云南省应用基础研究计划面上项目(2009ZC186M)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：毕研伟姬秋彦徐维明李智华张营营更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：云南省应用基础研究计划面上项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- HPV16 L2肽段偶联AP205 VLP的原核表达及免疫原性分析被引量：1
- 2012年
- 目的:将编码HPV16衣壳蛋白L2的65～71、112～120免疫优势表位连接到RNA噬菌体衣壳蛋白AP205氮端,组装形成病毒样颗粒,通过在大肠杆菌中实现表达及纯化,对其免疫原性进行研究。方法:合成编码AP205衣壳蛋白基因和HPV16 L2的65～71、112～120位氨基酸表位的基因序列,PCR连接并克隆至pET30a(+)原核表达载体,构建重组表达质粒pET30-AP205-HPV16ΔL2,转化大肠杆菌BL21(DH3)感受态细胞,IPTG诱导表达。表达蛋白经凝胶层析纯化及SDS-PAGE、Western blot等理化性质检测,免疫接种ICR小鼠,通过间接ELISA法检测其免疫原性。结果:成功构建重组表达质粒,重组蛋白在大肠杆菌中以可溶性表达,透射电镜观察可见典型病毒样颗粒,该VLP在动物实验中表现出较好的免疫原性。结论:成功将HPV16 L2表位偶联AP205以形成VLP,在大肠杆菌中实现可溶性表达。
- 姜博毕研伟张营营蔡路奎姬秋彦李智华徐维明
- 关键词：人乳头瘤状病毒
