国家教育部博士点基金(20100171110060)
- 作品数:4 被引量:10H指数:2
- 相关作者:邓春华孙祥宙高勇张亚东刘贵华更多>>
- 相关机构:中山大学附属第一医院广东省第二人民医院中山大学更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 慢病毒-血管内皮生长因子165载体的构建及其在脂肪组织来源的干细胞中过表达的研究被引量:1
- 2011年
- 目的构建慢病毒-血管内皮生长因子。(VEGF165)载体并转染脂肪组织来源干细胞(ADSCs)以得到用于基因治疗的种子细胞。方法通过聚合酶链反应(PCR)方法将EHSl001—68950485313912克隆突变成VEGF165(NM_001025368)转录本后采用三质粒系统(pGC—FU、pHelpl.0和pHelp2.0)进行包装慢病毒。通过定时定量PCR测定滴度后使用慢病毒-VEGFl65转染ADSCs。免疫荧光、Westernblot鉴定VEGF165在ADSCs中的表达。结果PCR(535bp)、DNA测序、Westernblot(49×10^3)检测证明成功构建的载体为VEGF165与绿色荧光蛋白(GFP)融合表达载体。实时定量PCR确定病毒滴度达到2×10^8TU/ml。慢病毒-VEGF165贷载体转染ADSCs后经免疫荧光验证约95%ADSCs可表达VEGF165,同时Westernblot也证明基因稳定表达。结论通过获得稳定表达VEGF165的ADSCs,为血管性疾病特别是糖尿病性勃起障碍的治疗奠定了基础。
- 孙祥宙刘贵华黄燕平高勇张亚东邓春华
- 关键词:脂肪组织来源干细胞VEGF165慢病毒过表达
- 麒麟丸联合左氧氟沙星治疗伴有附属性腺感染的弱精子症的临床疗效观察被引量:6
- 2013年
- 目的:观察麒麟丸联合左氧氟沙星治疗伴有附属性腺感染的弱精子症的疗效。方法:将伴有附属性腺感染的弱精子症患者80例随机分为两组,每组40例患者。1号组患者口服麒麟丸和左氧氟沙星,2号组患者口服左氧氟沙星。每组治疗1个疗程:麒麟丸用法为每次6 g,3次/d,服用30 d;左氧氟沙星用法为每次0.5 g,1次/d,服用20 d。每组在治疗前和治疗1个疗程后做精液分析,以前向运动精子百分率和精液中过氧化物酶阳性的白细胞数为主要疗效指标,评价治疗效果。结果:入选患者均完成了1个疗程的治疗。两个治疗组在治疗后,组1和组2前向运动精子百分率的治疗有效率分别为60%和17.5%,而且差异有统计学意义(P<0.05);精液中过氧化物酶阳性的白细胞数的治疗有效率分别为87.5%和82.5%,差异没有统计学意义(P>0.05)。结论:治疗伴有附属性腺感染的弱精子症,麒麟丸联合左氧氟沙星可以明显提高精子活动力,而且比单独应用左氧氟沙星具有更好的疗效,未见明显不良反应。
- 高勇万子孙祥宙刘雅峰张亚东欧阳斌陈圣福郑涛陈鑫杨其运韩大愚尧冰邓春华涂响安
- 关键词:弱精子症不育麒麟丸左氧氟沙星
- Nestin-GFP转基因小鼠睾丸中P75NTR表达的研究
- 2013年
- 目的:观察小鼠睾丸中的p75神经营养因子受体(P75NTR)的表达规律,并探讨其与巢蛋白(nestin)之间的关系。方法:通过免疫荧光技术观察出生后第5天Nestin-GFP转基因小鼠睾丸组织中的P75NTR和巢蛋白的表达位置,并采用实时荧光定量PCR和流式细胞分选方法检测P75NTR在不同周龄小鼠睾丸组织中的表达量;对分选得到的P75NTR阳性细胞在神经干细胞的培养液中进行培养,通过定向分化技术观察其神经分化能力。结果:免疫荧光染色结果显示P75NTR和巢蛋白定位表达于睾丸间质细胞。实时荧光定量PCR和流式细胞分选结果显示,P75NTR在出生第14天小鼠睾丸组织中出现表达高峰。出生后第5、14、30天小鼠睾丸中P75NTR阳性百分率分别为(2.88±0.52)%、(9.54±1.81)%、(2.63±0.43)%,分选得到的P75NTR阳性细胞也共定位表达巢蛋白和P75NTR,并且具有神经分化能力。结论:睾丸组织中P75NTR和巢蛋白共定位表达于睾丸间质细胞,该类P75NTR阳性细胞具有神经分化能力,推测其起源于神经脊。
- 脱颖姜美花蔡炳邓春华项鹏
- 关键词:P75神经营养因子受体巢蛋白睾丸间质细胞
- 前列腺癌根治术后勃起功能障碍动物模型的建立被引量:3
- 2011年
- 目的 对大鼠海绵体神经(CN)进行解剖并对其造成钳夹损伤,以建立前列腺癌根治术(RP)后勃起功能障碍(ED)的动物模型.方法 将36只雄性SD大鼠随机分为模型组、假手术组、正常组,术后4周通过阿朴吗啡(APO)实验及海绵体内压(ICP)/平均动脉压(MAP)测定、阴茎神经型一氧化氮合酶(nNOS)免疫组织化学检测以评估建立模型的效果.结果 术后4周3组大鼠的阴茎勃起率和平均勃起次数分别为0%和0次、100%(11/11)和(2.24±0.86)次、100%(12/12)和(2.39±0.92)次.模型组大鼠无明显勃起反应,假手术组、正常组可见明确勃起反应.电刺激盆腔星状神经节(MPG)前3组大鼠ICP/MAP分别为(0.13±0.04)、(0.10±0.03)、(0.12±0.03),电刺激MPG后分别为(0.12±0.05)、(0.57±0.08)、(0.58±0.06),电刺激MPG前3组ICP/MAP差异均无统计学意义(P>0.05),模型组与假手术组、正常组的电刺激MPG后ICP/MAP差异有统计学意义(P<0.05).3组大鼠阴茎nNOS阳性神经纤维数分别为(23.04±2.59)、(73.94±7.51)、(80.26±6.95),模型组大鼠阴茎nNOS阳性神经纤维数明显少于假手术组、正常组(P<0.05).结论 大鼠CN结构与人类非常相似,CN钳夹损伤是建立RP术后ED模型的可靠的方法.
- 卞军孙祥宙戴宇平刘贵华邓春华杨国胜
- 关键词:前列腺癌根治术勃起功能障碍海绵体神经