国家自然科学基金(20576104)
- 作品数：11 被引量：30H指数：3
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- 相关机构：江南大学武汉工业学院苏州农业职业技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 青霉纤维素酶催化水解壳聚糖的研究被引量：6
- 2008年
- 利用青霉来源的纤维素酶水解壳聚糖,由黏度变化的对比图可以看出:该酶对壳聚糖具有较强的水解活力。本文分别讨论了pH、温度、酶浓度及反应时间等因素对壳聚糖水解反应的影响,得到最佳反应条件为:pH为5.1,温度45℃,酶浓度为5g/L(酶∶底物为1∶10),反应时间为6h。反应6h后,由光度法测得的相对分子质量大约为2000。
- 高维丁文平夏文水
- 关键词：壳聚糖水解条件光度法
- 超滤分离具有壳聚糖酶活力的木瓜蛋白酶被引量：3
- 2007年
- 目的:研究超滤法分离具有壳聚糖酶活性的木瓜蛋白酶,操作时间压力、浓缩倍数对膜通量及酶活力和收率的影响,并对超滤浓缩的工艺条件进行优化;结果:室温下,超滤分离浓度为0.5%的木瓜蛋白酶溶液,压力为0.1MPa,浓缩倍数为8倍时,超滤后木瓜蛋白酶的蛋白酶和壳聚糖酶比活力分别从435.10U/mg和2.17U/mg提高到531.39U/mg和2.65U/mg,纯化倍数为1.22倍;超滤前后木瓜蛋白酶的蛋白质含量由29.56%提高到79.96%,还原糖含量由57.46%降低到6.27%。
- 谭晶陈季旺夏文水舒静
- 关键词：木瓜蛋白酶超滤凝胶电泳
- 色氨酸残基在双功能酶CCBE中的作用被引量：2
- 2007年
- 应用化学修饰剂NBS对从绿色木霉生产的纤维素酶中分离出的既具有壳聚糖酶活性又具有纤维素酶活性的单一组分(简称双功能酶CCBE)进行了修饰。结果表明,CCBE的壳聚酶活性中心需一分子色氨酸残基,CMCase活性中心需两分子色氨酸残基;底物保护作用及酶解动力学研究表明,CCBE的壳聚酶活性中心及CMCase活性中心的一分子的色氨酸残基位于底物结合部位,而CMCase活性中另一分子色氨酸残基位于催化结构中心。
- 刘靖夏文水
- 关键词：双功能酶色氨酸残基化学修饰
- 米曲霉外切β-D-氨基葡萄糖苷酶活性部位研究被引量：1
- 2010年
- 为了解米曲霉外切β-D-氨基葡萄糖苷酶(GlcNase)的结构特点,采用焦碳酸二乙酯(DEPC)和N-溴代琥珀酰亚胺(NBS),分别对GlcNase分子中的组氨酸(His)残基和色氨酸(Trp)残基进行化学修饰。DEPC修饰结果表明,有1分子His残基位于GlcNase的活性部位;NBS修饰结果表明,Trp残基处于GlcNase的活性部位,且至少有1分子Trp残基位于GlcNase活性部位的底物结合部位。
- 李冬霞夏文水
- 关键词：化学修饰活性部位
- 木瓜蛋白酶降解壳聚糖的研究进展被引量：6
- 2007年
- 利用非专一性酶降解壳聚糖生成具有重要生理活性和功能性质的甲壳低聚糖,这已成为近年来甲壳素科学领域中的一个研究热点。木瓜蛋白酶属巯基蛋白酶,广泛存在于番木瓜的茎叶和果实中,它是用于降解壳聚糖的非专一性酶中一种典型的商业酶制剂。本文详细介绍了近年来国内外木瓜蛋白酶降解壳聚糖的研究进展。
- 谭晶陈季旺舒静夏文水
- 关键词：壳聚糖降解木瓜蛋白酶
- 脂肪酶中具有壳聚糖酶活力组分的作用模式及鉴定被引量：4
- 2008年
- 以甲壳四糖为底物,研究了脂肪酶中具有壳聚糖降解活力酶组分的作用方式。高效液相(HPLC)和薄层层析(TLC)结果均表明,该酶的作用模式是从底物的末端依次切下单糖即氨基葡萄糖残基,并且最终完全生成氨基葡萄糖,证明该酶为目前报道较少的外切β-D-氨基葡萄糖苷酶。另外,该酶不能生成聚合度高于底物的产物,表明不具有转苷酶的活性。
- 李冬霞夏文水
- 关键词：脂肪酶
- 脂肪酶中具有壳聚糖降解活力酶组分的性质研究
- 2008年
- [目的]为酶法降解壳聚糖提供科学依据。[方法]从脂肪酶中分离具壳聚糖降解活力的电泳纯酶,研究pH值、温度和金属离子对壳聚糖酶活力的影响,并分析了该酶的pH值稳定性、热稳定性和底物特异性。[结果]该酶降解壳聚糖的最适pH值为4.5,最适温度为60℃。Ni^2＋、Co^2＋和Mn^2＋对酶活具有明显的激活作用,而Fe^3＋、Pb^2＋和Hg^2＋则强烈抑制酶的活力。该酶对脱乙酰度为73%～82%的壳聚糖具有较高的水解活性,而对脱乙酰度为64%和90%的壳聚糖水解活力较低。[结论]该酶在pH值为5～9范围内和60℃以下都具有较好的稳定性。
- 李冬霞夏文水
- 关键词：壳聚糖酶酶活酶学性质
- 双功能酶水解壳聚糖和纤维素的活性中心研究被引量：1
- 2007年
- 运用同一种酶具有两种及其以上酶活力时其活性中心个数的判定方法,对从纤维素酶中分离出的既具有壳聚糖酶活力又具有纤维素酶活力的双功能酶CCBE的活性中心个数进行了研究,结果表明:CCBE系运用同一活性中心催化水解两种不同底物。
- 刘靖夏文水
- 关键词：双功能酶纤维素酶壳聚糖酶
- 脂肪酶非专一性降解壳聚糖特性研究被引量：2
- 2010年
- 研究了4种不同来源脂肪酶中壳聚糖降解活力最高的脂肪酶降解壳聚糖的特性。结果表明该酶对不同脱乙酰度(DD)值壳聚糖均有水解作用,其中对CHS3的水解活力最高,最适作用温度均为60℃,但最适pH不同。脂肪酶水解不同DD值壳聚糖的反应均遵循Michaelis-Menten方程,中等DD值壳聚糖与脂肪酶的结合能力较强。红外光谱分析表明,脂肪酶在催化壳聚糖水解过程中,壳聚糖的侧链结构未发生改变。
- 李冬霞夏文水
- 关键词：脂肪酶
- 木瓜蛋白酶中具有水解壳聚糖活性的酶组分分离纯化被引量：2
- 2009年
- 采用超滤、制备电泳对木瓜蛋白酶进行分离纯化。结果显示:超滤后木瓜蛋白酶的蛋白酶和壳聚糖酶比活力分别从435.10U/mg和2.17U/mg提高到531.39U/mg和2.65U/mg,纯化倍数均提高了1.22倍。制备电泳图谱上显示有五条明显的酶条带,酶活性测定显示条带2具有较高的壳聚糖酶比活力。采用SDS-PAGE和HPLC对此纯化酶组分进行纯度鉴定,结果显示为单一条带和单一峰,说明木瓜蛋白酶中存在具有水解壳聚糖活力的酶组分。HPLC-MS/MS测定该纯化酶组分的氨基酸序列为MRITISGSPG SGTTTLGRSI AEKYSYRYVS AGEVFRGL AK ERNMDLAAFG KIAETDPAID LEIADARQKEI GESSDDIILE GRLAGWMVEN ADLKILLCAS PECRSTRIAA REGLTEKQ AFEMTIERE ACEAGRYMEYYEI DILDFSPYDL ILNSETFSAN ELFAIVDAAVS SLLKRE。
- 陈季旺谭晶夏文水
- 关键词：木瓜蛋白酶超滤制备电泳
