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姜黄素抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖及其相关的氧化应激机制被引量：14: 2009年; 目的:探讨姜黄素抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖及其相关的氧化应激机制。方法:用不同浓度(5～40μmol/L)的姜黄素作用于乳腺癌细胞株MCF-7细胞,以MTT法检测在6、12、24、48h的细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率,DCFH-DA染色流式检测细胞内活性氧(reactive oxygen species ROS)生成变化,黄嘌呤氧化酶法检测氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),可见光分光光度计法检测过氧化氢酶(catalase,CAT)活性。结果:低浓度(5、10μmol/L)姜黄素作用后MCF-7细胞增殖受抑制(P<0.01),但无凋亡发生;伴随细胞内ROS短暂升高后随时间逐步下降,SOD、CAT先下降后逐步提高。高浓度(20、40μmol/L)姜黄素作用后细胞增殖抑制率明显增加(P<0.01),细胞出现大量凋亡;伴随细胞内ROS即刻明显升高,随时间延长无明显下降;SOD、CAT明显下降(P<0.01)。结论:姜黄素具有剂量依赖的抗氧化与促氧化双重作用,不同浓度的姜黄素通过对乳腺癌细胞内氧化还原状态的调节参与了其抗肿瘤细胞增殖作用的机制。; 霍红梅张利元江家贵朱旬; 关键词：乳腺癌姜黄素活性氧氧化应激

突变敏感性分子开关技术在检测乳腺癌磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚单位α基因突变中的应用: 2012年; 目的利用突变敏感性分子开关技术检测乳腺癌磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚单位仅（PIK3CA）基因A3140G突变频率，以便建立快速检测基因突变的技术方法。方法用高保真DNA聚合酶介导的突变敏感性分子开关技术对62例乳腺癌组织和10例乳腺纤维腺瘤组织DNA进行检测，并利用凝胶成像系统对结果进行分析。结果在62例乳腺癌患者中检测出10例PIK3CA基因A3140G突变（突变率为16．1％），10例乳腺纤维腺瘤中未发现该突变。PIK3CA基因A3140G突变与年龄、肿瘤大小、淋巴结状态、雌激素受体（ER）／孕激素受体（PR）状态、表皮生长因子受体-2（cerbB-2）和表皮生长因子受体（EGFR）表达等无相关。结论突变敏感性分子开关技术可快速准确地检测乳腺癌PIK3CA基因A3140G突变。; 陈营朱旬肖莉李凯邢春根邹汉青; 关键词：乳腺肿瘤分子开关基因突变

突变敏感性分子开关对乳腺癌DBC2基因7776C〉T突变的快速检测: 2012年; 目的应用硫化磷酸修饰的碱基特异性引物和高保真DNA聚合酶所构成的突变敏感性分子开关技术结合琼脂糖凝胶电泳，快速检测乳腺癌及乳腺纤维腺瘤中DBC2基因7776C〉T突变频率。方法设计2对分别与DBC2基因7776位点突变碱基（C）和野生碱基（T）配对的硫化磷酸修饰的引物，硫化磷酸修饰等位基因位点特异性引物与组织DNA样本完全配对时，能被高保真聚合酶延伸，而硫化磷酸修饰等位基因位点特异性引物与组织DNA样本不完全配对时，不能被高保真聚合酶延伸。用此突变敏感性分子开关技术对85例乳腺癌组织DNA样本及10例乳腺纤维腺瘤组织DNA样本进行PCR检测，并利用凝胶成像系统对PCR产物进行分析。结果利用分子开关技术在85例乳腺癌组织DNA样本中检测出DBC2基因7776C〉T突变率为2．4％（2／85），10例乳腺纤维腺瘤未发现该突变。结论该突变敏感性分子开关技术结合琼脂糖凝胶电泳可快速检测乳腺癌DBC2基因7776C〉T突变。突变敏感性分子开关技术可在单碱基水平对相关基因突变进行特异性检测，提示其在乳腺癌等基因突变检测中具有广阔的应用前景。; 陈营朱旬肖莉李凯邢春根邹汉青金涛; 关键词：乳腺肿瘤分子开关基因突变

乳腺癌PIK3CA基因热点突变的研究被引量：3: 2013年; 目的:采用突变敏感性分子开关技术,检测乳腺癌组织中PIK3CA基因热点突变的突变频率,并分析乳腺癌PIK3CA基因热点突变与乳腺癌临床病理特征之间的关系。方法:用突变敏感性分子开关技术对90例乳腺癌组织和10例乳腺纤维腺瘤组织DNA进行检测,并利用基因测序进一步验证。结果:在90例乳腺癌患者中检测出18例PIK3CA基因热点突变(突变率20%,18/90),包含A3140G突变14例(突变率15.6%,14/90)、G1633A突变3例(突变率3.3%,3/90)、G1624A突变2例(突变率2.2%,2/90),其中1例患者同时发生A3140G和G1624A突变。10例乳腺纤维腺瘤中未发现以上热点突变。PIK3CA基因突变与HER-2表达有关(χ2=4.119,P=0.048),过表达者中PIK3CA基因突变率低,而与年龄分布(χ2=0.238,P=0.602)、肿瘤大小(P=1.000)、淋巴结状态(χ2=3.689,P=0.056)及ER(χ2=0.957,P=0.328)、PR(χ2=0.012,P=0.914)和EGFR(χ2=0.011,P=0.916)是否表达无相关性。结论:PIK3CA基因热点突变与患者的HER-2过表达呈负相关。; 陈营朱旬肖莉李凯邢春根邹汉青; 关键词：乳腺肿瘤 PIK3CA 基因突变分子开关

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江苏省卫生厅科研基金(H200817)