中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(ITBBZD0732)
- 作品数：3 被引量：11H指数：3
- 相关作者：沈文涛周鹏言普吴金燕肖旭倩更多>>
- 相关机构：中国热带农业科学院海南大学更多>>
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- 番木瓜eIF4E和eIFiso4E酵母双杂交诱饵表达载体的构建及自激活检测被引量：5
- 2010年
- 通过RT-PCR获得番木瓜eIF4E和eIFiso4E基因的编码区,将其分别克隆到pBD-GAL4载体中,构建酵母双杂交系统的诱饵载体pBD-GAL4-eIF4E,pBD-GAL4-eIFiso4E。测序正确后,将重组质粒导入YRG-2酵母菌株,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性及对报告基因有无激活作用。结果表明,获得了正确的番木瓜eIF4E,eIFiso4E基因编码区,并成功克隆到pBD-GAL4诱饵载体中,且转化有诱饵载体的YRG-2在SD/-Trp营养缺陷平板上生长良好,在SD/-His-Trp营养缺陷平板上不能生长,说明表达产物对酵母细胞无毒性,对报告基因也无自激活作用,这为下一步利用酵母双杂交系统检测番木瓜eIF4E,eIFiso4E蛋白与病毒的相互作用奠定了基础。
- 吴金燕言普沈文涛周鹏
- 关键词：番木瓜EIF4E酵母双杂交
- P型PRSV-VPg蛋白与寄主eIF4E蛋白的互作被引量：3
- 2009年
- 为研究番木瓜环斑病毒P型株系(PRSV-P)的病毒基因组连接蛋白(VPg)与寄主eIF4E蛋白的互作,采用双分子荧光互补技术(BiFc),通过基因枪转化法轰击洋葱表皮,在荧光显微镜下观察两者间的互作结果。结果表明:番木瓜eIF4E与P型PRSV-VPg,西瓜eIF4E与P型PRSV-VPg蛋白均发生互作。eIF4E与VPg的互作为研究通过转基因方法抑制或过量表达突变关键位点的寄主因子,阻断关键因子互作获得抗病植株提供了可行性依据。
- 胡正龙肖旭倩沈文涛言普黎小瑛周鹏
- 关键词：番木瓜环斑病毒
- 番木瓜eIF(iso)4E基因克隆及其结构和表达分析被引量：3
- 2009年
- eIF4E(eukaryotic translation initiation factor4E)家族基因在多种病毒侵染植物过程中起重要作用。应用RT-PCR和RACE方法在番木瓜中克隆了cDNA全长为995bp的eIF4E异构体基因,命名为CP-eIF(iso)4E(GenBank登录号为FJ595992)。其编码的蛋白含有206个氨基酸,蛋白一级结构中的活性部位位点高度保守,三维结构中可能的抗性位点位于帽结合区域(cap-binding pocket)表面。半定量RT-PCR结果表明,CP-eIF(iso)4E在番木瓜叶片中表达较弱,在花瓣中表达最强。
- 言普沈文涛高新征李亚丽周鹏
- 关键词：番木瓜基因表达
