阳性菌株CVCC248和两株临床分离菌株cd0912、cd0803中扩增出大小为495 bp的特异性条带,检测灵敏度可达12 CFU/mL。经EMA处理,从含有1%～100%O157∶H7 CVCC248活菌混合悬液制备的DNA中均可扩增出目的片段。因此,成功建立了肠出血性大肠杆菌O157∶H7的EMA-PCR检测方法;该方法可避免因分析的样品中含有死细菌而造成的假阳性检测结果,检测的准确性和真实性较传统PCR大大提高。O157∶H7 EMA-PCR技术的建立为O157∶H7的临床诊断提供了新的方法,具有重要的实际应用价值和良好的应用前景。
- 赵素君谢晶曹冶李江凌王秋实叶勇刚罗丹丹叶健强廖党金
- 关键词：肠出血性大肠杆菌
- 新药物对奶牛感染性蹄病动物模型临床疗效试验被引量：2
- 2012年
- 为探索治疗奶牛感染性蹄病的新药物,以患蹄病的绵羊为奶牛感染性蹄病的动物模型进行临床治疗试验。试验药物是针对奶牛感染性蹄病病原特点研制的5种配方,即配方Ⅰ～配方Ⅴ。选择自然感染蹄病的绵羊50只,随机分为7个组,各组羊只分别为配方Ⅰ组6只、配方Ⅱ组7只、配方Ⅲ组10只、配方Ⅳ组9只、配方Ⅴ组8只、药物对照组5只、空白对照组5只。结果表明,在本试验药物组中,临床疗效依次为配方Ⅴ>配方Ⅲ>配方Ⅱ>配方Ⅳ>配方Ⅰ,配方Ⅴ的效果最佳,有效率和治愈率分别达100%、88.9%。综合比较,本试验药物的治疗效果要优于传统药物。
- 廖党金谢晶李江凌曹冶文豪赵素君田浪李红
- 关键词：动物模型奶牛
