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miR-181a对耳蜗毛细胞c-fos表达调控的研究被引量：1: 2012年; 目的探讨在耳蜗毛细胞氧化损伤中表达异常的miR-181a对原癌基因c-fos的生物学调控作用。方法采用叔丁基过氧化氢（t-BHP）染毒，设50、100、200μmol／L 3个浓度组和未染毒对照组对HEI-CO1细胞染毒12h，提取细胞总RNA及细胞总蛋白，采用荧光定量PCR（qPCR）检测miR-181a／-181d表达；选择表达异常的miR-181a为研究对象，检索生物信息学网站，对c-fos 3′端非翻译区域（3′-UTR）上miR-181a可能的作用靶序列进行预测分析；用脂质体转染入miR-181a的mimics，qPCR检测转染效率；qPCR观察c-fos mRNA水平表达量的改变；免疫印迹（Western blotting）法观察毛细胞中c-fos蛋白表达量的改变；构建野生型的融合c-fos-3′UTR的重组pGL3质粒（pGL3-c-fos-3′UTR-WT），利用双荧光素酶报告基因检测系统检测在高表达miR-181a后荧光素酶活力的改变情况。结果qPCR结果显示，miR-181a在100、200μmol／L染毒浓度组表达下调，低表达倍数分别为0.744和0.766，差异均有统计学意义（P〈0．01）；而miR-181d在50μmol／L浓度组表达升高，高表达倍数为1．29，差异亦有统计学意义（P〈0．01），在100、200μmol／L 2个染毒浓度组中的表达变化的差异无统计学意义（P〉0．05）；通过预测显示，在人类和小鼠中，c-fos均受miR-181a的调控，在种子区域完全互补，靶序列在物种之间也十分保守；脂质体转染入miR-181a mimics 24h后，qPCR结果显示，在miR-181a mimics转染组中miR-181a升高892．979倍；与对照组相比，在miR-181a mimics转染组的耳蜗毛细胞中c-fos mRNA的表达增高，差异有统计学意义（P〈0．05）；Western blotting观察结果显示，与对照组相比，c-fos蛋白在miR-181a mimics转染组中表达升高，差异有统计学意义（P〈0．01）；成功构建pGL3-c-fos-3′UTR-WT的重组质粒，双荧光素报告基因检测系统结果显示，在高表达miR-181a时，野生型pGL3-c-fos-3′U; 陈利梅王致郭垚刘移民; 关键词：C-FOS MIRNA 耳蜗毛细胞靶基因

噪声性听力损失易感人群筛选方法探讨被引量：2: 2013年; 目的探讨噪声性听力损失的易感、耐受人群筛选方法，为今后研究提供帮助。方法选择噪声暴露强度在75—120dB范围内的企业噪声作业工人为研究对象。进行现场职业卫生学调查、收集工人基本情况和工人听阈水平检测的资料，采用国内外筛选噪声性易感和耐受人群的3种方法，判断不同方法在筛选易感人群和耐受人群的情况。通过配对X2检验做两两比较，并且对样本的噪声暴露情况、一般情况的均衡性以及噪声性听阈位移情况为依据，判断哪种方法更好。结果各个方法筛选出来的易感人群和耐受人群的噪声暴露情况，基本情况，左右耳听阈水平都有较好的均衡性，配对X2检验发现两两之间差异无统计学意义（P〉0．05）。但从专业的角度比较，各数值间存在较多错配情况，高频听阈情况有统计学差异，方法B和方法C结果较为相近且优于方法A。结论现今我国工人年轻化，自我保护意识加强，个体防护措施做的较之前有很大的提高，采用方法B更适合作为我国现阶段噪声性听力损失人群的特征。; 郭垚赵远段传伟邓燕君周浩肖吕武刘移民; 关键词：噪声听力损失易感性

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广州市科技计划项目(2010Y1-C051)

文献类型

领域

主题

机构

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