江苏省自然科学基金(2005033)
- 作品数：5 被引量：13H指数：3
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- 骨癌痛大鼠脊髓CX3CR1表达的变化被引量：2
- 2009年
- 目的评价骨癌痛大鼠脊髓趋化因子Fraetalkine受体1（CX3CR1）表达的变化。方法雌性未交配SD大鼠650只，体重150～180g，随机分为3组：对照组（n=10）、假手术组（n=10）和骨癌痛组（n=40）。对照组不给予任何处理，假手术组、骨癌痛组分别在左胫骨上端注射Hank液和Walker256乳腺癌细胞5μl。对照组和假手术组于术前1d、术后6、12、18d时测定机械痛阈和双后肢负重；骨癌痛组于术前1d、术后6、12、18d时各取10只大鼠测定机械痛阚和双后肢负重。对照组和假手术组于术后18d时，骨癌痛组于术后6、12、18d时各处死10只大鼠，取L4-6。脊髓组织，采用免疫组化法测定CX3CR1阳性细胞计数，采用Westernblot法测定CX3CR1表达。结果与对照组和假手术组比较，骨癌痛组术后各时点机械痛阈降低，双后肢负重差，CX3CR1阳性细胞计数升高，CX3CR1表达上调（P〈0．01）。结论脊髓CX3CR1可能参与了大鼠骨癌痛的发生和维持。
- 胡计嬅杨建平王丽娜姚明成浩刘磊李彩芳
- 关键词：骨肿瘤疼痛脊髓
- 缝隙连接蛋白Cx43在炎性镜像痛大鼠脊髓背角的表达被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨缝隙连接蛋白Cx43在炎性镜像痛大鼠脊髓背角的表达。方法:(1)行为学研究:鞘内置管成功的雄性SD大鼠24只,随机分为3组(n=8)。CFA模型组:于大鼠左后肢踝关节外侧皮下注射完全弗氏佐剂(CFA)50μl建立关节炎性痛模型,鞘内注射NS10μl;CBX处理组:皮下注射CFA50μl,鞘内注射缝隙连接阻滞剂甘珀酸(CBX)100μg(10μl);NS对照组:皮下注射NS50μl,鞘内注射NS10μl。分别于CFA致炎前1d(基础值)和致炎后0.5h、1d、3d、5d、7d、10d、14d每次鞘内注射后2h测定双侧的热缩足反射潜伏期(PWTL)。(2)形态学研究:雄性SD大鼠20只,随机分为4组(n=5):NS生理盐水组、C1d组、C3d组和C7d组。分别在CFA致炎后相应时间点取腰段脊髓行Cx43免疫组织化学染色分析,测定双侧脊髓背角积分光密度值。结果:(1)单侧踝关节外侧皮下注射CFA可以在致炎后2h～7d诱导出双侧的热痛觉过敏,呈现明显的镜像痛和域外痛现象(P<0.01或0.05),鞘内注射CBX可以在炎性痛的不同阶段逆转上述改变。(2)单侧CFA致炎后,大鼠脊髓双侧Cx43的表达与对照组相比均显著增加(P<0.01或0.05),主要集中于Ⅰ～Ⅱ层和Ⅹ层,其时程变化与行为学变化基本一致。结论:大鼠单侧CFA致炎诱导的关节炎性痛模型,具有显著的镜像痛特征。脊髓双侧背角Cx43表达增加,鞘内应用缝隙连接阻滞剂可以逆转镜像痛现象,提示脊髓缝隙连接可能在疼痛中枢敏感化中起重要作用。
- 侯永恒杨建平张慧娟成浩王丽娜姚明
- 关键词：佐剂性关节炎连接蛋白43脊髓背角甘珀酸
- 新生SD大鼠脊髓星形胶质细胞培养
- 2009年
- 目的学习星形胶质细胞的培养方法，获得较纯的星形胶质细胞，为进一步研究打下基础。方法取出生3d内的新生SD大鼠，无菌取脊髓，剥除脑脊髓膜，剪成乳糜状后胰酶消化结合机械吹打使组织分散，筛网过滤制成单细胞悬液，差速粘附处理去除成纤维细胞得到次细胞悬液，接种用含20％FBS的高糖DMEM培养基培养，每3d换液一次。培养9～12d，待细胞汇合度达到80％时传代。取第四代细胞行GFAP免疫组化鉴定。结果成功分离培养并纯化了脊髓星形胶质细胞，经GFAP免疫组化鉴定，星型胶质细胞纯度达98．5％以上。结论细胞分离培养结合差速粘附可获得较纯的星形胶质细胞。
- 陈庆才王丽娜成浩杨建平
- 关键词：星形胶质细胞胶质原纤维酸性蛋白原代培养
- 骨癌痛大鼠脊髓背角pCREB表达的变化被引量：5
- 2010年
- 目的：观察脊髓背角磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（pCREB,phosphorylated cAMP re-sponse element binding protein）在骨癌痛大鼠中的表达变化,探讨其在骨癌痛中枢敏化中的作用。方法：雌性SD大鼠32只,随机分为4组（n=8）,分别为对照组,骨癌痛6d、12d、18d组。对照组和骨癌痛各组分别于左胫骨上端注射Hank＇s液和Walker256肿瘤细胞5μl。分别于术前（基础值）、术后6d、12d、18d测定机械性痛阈值。对照组于术后18d,其余三组在各时点测定机械性痛阈值后立即处死大鼠,取L4~L6脊髓组织,采用免疫组化法计数pCREB免疫反应阳性细胞数量。结果：骨癌痛术后6d、12d、18d组机械性痛阈值进行性下降（P〈0.01）,对照组差异无统计学意义（P〉0.05）;与对照组比较,骨癌痛术后6d、12d、18d组脊髓pCREB免疫反应阳性细胞数逐渐增多（P〈0.01）。结论：骨癌痛大鼠脊髓背角pCREB表达的增加,可能是产生中枢敏化的机制之一。
- 胡计嬅杨建平刘磊李彩芳姚明
- 关键词：骨癌痛脊髓中枢敏化
- 趋化因子Fractalkine在骨癌痛大鼠中的作用及其脊髓机制被引量：3
- 2008年
- 目的探讨趋化因子Fractalkine在骨癌痛中的作用及其脊髓部位的作用机制。方法采用Walker 256肿瘤细胞,注射在胫骨内建立骨癌痛模型。雌性SD大鼠40只,随机分为5组(n=8),Ⅰ组为Hank’s液对照组,Ⅱ组为骨癌痛组,Ⅲ组为对照组+CX3CR1中和抗体,Ⅳ组为骨癌痛组+IgG;Ⅴ组为骨癌痛组+CX3CR1中和抗体。术后第10～12天,鞘内分别注射CX3CR1中和抗体或IgG,每天1次,剂量10μg/10μl。分别于术前及术后隔日开始测定大鼠机械性痛阈值。术后第12天鞘内注射抗体后6 h处死大鼠,测定脊髓小胶质细胞标志物(OX-42)的表达水平。结果术后第10～12天,与Ⅰ组比较,Ⅱ组、Ⅳ组机械性痛阈值显著下降,脊髓OX-42染色阳性细胞数(Num)及积分吸光度(IA)显著增加,差异均有高度统计学意义(均P<0.01),Ⅲ组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05);与Ⅱ组、Ⅳ组比较,Ⅴ组机械性痛阈值显著增高,脊髓OX-42染色Num及IA显著减少,差异均有高度统计学意义(均P<0.01)。结论Fractalkine通过激活脊髓小胶质细胞参与了骨癌痛的形成。
- 胡计嬅杨建平刘磊李彩芳王丽娜
- 关键词：骨癌痛痛觉过敏胶质细胞FRACTALKINE
