四川省自然科学基金(2009SZ0260)
- 作品数：6 被引量：10H指数：2
- 相关作者：杨晓红朱红唐恩洁彭丽娟杨健更多>>
- 相关机构：川北医学院南充市中心医院重庆医科大学更多>>
- 发文基金：四川省自然科学基金四川省教育厅资助科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- EPEC粘附相关蛋白融合表达载体的构建及表达被引量：1
- 2012年
- 目的构建与EPEC粘附相关蛋白IntiminC300、EspA、BfpA融合表达载体,并进行表达。方法用PCR方法从EPEC染色体中调取intiminC300、espA、bfpA基因,用基因重组的方法把3个基因片段用2个(Gly4Ser)3连接肽串联克隆到载体pQE30的多克隆区,转化宿主菌M15,用IPTG诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot检测表达的融合蛋白。结果酶切和测序表明成功构建了融合表达载体,SDS-PAGE检测表达蛋白的分子质量单位分别为36、43和76kd,与理论值相符,Western blot显示表达的融合蛋白均能被抗His标签抗体识别。结论本研究成功构建了EPEC粘附相关融合蛋白表达载体,并表达目的蛋白,为进一步研究融合蛋白的免疫原性奠定了基础。
- 杨健王朝莉彭丽娟杨晓红
- 关键词：EPEC粘附融合蛋白
- 重组质粒GM-CSF对K562细胞影响的初步研究
- 2011年
- 目的:观察重组质粒PcDNA3.1-GM-CSF对白血病细胞K562生长的影响。方法:采用MTT试验、NBT还原试验,观察PcDNA3.1-GM-CSF对K562细胞的影响。结果:PcDNA3.1-GM-CSF对K562细胞的增殖有明显抑制作用。转染PcD-NA3.1-GM-CSF的K562细胞部分可转化为具有吞噬功能的细胞。结论:重组PcDNA3.1-GM-CSF能抑制K562细胞的增殖。部分K562细胞能向单核细胞、巨噬细胞系分化。
- 朱红杨尚君杨小红李雪璐
- 关键词：粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子细胞分化
- 靶向线粒体绿色荧光蛋白表达载体的构建及初步应用被引量：2
- 2011年
- 目的:构建靶向线粒体绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体,观测其在蛋白质细胞内定位中的应用价值。方法:化学合成细胞色素C氧化酶8A亚单位信号肽编码序列,克隆该序列到载体pEGFP-N1多克隆区Nhe I和Hind III位点得到质粒pMito-EGFP,经测序鉴定后,用线粒体探针mitotracker染色已转染该载体的Hela细胞,荧光显微镜检测EGFP的细胞定位。以EPEC/EspF和EPEC/EspFL16E感染经pMito-EGFP转染的Hela细胞,免疫细胞化学法和荧光显微镜法观测野生型EspF和突变型EspFL16E的分布。结果:测序表明融合表达载体构建成功,荧光显微镜及图像分析表明该载体表达的EGFP和mito-tracker共同定位于细胞线粒体;用其作为探针发现:野生型EspF定位于细胞线粒体,而突变型EspFL16E定位于胞浆中。结论:pMito-EGFP可作为线粒体的分子探针对靶向线粒体的蛋白进行亚细胞定位。
- 杨健彭丽娟杨晓红
- 关键词：线粒体分子探针致病性大肠杆菌
- PcDNA3.1-rhGM-CSF重组质粒的构建及鉴定被引量：3
- 2010年
- 目的:构建PcDNA3.1-rhGM-CSF真核细胞表达载体。方法:采用PCR、T-A克隆及基因定向克隆技术,将rhGM-CSF基因插入PcDNA3.1(+)空载体,构建了PcDNA3.1-rhGM-CSF真核表达载体。经限制性内切酶酶切和DNA测序进行鉴定。结果:双酶切及DNA测序证实PcDNA3.1-rhGM-CSF真核细胞表达载体构建成功。结论:成功构建PcDNA3.1-rhGM-CSF真核细胞表达载体。
- 朱红唐恩洁杨晓红
- 关键词：粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子重组表达载体
- 66例糖尿病足临床特征分析被引量：2
- 2013年
- 目的对糖尿病足(DF)患者临床资料进行分析,探讨糖尿病足发生的临床特征、危险因素,指导临床进行有效的防治,提高其治愈率。方法对2010年1月～2011年5月在川北医学院附属医院DF患者66临床资料的平均血糖(MBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、白细胞总数(WBC)、白蛋白(ALB)、血脂、双下肢血管彩色多普勒超声(CDU)、病原菌培养及药敏试验等指标进行回顾性分析。结果 DF患者MBG为(16.9±7.1)mmol/L,HbA1c为(10.7±3.6)%,ALB为(31.7±7.3)g/L,WBC为(10.8±7.2)×109/L,三酰甘油(TG)为(1.39±0.59)mmol/L,总胆固醇(TC)为(4.08±1.32)mmol/L,低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)为(2.35±0.95)mmol/L,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)为(1.06±0.36)mmol/L,双下肢血管CDU异常52例(78.8%),分离培养病原菌共62株,G+菌36株(58.1%),G-菌24株(38.7%),真菌2株(3.2%),G+菌对万古霉素、磺胺类、利奈唑烷等敏感,G-菌对亚胺培南、氨基糖苷类等敏感。结论糖尿病足重在预防、早期治疗,以降低截肢率,减少医疗费用,提高糖尿病患者的生活质量。
- 李雪璐杨小红孙娜
- 关键词：糖尿病足截肢率
- PcDNA3.1-rhGM-CSF表达质粒的构建及其对K562细胞生长与分化的影响作用被引量：2
- 2010年
- 目的:观察GM-CSF对髓系白血病细胞(K562)生长、分化的影响作用。方法:采用PCR、T-A克隆及基因定向克隆技术,将rhGM-CSF基因插入PcDNA3.1(+)空载体中,构建了PcDNA3.1-rhGM-CSF真核表达载体。经限制性内切酶消化和DNA测序鉴定确认,转染人K562髓系白血病细胞、72小时后采用细胞形态学检测、MTT试验、免疫组化技术观察和分析PcD-NA3.1-rhGM-CSF在K562细胞中的表达及其影响该细胞生长与分化的作用。结果:①成功构建PcDNA3.1-rhGM-CSF真核细胞表达载体;②重组质粒PcDNA3.1-rhGM-CSF能在K562细胞中表达,并诱导K562细胞向单核细胞系、巨噬细胞系分化;③K562细胞增殖受到明显抑制。结论:成功构建了PcDNA3.1-rhGM-CSF真核细胞表达载体;转染K562细胞能向单核细胞系、巨噬细胞系分化。
- 朱红杨晓红王亚平唐恩洁
- 关键词：粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子K562
