湖北省教育厅自然科学基金(D200713004)
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 相关作者：杨建林柳长柏李丹莉韩钰周永芹更多>>
- 相关机构：三峡大学湖北民族大学更多>>
- 发文基金：湖北省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 表达CRT-E2融合蛋白肿瘤疫苗诱导特异性抗肿瘤免疫应答被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨表达钙网蛋白(Calreticulin,CRT)和HPVE2融合蛋白的肿瘤疫苗在小鼠体内诱导的抗肿瘤免疫应答。方法:转染重组质粒得到高表达CRT、E2和CRT-E2融合蛋白的肿瘤细胞,作为肿瘤疫苗隔周两次腹腔注射免疫小鼠,17天后观察成瘤率,检测NK细胞杀伤活性、特异性T细胞增殖能力、CTL活性以及脾淋巴细胞分泌IFN-γ水平,并观察荷瘤小鼠生存期。结果:高表达CRT-E2融合蛋白肿瘤疫苗免疫小鼠后,其成瘤率明显低于其他实验组,NK细胞杀伤活性、特异性T细胞增殖能力、CTL活性和脾淋巴细胞分泌IFN-γ水平均显著高于其它实验组(P<0.01),生存期也明显延长(P<0.01)。结论:小鼠体内实验显示,表达CRT-E2融合蛋白肿瘤疫苗能够诱导特异性CD8+T细胞免疫应答和NK细胞活性,显著抑制了肿瘤生长。
- 杨建林李丹莉柳长柏
- 关键词：钙网蛋白E2肿瘤疫苗
- 阿司匹林促进宫颈癌HeLa细胞凋亡被引量：2
- 2010年
- 杨建林韩钰周永芹
- 关键词：阿司匹林HELA细胞凋亡宫颈癌非类固醇抗炎药DRUGS代表药物
- CRT-E2-EGFP表达、胞内定位及其对B16细胞凋亡的影响
- 2009年
- 目的:观察CRT-E2融合蛋白在小鼠黑色素瘤B16细胞中的表达及其定位,并探讨CRT引起的E2蛋白表达定位改变对B16细胞增殖及调亡的影响。方法:构建荧光真核表达载体pEGFP-CRT、pEGFP-E2、pEGFP-CRT-E2,将上述载体以及空载体pEGFP-C1经脂质体瞬时转染B16细胞,West-ernblot分析确认目的蛋白表达。荧光显微镜下观察CRT-E2融合蛋白在细胞中表达定位;流式细胞术检测不同重组表达载体转染B16细胞24h、48h后,对细胞周期的影响和诱导凋亡的情况。结果:CRT-E2融合蛋白在B16细胞中正确表达,主要分布于细胞质,能将细胞阻滞于G1期,有效诱导肿瘤细胞发生凋亡(P<0.01)。结论:成功构建CRT-E2真核表达载体,外源性CRT能够引起E2蛋白表达定位于细胞质,并明显促进了肿瘤细胞的调亡。
- 杨建林柳长柏李丹莉韩莉
- 关键词：HPVE2钙网蛋白凋亡
- 人乳头瘤病毒18型E2蛋白抗体制备及鉴定
- 2009年
- 目的研究人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)18型E2蛋白的生物学活性,制备人乳头瘤病毒18型E2蛋白特异性抗体。方法使用原核表达载体pET28a(+)中表达、镍螯合亲和层析胶体纯化的全长HPV18E2蛋白免疫日本大耳白兔,制备多克隆抗体。通过酶联免疫吸附实验(ELISA),Western Blot法和免疫组织化学法检测抗体特异性。结果ELISA法检测显示:抗E2抗血清稀释滴度可达1∶10000以上,并能通过Western Blot法和免疫组织化学法检测到真核细胞表达的HPV18E2蛋白,提示具有较高抗体滴度和较强特异性。结论以原核表达系统表达并纯化的全长HPV18E2蛋白免疫日本大耳白兔,制备得到了多克隆抗体能够检测真核细胞表达的E2蛋白,为进一步研究HPV18E2提供了有用的工具。
- 黄发军曾凡慧柳长柏
- 关键词：人乳头瘤病毒E2蛋白多克隆抗体
