浙江省自然科学基金(Y2100961)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
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- 细胞外热休克蛋白72作为Toll样受体内源性配体在大鼠缺血再灌注肝损伤中的表达及作用被引量：5
- 2012年
- 目的探讨在大鼠缺血再灌注(I/R)肝损伤中,细胞外热休克蛋白72(HSP72)作为Toll样受体(TLR)内源性配体的表达及作用。方法将120只I/R组SD大鼠分为4组,每组30只,均予以I/R处理,其中A组于I/R处理前给予抗HSP72,B组给予重组HSP72,D组给予缺血预处理。同时以假手术组(P组,30只)及非手术组(N组,10只)为对照。之后于不同时间点采集标本,检测血浆丙氨酸转氨酶(ALT)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、HSP72及肝组织HSP72mRNA及其蛋白。结果 P组术后血浆TNF-α、HSP72水平较术前均显著升高(P均<0.01)。B组处理后相较I/R组其他分组,血浆ALT、TNF-α、HSP72均显著升高(P均<0.01)。P组及I/R各组的肝组织HSP72mRNA较术前均显著升高,且I/R各组升高较P组更为明显(P<0.01)。结论大鼠肝组织I/R后释放的HSP72可能启动了TLR信号通路,从而导致肝细胞的炎性损伤。
- 朱冬芳晏春根黄丹文
- 关键词：TOLL样受体再灌注损伤
- 重组热休克蛋白72对体外培养大鼠肝细胞脂肪变性的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨重组热休克蛋白72(HSP72)对体外50%胎牛血清培养的大鼠肝细胞脂肪变性及肝细胞损伤的影响。方法 SD大鼠肝细胞分4组培养。①对照组:DMEM培养液(不含血清)与多粘菌素B;②实验组1:对照组培养液中加50%胎牛血清;③实验组2:对照组培养液中加50%胎牛血清与重组HSP72;④实验组3:对照组培养液中加重组HSP72。动态检测各组肝细胞内甘油三酯(TG)含量、脂肪变性率及悬液中ALT、AST含量。SPSS11.5软件统计分析实验结果。结果对照组肝细胞内TG含量及悬液中ALT、AST含量无显著变化(均P>0.05),肝细胞脂肪变性率为0。实验组1、2肝细胞脂肪变性明显,肝细胞内TG及悬液中ALT、AST含量较对照组均显著升高(均P<0.01),且与其它组比较实验组2变化更为显著(P<0.01);实验组3肝细胞内TG无明显变化(P>0.05),肝细胞脂肪变性率为0,但悬液中ALT、AST含量却较对照组有显著升高(均P<0.01)。结论重组HSP72能导致肝细胞损伤,但不能诱导肝细胞脂肪变性;重组HSP72能加重50%胎牛血清所诱导的肝细胞脂肪变性及肝细胞损伤。
- 朱冬芳晏春根黄丹文
- 关键词：肝细胞脂肪变性
- 大鼠热休克蛋白72基因真核表达载体构建及在COS7细胞中的表达被引量：3
- 2011年
- 背景:体外克隆、表达热休克蛋白,尤其正常时少量或不表达,而应激时大量表达的热休克蛋白72对研究其缺血再灌注损伤中的作用尤为重要。目的:构建热休克蛋白72基因真核表达载体并于COS7细胞内表达,为HSP72蛋白免疫调节功能的研究奠定基础。方法:采用RT-PCR技术从BABL/C大鼠肝细胞中扩增出热休克蛋白72cDNA,经限制性核酸内切酶消化后,插入真核表达载体pcDNA3.1(+)的相应酶切位点,并将重组质粒转染COS7细胞,进行基因表达鉴定。结果与结论:重组质粒插入基因序列检测证实为热休克蛋白72cDNA,并能在COS7细胞稳定表达。成功构建热休克蛋白72真核表达载体,并于COS7细胞中成功转录与表达。
- 晏春根黄丹文任光圆朱冬芳
- 关键词：热休克蛋白72基因表达COS7细胞转录
