国家自然科学基金(81000629)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
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- 相关机构：北京协和医院中国医学科学院北京协和医学院更多>>
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- 双模态标记F344大鼠骨髓间充质干细胞移植入大鼠心脏后离体及在体影像示踪被引量：4
- 2012年
- 目的利用超小超顺磁性氧化铁(USPIO)标记带有红色荧光蛋白(RFP)的F344大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),探索双模态成像示踪标记干细胞示踪的可行性。方法使用含USPIO(40μg Fe/ml)的培养基与BMSCs/RFP共孵育培养24 h,标记后行普鲁士蓝染色、透射电镜检查及台盼蓝染色验证标记的有效性和安全性。实验组(n=8)通过心肌局部注射方式将双标干细胞移植至急性心肌梗死F344大鼠的梗死心肌周围,术后不同时间点(1 d、1周、2周和4周)行磁共振成像和荧光成像,对双标干细胞进行示踪并比较信号强度变化;对照组(n=2)不注射细胞,行磁共振和光学成像。4周后将大鼠麻醉处死后取心脏病理行HE染色、普鲁士蓝染色和荧光成像,观察双标干细胞在心肌内的分布。结果共孵育培养24 h的方式可以有效、安全地构建USPIO-RFP双标BMSCs干细胞,普鲁士蓝染色显示USPIO标记阳性率为99%,透射电镜提示USPIO颗粒主要位于胞质内溶酶体中。台盼蓝染色显示标记组和阴性对照组活细胞率差异无统计学意义(95.7%比96.3%,P>0.05)。心肌局部注射双标干细胞的实验组8只大鼠,磁共振成像在术后4周内均能观察到注射区域信号强度降低,并且信号强度随时间的延长变化无统计学意义(P=0.66);在体荧光成像未能检测到荧光信号,而离体荧光成像检测到心脏表面细胞注射区域有较弱的荧光。病理切片染色显示梗死心肌周围细胞核密度增加,心肌中蓝染颗粒及荧光成像发光分布区域与HE染色中细胞核密度增加区域一致。结论USPIO-RFP双标干细胞注射至大鼠急性梗死心肌后,在体磁共振成像在一定时间内能够实现对干细胞的示踪成像,离体荧光成像和病理荧光成像可以示踪移植干细胞。
- 曹剑王怡宁石新琳马国涛孔令燕薛华丹雷晶何泳蓝金征宇
- 关键词：红色荧光蛋白骨髓间充质干细胞
- 活体MR成像监测移植干细胞治疗SD大鼠心肌梗死并评价左心功能的可行性研究被引量：4
- 2011年
- 目的以超小超顺磁性氧化铁(USPIO)标记SD大鼠脂肪来源干细胞(ADSCs),探讨临床型1.5T MR扫描仪活体示踪SD大鼠急性心梗后心肌注射USPIO标记的干细胞并同时评估心功能的可行性。方法 USPIO40μg Fe/ml、多聚赖氨酸(poly-l-lysine,PLL)1.5μg/ml与ADSCs共孵育培养,普鲁士蓝染色和透射电镜验证标记有效性、MTS试验验证标记安全性。开胸结扎实验组(n=10)SD大鼠冠状动脉前降支建立心梗模型并于心肌内注射标记干细胞,术后利用1.5T MR扫描仪对实验组和空白对照组(n=5)大鼠行磁共振成像,观察心肌信号、计算并比较两组大鼠的左室舒张末容积(left-ventricular end-diastolic volume,LVEDV)、左室收缩末容积(left-ventricular end-systolic volume,LVESV)及左室射血分数(left-ventricular ejection fraction,LVEF)。病理组织学检查观察心肌结构和标记ADSCs的分布。结果普鲁士蓝染色显示USPIO标记ADSCs的阳性率>99%,透射电镜下可见黑色氧化铁颗粒位于细胞溶酶体内,MTS试验证实USPIO标记对ADSCs细胞活性无明显影响。开胸结扎冠脉前降支成功构建心梗模型,实验组大鼠心脏于FIESTA和FSPGR序列图像上可见左室前壁内信号降低和室壁运动异常,2D MDE序列图像上发现实验组心肌内延迟强化。实验组LVEDV、LVESV、LVEF分别为0.52±0.05ml,0.20±0.03ml和61.0±4.3%,空白对照组分别为0.44±0.04ml,0.25±0.05ml和42.7±13.4%,两组大鼠的LVEF、LVEDV差异具有统计学意义(P<0.05)。病理组织学检查于梗死心肌周边发现局灶性氧化铁颗粒沉积。结论临床1.5T MR成像仪活体示踪SD大鼠心肌梗死注射移植USPIO标记的ADSCs并同时评估SD大鼠心功能是可行的。
- 曹剑王怡宁孔令燕薛华丹马国涛雷晶何泳蓝李琢金征宇孟洁
- 关键词：脂肪来源干细胞急性心梗
- 超小超顺磁性氧化铁体外标记SD大鼠脂肪来源干细胞
- 2011年
- 目的评估超小超顺磁性氧化铁(ultrasmall superparamagnetic iron oxide,USPIO)标记SD大鼠脂肪来源干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)的有效性及安全性,探讨标记细胞体外磁共振成像(magnetic resonance ima-ging,MRI)特点。方法将USPIO40μg/ml及多聚赖氨酸(poly-L-lysine,PLL)1·5μg/ml的培养基与ADSCs共孵育培养24h,检测USPIO标记的有效性及安全性,并用MRI对标记细胞进行体外成像。结果普鲁士蓝染色显示USPIO标记ADSCs的阳性率为99%,透射电镜提示USPIO颗粒主要位于胞质内溶酶体中;台盼蓝染色实验显示活细胞数大于95%,MTS[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfopheny)-2H-tetrazolium,溴化噻唑蓝四氮唑]实验提示USPIO浓度为10、20、40、80和160μg/ml时不影响ADSCs增殖。ELISA结果表明标记细胞与未标记细胞组间培养液中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)水平无显著差异;体外条件下,MRI图像信号强度与标记细胞数量呈正相关。结论 USPIO标记ADSCs安全有效,MRI图像信号强度与标记细胞数量存在一定相关性,提示USPIO可用于在体条件下MRI成像示踪标记细胞。
- 曹剑王怡宁孔令燕薛华丹雷晶何泳蓝李琢孟洁金征宇
- 关键词：脂肪来源干细胞磁共振成像
