国家自然科学基金(30270550)
- 作品数：9 被引量：76H指数：5
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- 尾加压素预处理对大鼠心脏缺血再灌注损伤的影响被引量：6
- 2003年
- 目的 :探讨尾加压素 (UII)预处理对于离体灌流大鼠心脏缺血再灌注 (I/R)损伤的影响。方法 :在离体灌流的SD大鼠心脏I/R模型上 ,以UII预灌注心脏 ,采用MFLLab2 0 0心功能软件监测心功能 ,以试剂盒测定心肌细胞ATP、总钙、丙二醛含量和乳酸脱氢酶 (LDH)漏出 ,并观察其对于冠脉流出量 (CPF)的影响。结果 :UII预处理组与单纯I/R组比较 ,冠脉流出液中LDH低 2 8% [(78 3± 18 1)U/Lvs (10 9 3± 2 3 9)U/L ,P <0 0 5 ],心肌组织MDA和钙含量分别低 2 4 %和 2 7% (P <0 0 5 ) ;ATP含量高 73% (P <0 0 5 )。与I/R组比较 ,UII预处理组CPF高 4 2 % [(5 4± 0 7)mL/minvs (3 8± 0 8)mL/min ,P <0 0 5 ],LVEDP低 2 0 % (P <0 0 5 ) ,±dp/dtmax分别高 2 5 %和 4 5 % (P <0 0 5 ) ;冠脉流出液中NO-2 /NO-3 含量高 6 3% (P <0 0 5 )。结论 :UII预处理可以减轻离体灌注大鼠心脏I/R所造成的损伤 ,其机制与NO介导的冠脉扩张效应有关。
- 刘秀华武旭东蔡莉蓉刘凤英唐朝枢苏静怡
- 关键词：尾加压素肽类缺血预处理心脏缺血再灌注损伤
- 缺氧预处理对于老年大鼠心肌顿抑的影响被引量：1
- 2003年
- 目的 探讨缺氧预处理对于老年大鼠心肌顿抑的影响及其保护机制。方法 老年和成年SD大鼠分别随机分为单纯心肌顿抑组、缺氧预处理 +心肌顿抑组、SB2 0 35 80 +缺氧预处理 +心肌顿抑组和假手术组 4组 ,采用在体心脏心肌顿抑模型 ,观察缺氧预处理对于心肌舒缩功能、乳酸脱氢酶、肌酸激酶漏出和亚硝酸盐含量的影响 ,以及p38丝裂素活化蛋白激酶 (p38MAPK)选择性抑制剂SB2 0 35 80对于缺氧预处理作用的影响。结果 缺氧预处理明显减轻老年大鼠心肌收缩功能抑制的程度 ,与单纯心肌顿抑组比较 ,收缩期左心室内压力变化最大速率 (+dp dtmax)和零负荷时左室心肌最大收缩速率 (Vmax)分别高 35 %和 4 9% (P <0 .0 5 )。缺氧预处理减轻再灌注结束时心肌顿抑大鼠血清亚硝酸盐的下降程度 ,与老年心肌顿抑组大鼠比较 ,其含量高 5 4 % (P <0 .0 1) ,SB2 0 35 80 2消除缺氧预处理上调血清亚硝酸盐含量和老年大鼠心肌收缩功能的保护作用。结论 缺氧预处理可以减轻老年大鼠心肌顿抑所致收缩功能抑制 ,其保护机制涉及p38MAPK介导的一氧化氮的上调。
- 刘秀华武旭东庞永正唐朝枢
- 关键词：缺氧预处理心肌顿抑心肌再灌注损伤蛋白激酶心肌疾病心肌再灌注损伤
- 缺氧预处理诱导心肌细胞蛋白质组变化的初步研究被引量：21
- 2006年
- 缺氧预处理(hypoxiapreconditioning,HPC)可模拟缺血预处理(ischemicpreconditioning,IPC)对缺血/再灌注心肌的保护作用,涉及细胞内众多分子事件.本工作旨在采用双向电泳和质谱分析等蛋白质组分析技术,发现缺氧预处理后心肌细胞蛋白质整体表达上的变化,初步分析其与缺氧预处理心肌保护作用的关系.将原代培养的SD乳鼠心肌细胞分为2组(n=6):(1)缺氧预处理组(HPC):将细胞置缺氧仓内短暂缺氧20min进行缺氧预处理(HPC),制备心肌细胞蛋白提取物;(2)对照组(control):细胞置于培养箱内持续常氧孵育至实验结束,提取蛋白.采用双向凝胶电泳和图像扫描,经蛋白样本分离和考马斯亮蓝染色后比较分析,选取3个差异表达蛋白点进行胶内酶切、肽质量指纹图谱分析和数据库检索.双向电泳可分离约529±45个蛋白质,点匹配率约为78%±7.5%.18种蛋白质在HPC后发生明显表达差异,其中12种蛋白质表达降低,6种表达增高.经质谱分析鉴定出的3种蛋白质分别为myosinlightpolypeptide3,nucleosidediphosphatekinase(NDPK)和calreticulin(CRT).缺氧预处理引起心肌细胞蛋白质组变化,初步发现其中myosinlightpolypeptide3表达下调、nucleosidediphosphatekinase和calreticulin表达增加,可能通过调节心肌细胞的收缩性、激活G蛋白、调节细胞内Ca2+浓度而保护心肌.本工作通过研究缺氧预处理延迟保护过程中心肌内源性蛋白表达水平的变化,有助于从细胞水平探讨预处理延迟保护机制.
- 徐菲菲孙胜刘秀华
- 关键词：缺氧预处理心肌细胞蛋白质组双向电泳质谱
- 缺氧预处理大鼠心肌组织蛋白质组双向凝胶电泳分析被引量：5
- 2004年
- 目的 :分析缺氧预处理诱导的大鼠心肌组织与正常心肌组织蛋白质的差异表达。方法 :采用双向凝胶电泳技术和计算机辅助的图像分析方法 ,对缺氧预处理大鼠心肌组织与正常大鼠心肌组织胞浆蛋白质进行分离和比较分析。结果 :正常心肌组织可分离 2 71± 2 3 个蛋白点 ,蛋白点匹配率为 75 .2 3 %± 3 .5 4%。有 5种蛋白质在缺氧处理后发生了明显和稳定的量的改变 ,其中 2种 (Mr/ pI :18.1KD/ 3 .86,5 1.43KD/ 4.67)在缺氧预处理后表达增高 ,3种 (Mr/pI :3 3 .14KD/ 9.11,3 1.89KD/ 8.5 8,15 .85KD/ 8.2 4)在缺氧预处理后表达降低。结论 :缺氧预处理大鼠心肌组织双向电泳后蛋白表达与正常心肌组织有明显差异 ,有 2种蛋白表达明显增高 ,3种明显降低。
- 王彦珍孙胜蔡莉蓉徐菲菲刘秀华
- 关键词：缺氧预处理双向凝胶电泳分析
- 串珠素调节血管生成的研究进展被引量：1
- 2006年
- 细胞外基质的主要硫酸肝素类蛋白聚糖串珠素通过与血管壁细胞、生长因子和细胞外基质相互作用而调节血管生物学行为,最新研究发现串珠素参与血管生成的调节,其在新生血管形成与功能完善中的作用开始受到关注,本文简述串珠素在血管生成中的作用。
- 刘秀华
- 关键词：串珠素血管生成血管生物学
- 缺氧诱导因子-1在缺氧预处理心肌保护中的作用及其机制研究被引量：14
- 2004年
- 目的:研究缺氧诱导因子-1(HIF-1)在缺氧预处理(HPC)心肌细胞保护中的作用及其机制。方法:在培养的SD乳鼠心肌细胞缺氧/复氧(H/R)模型上,观察HPC对于24h后心肌细胞H/R损伤的影响,以MTT法测定心肌细胞存活率,试剂盒测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性。制备心肌细胞蛋白提取物,以磷酸化的细胞外信号调节激酶(ERK1/2)抗体测定HPC后不同时间ERK1/2活性,以聚丙烯酰胺电泳迁移实验观察HIF-1α磷酸化,并观察蛋白磷酸酶激动剂BDM和ERKs的上游激酶(MEK1/2)抑制剂PD98059对于HPC诱导的HIF-1α磷酸化以及心肌细胞保护作用的影响。结果:HPC可以提高心肌细胞H/R后存活率、减少LDH漏出,并激活ERK1/2,使HIF-1α发生磷酸化;蛋白磷酸酶激动剂BDM和ERKs的上游激酶MEK抑制剂PD98059可以消除HPC诱导的HIF-1α磷酸化和心肌细胞保护作用。结论:HPC可以提高乳鼠心肌细胞对于H/R的耐受性,其机制涉及ERKs介导的HIF-1α磷酸化。
- 刘秀华武旭东蔡莉蓉刘凤英
- 关键词：缺氧预处理心肌缺氧诱导因子-1
- 钠钙交换体与心肌缺血再灌注被引量：13
- 2005年
- 钠钙交换体是一种存在于细胞膜上的Na+ Ca2 + 转运蛋白,通过调节细胞钙稳态影响心肌结构、电生理与收缩功能,心肌缺血再灌注时,钠钙交换体反向转运导致细胞钙超载,是缺血再灌注造成细胞结构损伤、心律失常和收缩功能障碍的重要机制,抑制钠钙交换体活性已经成为缺血再灌注防治的新药物靶点。
- 刘秀华
- 关键词：病理学与病理生理学钙稳态缺血再灌注损伤
- 缺氧诱导因子-1α在缺氧预处理预防心肌细胞损伤中的作用被引量：21
- 2004年
- 本工作旨在研究缺氧预处理(hypoxic preconditioning, HPC)对于心肌细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulatedprotein kinases, ERK)活性、缺氧诱导因子 -1α(hypoxia-inducible factor-1α, HIF-1α)表达的影响,及其在缺氧复氧诱导心肌细胞损伤中的作用。通过在培养的SD 乳鼠心肌细胞缺氧/ 复氧(H/R)模型上, 观察HPC 对于24 h 后H/R 诱导心肌细胞损伤的影响, 以台盼蓝排斥实验检测心肌细胞存活率、以 TUNEL 法检测细胞凋亡、并用荧光素染料 Hoechst33258 测定心肌细胞凋亡率; 制备心肌细胞蛋白提取物,以磷酸化的 ERK1/2 抗体测定 ERK1/2 活性, 以抗HIF-1α 抗体检测 HIF-1α 的表达,并观察ERKs 的上游激酶(MEK1/2)抑制剂PD98059 对于HPC 诱导的ERKs 磷酸化、HIF-1α 表达以及心肌细胞保护作用的影响,并分析细胞损伤与 ERK1/2 活性、HIF-1α 表达量之间的相互关系。结果显示缺氧复氧造成心肌细胞损伤, HPC 可以增加心肌细胞 H/R 后存活率,降低凋亡率,并激活 ERK1/2,诱导 HIF-1α 表达;细胞凋亡与 ERKs 活性、HIF-1α 表达量之间存在负相关,即 ERKs 活化、HIF-1α 表达与预防细胞损伤有关;而 ERKs 活性与 HIF-1α 表达量之间存在正相关,ERKs 的上游激酶MEK抑制剂PD98059 可以消除HPC
- 徐菲菲刘秀华蔡莉蓉
- 关键词：缺氧诱导因子-1Α缺血预处理细胞凋亡心肌细胞
- 核转录因子-κB在缺氧预处理抑制心肌细胞凋亡中的作用
- 2004年
- 目的 :研究缺氧预处理 (hypoxicpreconditioning ,HPC)对于心肌细胞蛋白激酶C(PKC)和核转录因子κB (NF κB)表达的影响 ,及其在缺氧复氧诱导心肌细胞凋亡中的作用。方法 :在培养的SD乳鼠心肌细胞制作缺氧 /复氧 (H/R)模型 ,以荧光素染料Hoechst3 3 2 5 8测定心肌细胞凋亡率 ;制备心肌细胞蛋白提取物 ,以新PKCε亚型 (nPKCε)特异性抗体测定nPKCε相对蛋白含量 ;以抗NF κB抗体检测NF κB的表达 ;并以PKC抑制剂H7与心肌细胞预孵育后 ,观察H7对于HPC诱导的PKC和NF κB表达上调以及心肌细胞保护作用的影响。结果 :缺氧复氧造成心肌细胞凋亡 ,HPC可以降低心肌细胞H/R后凋亡率 ,并诱导nPKCε和NF κB表达上调 ;PKC抑制剂H7可以消除HPC诱导的PKC、NF κB表达上调和心肌细胞保护作用。结论 :HPC可以提高乳鼠心肌细胞对于H/R的耐受性 ,其机制涉及PKC介导的NF κB表达上调。
- 徐菲菲刘秀华蔡莉蓉
- 关键词：核转录因子-ΚB缺氧预处理心肌细胞细胞凋亡
