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福建省自然科学基金(2006J0380)
作品数:
2
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相关作者:
王琳
董菁
周飞
卢雅丕
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人肠三叶因子真核载体的构建与表达
2008年
目的构建人肠三叶因子(hITF/hTFF3)的真核载体并在真核细胞中表达。方法从人结肠粘膜提取总RNA,逆转录多聚酶反应制备总cDNA,PCR扩增hTFF3基因,TA克隆至pGEMT载体中,测序鉴定后将hTFF3基因重组到真核表达载体pCMV5-myc中,转染真核细胞293-T,裂解细胞后分别采用鼠抗人c-myc抗体和鼠抗人TFF3抗体行Western-blot了解hTFF3表达情况。结果从人结肠粘膜成功克隆了hTFF3基因并经测序验证,构建了pCMV5-myc-hTFF3真核表达载体,转染细胞后行western-blot提示hTFF3可在293-T细胞中表达。结论成功构建pCMV5-myc-hTFF3重组真核载体并在293-T细胞中表达hTFF3蛋白,为进一步研究hTFF3的功能、作用机制及相互作用蛋白奠定了基础。
卢雅丕
周飞
王琳
张波
董菁
任建林
关键词:
基因重组
真核表达载体
酵母双杂交技术筛选肠三叶因子结合蛋白基因的研究
2008年
肠三叶因子(intestinal trefoil factor,ITF/TFF3)是三叶因子家族(trefoil factor family,TFF)成员之一,1991年由Suemori等在大鼠空肠黏膜中发现,是一种胃肠黏膜保护因子,也可促进肿瘤的侵袭扩散,有学者甚至提出,TFF3可作为胃癌预后不良的标志物。因此,TFF3是胃肠黏膜保护与胃肠道肿瘤研究领域中的一种重要蛋白质,但其作用机制迄今尚未阐明。
卢雅丕
董菁
周飞
王琳
陈美娅
任建林
关键词:
肠三叶因子
酵母双杂交技术
结合蛋白基因
胃肠黏膜保护
TREFOIL
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