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国家自然科学基金(31000579)

作品数:9 被引量:29H指数:3
相关作者:李灵刘涛兰洋王慧娟阳宇更多>>
相关机构:四川大学海南医学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划海南省自然科学基金更多>>
相关领域:生物学更多>>

文献类型

  • 9篇中文期刊文章

领域

  • 9篇生物学

主题

  • 3篇细胞
  • 2篇蛋白
  • 2篇基因
  • 2篇非编码
  • 2篇癌细胞
  • 2篇GENE_E...
  • 1篇蛋白结合
  • 1篇蛋白质相互作...
  • 1篇凋亡
  • 1篇凋亡作用
  • 1篇药物
  • 1篇药物耐受
  • 1篇原核
  • 1篇原核表达
  • 1篇致瘤性
  • 1篇融合蛋白
  • 1篇生物体
  • 1篇体内致瘤性
  • 1篇体外组装
  • 1篇凝血

机构

  • 7篇四川大学
  • 3篇海南医学院

作者

  • 7篇李灵
  • 3篇刘涛
  • 2篇王慧娟
  • 2篇阳宇
  • 2篇兰洋
  • 1篇赵梓亦
  • 1篇谭光宏
  • 1篇宋旭
  • 1篇廖东升
  • 1篇陈金武
  • 1篇吴兰

传媒

  • 5篇四川大学学报...
  • 1篇遗传
  • 1篇中国生物工程...
  • 1篇Genomi...
  • 1篇Scienc...

年份

  • 1篇2017
  • 1篇2016
  • 1篇2015
  • 3篇2014
  • 1篇2013
  • 2篇2011
9 条 记 录,以下是 1-9
排序方式:
长链非编码RNA在生物体中的调控作用被引量:16
2014年
长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)的发现是基因组学和分子生物学研究领域的重要进展。lncRNA在生命活动中具有重要的调节功能,其表达紊乱与多种人类疾病的发生发展密切相关。研究表明,几乎所有的调控性lncRNA通过与不同种类的生物大分子,如DNA、RNA和蛋白质发生相互作用而行使其功能。文章概述了lncRNA在表观遗传学水平、转录水平及转录后水平调控基因表达的效应机制,并探讨了lncRNA如何在肿瘤发生和宿主防御过程中行使功能。不同于小分子ncRNA通过碱基互补配对调控靶基因的表达,大多数已鉴定的lncRNA通过调节蛋白质活性或维持蛋白质复合物的完整性发挥其生物学功能。因此,鉴定lncRNA-蛋白质相互作用可能是理解lncRNA功能的首要任务。
李灵宋旭
关键词:长链非编码RNA基因表达RNA蛋白质相互作用
人PSF蛋白的原核表达及分析鉴定
2011年
PSF(polypyrimidine tract binding protein-associated splicing factor)蛋白是一种多功能的DNA/RNA结合蛋白,能够抑制原癌基因的表达,在人和小鼠中具有肿瘤抑制的作用。以人成纤维细胞总RNA为材料,利用PSF特异性引物通过RT-PCR的方法扩增得到PSF蛋白的编码序列,将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中构建重组表达质粒pET-28-PSF,转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达。SDS-PAGE及免疫印记分析表明PSF能够在大肠杆菌中以可溶性形式表达。凝胶阻滞分析显示,原核表达的PSF融合蛋白在体外条件下能够与mVL30-1 RNA结合,表明PSF的原核表达产物很可能具有完整的生物学活性。为进一步研究PSF蛋白的生物学功能奠定了基础。
王慧娟兰洋刘涛李灵
关键词:肿瘤原核表达
人翻译延伸因子eEF1A1促进肺癌细胞H1299对紫杉醇和阿霉素药物耐受的研究被引量:1
2016年
在已知人翻译延伸因子eEF1A的多功能性和与细胞存活相关的基础上,本文进一步研究eEF1A的变体蛋白eEF1A1对癌细胞耐药性的影响.eEF1A1基因的蛋白质编码区经过克隆,并瞬时转染了人肺癌细胞H1299,在确定eEF1A1蛋白的胞内表达后,采用MTT法测定高表达eEF1A1的H1299细胞对抗癌药物紫杉醇和阿霉素的耐受.相对于对照细胞,eEF1A1的高表达可显著提高H1299细胞对阿霉素和紫杉醇的耐受性.通过耐药性测试揭示出eEF1A可能参与肿瘤发生的潜在功能.
丁沐然刘涛李灵
关键词:阿霉素紫杉醇耐药性
融合蛋白TAT-p53-MTS的促细胞凋亡作用被引量:2
2015年
本研究首先构建了融合蛋白TAT-p53-MTS的原核表达质粒pET-22b(+)-TATp53-MTS,将表达纯化的融合蛋白与p53缺陷型人肺癌细胞NCI-H1299孵育,通过Western blot和免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,co-IP)检测融合蛋白的细胞穿膜以及与Bcl-2蛋白的相互作用,并通过流式细胞术检测融合蛋白对NCI-H1299细胞的促凋亡作用.结果显示,融合TAT和MTS的p53重组蛋白具有更强的细胞穿膜及线粒体定位能力;并且,融合蛋白能够通过与Bcl-2蛋白的结合显著诱导NCI-H1299细胞的凋亡.
吴兰赵梓亦李灵
关键词:P53细胞凋亡MTSTAT
强化融合蛋白lhFⅦ-LDM对人肺腺癌细胞A549体内致瘤性的抑制
2014年
以人凝血因子Ⅶ(FⅦ)cDNA和编码力达霉素(LDM)辅基蛋白LDP的质粒(pETVH-LDP)为模板,通过PCR及搭桥PCR构建原核表达人凝血因子Ⅶ轻链(the light chain of FⅦ,lhFⅦ)和LDP融合蛋白lhFⅦ-LDP的重组质粒pET19b-lhFⅦ-LDP.重组质粒转化感受态表达菌株E.coli Rosetta-gami B(DE3)pLysS,诱导表达后亲和纯化,并以Western blot鉴定得到的融合蛋白lhFⅦ-LDP.将lhFⅦ-LDP与LDM的烯二炔发色团(AE)进行分子组装制备强化融合蛋白药物lhFⅦ-LDM.用免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,co-IP)检测lhFⅦ-LDP与人肺腺癌细胞A549组织因子(TF)的结合特异性,并通过裸鼠移植瘤实验研究lhFVⅡ-LDM对A549细胞体内致瘤性的影响.结果显示,lhFⅦ-LDP能够与TF特异性结合,并且,强化融合蛋白lhFⅦ-LDM能够显著抑制A549细胞的体内致瘤性.
廖东升阳宇陈金武马登佼李灵
关键词:A549细胞体内致瘤性
Long non-coding RNA-guided regulation in organisms被引量:3
2013年
It is clear that RNA is more than just a messenger between gene and protein.The mammalian genome is pervasively transcribed,giving rise to tens of thousands of non-coding transcripts.Whether all of these transcripts are functional remains to be elucidated,but it is evident that there are many functional long non-coding RNAs(lncRNAs).Recent studies have set out to decode the regulatory role and functional diversity of lncRNAs.Here we organize these studies to highlight the significant involvements of lncRNAs in regulation of gene expression and human physiological and pathological processes,which are achieved by their interaction with DNA,RNA or protein.
QI WenChuanSONG XuLI Ling
人PSF蛋白结合长非编码RNA的筛选及鉴定被引量:2
2011年
通过RNA亲和层析(RNA affinity chromatograph),4种可能与人PSF(human polypyrimidinetract-binding protein-associated splicing factor,hPSF)蛋白结合的长非编码RNA(1ong non-coding RNA,lncRNA)片段在人黑色素瘤细胞yusac细胞核RNA文库中被筛选得到.它们分别定位于人内源性逆转座子L1PA16、MER11C、非编码基因MALAT-1以及一个未知基因(unknown gene).紫外交联分析(UV cross-linking assay)证明在体外条件下这4种lncRNA片段均能与PSF蛋白结合;RNA免疫沉淀(RNA immunoprecipitation,RNA-IP)进一步证实在体内条件下这4种lncRNA均能与hPSF发生相互作用.最后,半定量RT-PCR表明,未知lncRNA特异高表达于人黑色素瘤细胞,其余3种lncRNA在多种人类肿瘤细胞中的丰度均较正常细胞明显升高.
兰洋王慧娟刘涛李灵
SARS冠状病毒RNA聚合酶基因片段体外组装和siRNA干扰研究
2014年
为了安全便捷地获取严重急性呼吸系统综合征冠状病毒(Severe Acute Respiratory Syndrome coronavirus,SARS coronavirus)的RdRp基因,作者合成了26条寡聚核苷酸片段,利用组装PCR(assembly PCR)在体外构建了SARS病毒的RdRp基因片段,并建立了基于Vero E6细胞的SARS RdRp基因的稳定表达株.之后设计了4对针对SARS RdRp基因的siRNA,基因干扰表明这4对siRNA均能高效干扰SARS RdRp基因在Vero E6细胞中的表达.至此,本文提供了一种安全便捷地获取病毒基因的方法.
马成川谭光宏阳宇李灵
关键词:SARS冠状病毒RDRPDNA改组
Non-coding Transcripts from Enhancers:New Insights into Enhancer Activity and Gene Expression Regulation被引量:5
2017年
Long non-coding RNAs (lncRNAs) have gained widespread interest in the past decade owing to their enormous amount and surprising functions implicated in a variety of biological pro- cesses. Some lncRNAs exert function as enhancers, i.e., activating gene transcription by serving as the cis-regulatory molecules. Furthermore, recent studies have demonstrated that many enhancer elements can be transcribed and produce RNA molecules, which are termed as enhancer RNAs (eRNAs). The eRNAs are not merely the by-product of the enhancer transcription. In fact, many of them directly exert or regulate enhancer activity in gene activation through diverse mechanisms. Here, we provide an overview of enhancer activity, transcription of enhancer itself, characteristics of eRNAs, as well as their roles in regulating enhancer activity and gene expression.
Hongjun ChenGuangshi DuXu SongLing Li
共1页<1>
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