中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(ITBBZD0733) 作品数:9 被引量:90 H指数:6 相关作者: 金志强 徐碧玉 刘菊华 王卓 贾彩红 更多>> 相关机构: 中国热带农业科学院 海南大学 中华人民共和国农业部 更多>> 发文基金: 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 国家自然科学基金 公益性行业(农业)科研专项 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
MADS-box转录因子的相互作用及对果实发育和成熟的调控 被引量:37 2010年 MADS-box基因编码的蛋白是一类数目庞大的转录因子家族,通过与其他转录因子相互作用形成同源或异源二聚体,调控着整个植株的生长发育。文章对近年来MADS-box转录因子的相互作用及对果实发育和成熟的调控作用的研究进展进行了综述,为了解MADS-box转录因子的作用方式和作用机理及深入研究MADS-box基因对调控果实发育和成熟的作用提供参考。 刘菊华 徐碧玉 张静 金志强关键词:果实发育 香蕉谷氨酸脱羧酶基因克隆与表达 被引量:14 2009年 根据抑制缩减杂交文库获得的香蕉谷氨酸脱羧酶基因片段,利用RACE技术,首次从香蕉果实中克隆了谷氨酸脱羧酶基因的cDNA全长.结果表明,该cDNA的ORF全长1 500 bp,编码499个氨基酸.Blast分析表明,该基因所推导的氨基酸序列与水稻、柑橘、白杨、番茄等具有较高的一致性,分别为82%、81%、79%、78%,推测其编码的蛋白质分子量为56.25 kD,等电点5.21,具有与钙调蛋白结合的C端延伸区域和磷酸吡哆醛结合位点.组织特异性和果实采后正常成熟不同阶段表达结果显示,该基因在香蕉根、茎、叶、花、果实中均有表达,果实中的表达量较高,正常成熟表达量的增加可能受内源乙烯诱导并促进乙烯生物合成,推测其可能在不同的生理过程中起作用,并且与果实成熟及乙烯生物合成密切相关. 胡伟 杨晓颖 李美英 王卓 徐碧玉 金志强关键词:香蕉 谷氨酸脱羧酶 克隆 实时定量PCR 香蕉MuMADS2基因表达产物的亚细胞定位 2010年 对已获得的香蕉MuMADS2基因进行生物信息学和芯片分析表明,该基因编码的蛋白可能作为转录因子定位于细胞核中,是乙烯上游的调控因子,参与调控香蕉果实的成熟过程。为进一步研究该基因功能,构建香蕉MuMADS2基因与绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein,GFP)基因融合的植物表达载体pCAMBIA1302-MuMADS2,再利用基因枪转化法将其转入洋葱表皮细胞进行亚细胞定位观察。结果表明:该基因表达产物定位于细胞核中,符合转录因子特性。 刘琳 杨晓颖 金志强 刘菊华 张浩 徐碧玉关键词:香蕉 亚细胞定位 香蕉内切几丁质酶基因的表达及其与果实成熟的关系 为了研究内切几丁质酶基因在香蕉果实采后成熟过程中的重要作用,从香蕉果实SSH(suppression subtractive hybridization)文库中分离到了该基因,研究其表达及其与采后成熟的关系。花后1 10... 刘菊华 徐碧玉 张静 张建斌 贾彩红 金志强关键词:香蕉 果实 文献传递 香蕉ROP1基因酵母双杂交体系的诱饵载体构建及毒性与自激活效应检测 被引量:2 2009年 用PCR技术获得香蕉ROP1基因片段,构建酵母双杂交系统表达载体pGBKT7-ROP1,测序正确后将重组质粒导入AH109酵母菌株,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性作用及对报告基因有无激活作用。结果表明,用PCR技术获得了正确的ROP1基因片段,并正确构建了ROP1基因的酵母双杂交表达载体,并转化到AH109酵母菌株中,含诱饵载体的AH109在SD/-Trp营养缺陷平板上生长良好,说明表达产物对酵母细胞无毒性,含诱饵载体的AH109在His、Trp二重营养缺陷平板上不能生长,说明对报告基因无自激活作用,为下一步利用酵母双杂交系统筛选与ROP1蛋白相互作用的蛋白奠定基础。 王卓 杨景豪 张建彬 刘菊华 金志强 徐碧玉关键词:酵母双杂交 诱饵载体 香蕉乙二醛酶基因增强酿酒酵母对非生物胁迫抵抗能力的研究 被引量:8 2010年 从香蕉cDNA文库中克隆到了一个香蕉(Musa acuminata AAA subgroup)乙二醛酶(glyoxalase,GLO)基因(MaGLO14)。构建了带有MaGLO14的酵母表达载体PYES2-MaGLO14,转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)尿嘧啶营养缺陷型菌株INVSC1,挑取转化子进行PCR和酶切鉴定,证实获得了转基因菌株。通过比较转基因菌株和非转基因菌株在NaCl、高温、低温、干旱、UV胁迫下的生长状况,证明转基因菌株在以上非生物胁迫条件下的存活菌落数均高于非转基因菌株。利用酿酒酵母初步证明MaGLO14具有增强酵母菌对非生物胁迫抵抗力的功能。 邓成菊 张建斌 贾彩红 金志强 徐碧玉关键词:香蕉 非生物胁迫 酿酒酵母 转基因 香蕉中一个新的S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的克隆及采后表达分析 被引量:2 2009年 利用抑制消减文库从香蕉中分离到一个cDNA片断,结合RACE技术获得该基因的全长序列。该全长cDNA共含1 285个碱基,通过Blastx同源性分析结果显示它与香蕉的一个S-adenosyl-L-methionine synthase(SAMS)基因(GenBank序列号为AF004317)具有82%的碱基同源性,编码的氨基酸顺序有93%同源性,但在cDNA的5’和3’非编码区同源性较低。设计特异引物对此基因进行RT-PCR分析表明,正常成熟的香蕉果实,采后当天表达量较高,随后略有降低,至采后12 d又达到一个相对较高值后迅速下降;高锰酸钾处理的果实,整个成熟期该基因均表现一个比较高的表达量;乙烯利处理的果实,采后表达量明显下降且处在一个比较稳定的水平。 贾彩红 林水玉 张建斌 刘菊华 金志强 徐碧玉关键词:香蕉 克隆 香蕉果实高质量总蛋白的提取方法 被引量:12 2009年 比较了三氯乙酸/丙酮沉淀法、酚抽法、丙酮沉淀法3种方法对香蕉(M.AAA Group Cavendish)果实总蛋白的提取效果。结果显示酚抽法所得图谱条带完整清晰;TCA法所得图谱条带间模糊不清,存在拖尾现象;而丙酮沉淀法提取的蛋白得率不高,蛋白带谱不完整。说明酚抽法适合香蕉果实总蛋白提取。同时为满足不同激素处理及采后不同成熟度香蕉果实高质量蛋白质提取的需要,在酚抽法基础上对提取缓冲液进行了改良,获得了良好的效果。为以后研究香蕉果实蛋白质功能奠定了基础。 王卓 贾彩虹 金志强 徐碧玉关键词:香蕉 蛋白质提取 香蕉一个Ⅲ类酸性几丁质酶基因与果实成熟关系的研究(英文) 被引量:8 2010年 为了解Ⅲ类酸性几丁质酶基因(MaCHⅢ)与香蕉果实采后成熟过程的相互关系,对经乙烯和1-甲基环丙烯(1-MCP)处理的巴西香蕉果实采后乙烯释放量、Ⅲ类酸性几丁质酶基因(MaCHⅢ)表达以及几丁质酶活性进行了测定。结果显示:(1)乙烯催熟处理的香蕉果实,乙烯释放量比对照处理的果实提前15 d达到高峰;1-MCP处理的香蕉果实,乙烯生物合成和果实成熟明显受到了抑制。(2)外源乙烯加速了MaCHⅢ基因的下调表达和Ⅲ类酸性几丁质酶活性的下降,MaCHⅢ表达量和Ⅲ类酸性几丁质酶活性分别在采后第3天和第4天下降到最小值。(3)1-MCP处理使MaCHⅢ基因呈现上调表达,Ⅲ类酸性几丁质酶活性上升,MaCHⅢ基因表达量和Ⅲ类酸性几丁质酶活性分别在采后18 d和25 d达到高峰。研究表明,MaCHⅢ基因可能与香蕉果实采后成熟呈负相关。 刘菊华 徐碧玉 张建斌 贾彩红 金志强关键词:香蕉 酶活性 果实成熟 香蕉一个内切几丁质酶基因的表达及其与乙烯和果实成熟的相互关系 从SSH文库中分离到了一个内切儿丁质酶基因,该基因主要在果实和花中大量表达,而在根、茎、叶中不表达或表达量很低。对在乙烯利催熟处理、1-MCP抑制处理以及对照条件下的香蕉果实采后不同时期分别进行了该基因的差异表达分析利儿... 刘菊华 徐碧玉 张建斌 金志强关键词:香蕉 果实成熟 文献传递