中国博士后科学基金(20070421149)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：王玲杨烈周总光李园于永扬更多>>
- 相关机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- PPARδ基因RNA干扰慢病毒载体的构建及稳定干扰结肠癌细胞株KM12C的建立被引量：2
- 2010年
- 大肠癌是常见的恶性肿瘤,其发病率和病死率正逐年递增。过氧化物酶体增殖因子活化受体δ(peroxisome pro1iferator-activated receptorδ,PPARδ)是结肠腺瘤性息肉基因通路的下游靶标,很可能参与了大肠癌发病机制。然而,目前对该基因在大肠癌中的功能尚未阐明。本实验采用慢病毒三质粒包装系统构建特异靶向人PPARδ基因的RNA干扰(RNAinterference,RNAi)慢病毒载体,用以建立PPARδ基因稳定沉默的结肠癌细胞株。测序证实,成功构建编码表达PPARδ短发夹结构RNA(sh-PPARδ)的慢病毒载体pLVshPPARδ以及对照载体pLVControl。病毒载体转导结肠癌细胞株KM12C后,荧光显微镜及流式细胞术(fluorescence-activated cell sorting,FACS)证实细胞转染效率>90%,RT-PCR测定实验组KM12C细胞PPARδ的mRNA表达比未处理细胞下降70%,对照组与未处理细胞无显著差异。Western blot显示实验组PPARδ蛋白表达量比未处理细胞明显下降,对照组与未处理细胞无显著差异。结果显示成功构建特异靶向人PPARδ基因的RNAi慢病毒载体,并成功建立PPARδ表达稳定干扰的人结肠癌细胞株KM12C,为PPARδ在大肠癌中的功能研究提供了新的细胞模型。
- 蒋小杨烈周总光李园王玲于永扬王存
- 关键词：结直肠癌RNA干扰慢病毒
- 过氧化物酶体增殖因子活化受体δ基因对人大肠癌细胞凋亡的影响
- 2009年
- 过氧化物酶体增殖因子活化受体δ（PPAR5）是APC／β-catenin／Tcf-4信号通路上亟待揭示的下游靶基因之一，其下游靶基因的激活可能导致大肠癌的发生。本实验采用流式细胞术及原位缺口末端标记法（TUNEL）观察PPAR8基因沉默对大肠癌细胞凋亡的影响。
- 郑雪莲杨烈王玲周总光陈珂玲关健婷
- 关键词：过氧化物酶体增殖因子活化受体癌细胞凋亡大肠癌Β-CATENIN原位缺口末端标记法
