国家科技重大专项(2011ZX08004-004) 作品数:26 被引量:114 H指数:7 相关作者: 王丕武 付永平 伍辉军 高学文 曲静 更多>> 相关机构: 吉林农业大学 吉林省农业科学院 南京农业大学 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 国家高技术研究发展计划 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
低聚木糖对大豆生长和花叶病毒病抗性的影响 被引量:1 2012年 用不同浓度的低聚木糖处理大豆,研究低聚木糖对大豆生长和花叶病毒病(SMV)抗性的影响,温室实验结果表明:低聚木糖溶液处理大豆种子18 d后与对照相比,50 mg.L-1低聚木糖对大豆幼苗的株高、鲜重和主根长有明显的促进作用。低聚木糖喷雾处理大豆叶片18 h后接种SMV,与对照相比显著降低了SMV病情指数。利用Quantita-tive RT-PCR检测低聚木糖处理的大豆叶片中的防卫相关基因的表达情况,与对照相比,防卫基因PR2、PR10、PR12和LOX2在低聚木糖处理12 h时有最高的相对表达量;PR3在低聚木糖处理18 h时有最高的相对表达量;PR1、PAL、PPO和CHS在低聚木糖处理24 h时显著上调表达。研究表明,低聚木糖激活了大豆SA信号通路和JA信号通路,从而提高了大豆对SMV的抗性。 张秀秀 伍辉军 周宇骋 高学文关键词:低聚木糖 大豆 促生 hrpZ_(Psta)在转基因大豆中定量表达与疫霉根腐病和灰斑病抗性相关研究 被引量:12 2015年 以T5转hrpZPsta基因大豆JN29-705-15和JL30-187为材料,利用实时荧光定量PCR技术(Quantitative Real Time PCR,qRT-PCR)检测了目标基因在转基因大豆不同组织中的表达量,分别利用下胚轴侵染法和叶面喷施法鉴定疫霉根腐病抗性和灰斑病抗性,并分析目的基因表达量与疫霉根腐病和灰斑病抗性的相关性。结果表明:hrpZPsta基因在大豆的叶、茎、根、籽粒中均有表达,二个株系平均相对表达量分别为8.2/6.1、0.9/0.7、6.5/4.6和0.8/0.7;T5转hrpZPsta基因大豆抗疫霉根腐病和灰斑病能力与野生型相比均有所提高,JN29-705-15对疫霉根腐病抗性从感病提高到中抗,而JL30-187从中抗提高到抗病;hrpZPsta基因在叶中的表达量也与抗灰斑病能力呈正相关,与病情级别呈极显著负相关。试验结果初步证明了外源基因hrp ZPsta在大豆植株中的表达量与受体植株对疫霉根腐病和灰斑病抗性存在一定的相关性。 谷晓娜 刘振库 王丕武 张卓 马建 曲静 张君 付永平 卢实 郑成忠 刘婷婷关键词:大豆 疫霉根腐病 灰斑病 抗性 植物固醇合成途径关键基因CPI1的功能进化 被引量:4 2013年 固醇是真核生物膜的重要组分,在生长发育中具有重要作用。CPI1(CYCLOPROPYL STEROL ISOMERASE1)基因是植物特有的固醇合成途径基因,其编码产物为环丙基固醇异构酶。目前只有拟南芥(Arabidopsis thaliana)的CPI1基因被克隆并解析。研究发现,从藻类到高等开花植物中均存在单一拷贝的CPI1基因。陆生植物CPI1的基因结构及其所编码的氨基酸序列均高度保守,蛋白质序列相似性范围为48%-90%,但陆生植物CPI1与绿藻CPI1的蛋白序列之间存在显著差异。蛋白质结构预测发现CPI1具有非常相似的拓扑结构,均具有7个跨膜结构域和6个亲水环。组织表达模式分析显示,陆生植物CPI1在不同组织中均表达,是组成型表达基因。为了验证CPI1基因的功能,克隆了二穗短柄草(Brachypodiumdistachyon)BdCPI1基因,并转化拟南芥cpi1-1突变体。结果表明,BdCPI1能完全回补cpi1-1突变体的表型。基于单拷贝基因数目、保守的基因结构和蛋白质拓扑结构及基因表达模式,推测CPI1基因的功能可能在陆生植物中高度保守。 马学敏 孙爽莉 杨海灵 门淑珍关键词:基因表达 突变体 植物固醇 大豆凝集素基因lec-s转化烟草增强对烟草花叶病毒的抗性 被引量:1 2013年 将编码大豆凝集素的lec-s基因插入植物表达载体pBI121中,构建植物重组表达质粒pBI121::lec-s。由根癌土壤杆菌EHA105介导的叶盘法转化烟草,获得了转基因烟草株系。PCR和RT-PCR检测证明lec-s基因已转入烟草植株中。接种烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)进行抗病性试验结果表明,转基因烟草叶片上的病斑数显著减少,说明转基因烟草表现出对TMV的抗性。定量RT-PCR检测发现,接种TMV后,抗病防卫基因(PR-1a、GST1、Pal和hsr515)在转基因烟草叶片中显著上调表达。这些结果表明,大豆凝集素基因lec-s转化烟草可对TMV产生抗性,其作用机制可能在于lec-s基因参与了植物的防卫信号通路,诱导了抗病防卫基因在转基因植株体内的表达,增强了植株对TMV的系统抗性。 郭佩佩 伍辉军 高学文关键词:防卫基因 春播菜用大豆品种苏奎1号选育及其高产栽培技术 被引量:6 2012年 菜用大豆是中国南方的主要豆类蔬菜之一,春播菜用大豆是其主要栽培类型。苏奎1号是通过自主创新等项目最新选育的春播菜用大豆新品种,该品种具有高产、优质、早熟、多抗等优点,适合我省作春播菜用大豆(早毛豆)栽培。介绍了品种的选育过程、主要特征特性、高产栽培技术。 顾和平 袁星星 崔晓艳 陈华涛 张红梅 陈新关键词:菜用大豆 栽培技术 转hrpZ_(psta)和chi双价广谱抗病基因大豆对疫霉根腐病的抗性分析 被引量:3 2019年 疫霉根腐病能使大豆感病品种减产5%~10%,并造成品质降低。利用转基因技术培育抗病品种是解决该问题的有效途径之一。对转hrpZ_(psta)和chi双价广谱抗病基因株系T2003-23-11、T2004-28-321和T2004-30-384进行分子检测并鉴定其抗疫霉根腐病能力。Southern Blot结果表明,hrpZ_(psta)和chi双价基因已整合在株系的核基因组中而且稳定遗传到T_4代;qRT-PCR结果表明,hrpZ_(psta)和chi双价基因在株系的不同组织中的相对表达量均高于非转基因对照。利用下胚轴侵染法对3个株系进行抗疫霉根腐病鉴定结果表明,3个株系抗病级别均为高抗,非转基因对照的抗病级别为中抗,表明转基因株系的抗病能力得到提高。 李琦 宋阳 于淼 张学明 曲静 张卓 王丕武关键词:大豆 疫霉根腐病 抗病性 利用转座子TnYLB-1构建枯草芽孢杆菌的突变体文库 被引量:16 2011年 为了鉴定枯草芽孢杆菌定殖和促进植物生长相关基因,用携带转座子TnYLB-1的穿梭载体pMarA转化枯草芽孢杆菌OKB105菌株。高温诱变条件下,筛选了2 000个转座子插入突变的单克隆,构建了OKB105菌株的突变体文库。对随机挑选的15个突变体采用PCR及Southern杂交验证,结果表明:转座子TnYLB-1以单拷贝、随机方式插入到OKB105菌株的染色体上。 马欣 刘俊 乔俊卿 伍辉军 高学文二次消毒法在大豆无菌苗制备中的应用 被引量:1 2013年 无菌苗的获得是大豆遗传转化中的第一个环节。不同产地的大豆种子可能因其生长环境不同而具有不同程度的带菌率。通过比较不同消毒条件下大豆种子的污染率、发芽率,从而确定一种有效的种子消毒方法。结果表明:不同品种间种子污染率存在显著差异,次氯酸钠液体消毒法对带菌率低的种子消毒有效,经氯气消毒法和二次消毒法处理后的种子污染率明显低于次氯酸钠液体消毒,以二次消毒法对大豆种子的消毒最为彻底;次氯酸钠液体消毒对种子活力影响较大,经氯气消毒和二次消毒的种子活力显著高于次氯酸钠液体消毒。二次消毒法特别适用于带菌率高的种子消毒。 单志慧 韩粉霞 张孝龙 沙爱华 陈海峰 陈李淼 张婵娟 陈水莲 周新安关键词:种子消毒 二次消毒 大豆花叶病毒衣壳蛋白单克隆抗体的制备及其中和活性分析 本研究克隆了东北大豆花叶病毒3号株系衣壳(cp)蛋白基因,在大肠杆菌中表达了cp蛋白,通过亲和层析获得了纯化的cp蛋白;制备了9株cp蛋白单克隆抗体,中和试验表明,6E7、2D3、1C2这3株单克隆抗体具有中和作用,能够... 王永志 苏颖 米丽娟 张伟 宋淑云 刘颖 张正坤 董英山 李启云关键词:大豆花叶病毒 衣壳蛋白 单克隆抗体 中和活性 文献传递 大豆体细胞胚胎组织培养及遗传转化研究进展 被引量:2 2013年 大豆体细胞胚胎遗传转化体系是提高外源基因遗传稳定性,克服嵌合体的有效途径,因此建立高效稳定的大豆体细胞胚胎组织培养体系并广泛应用于大豆的遗传转化是完善大豆遗传转化研究的重要研究内容。本研究对目前大豆体细胞胚胎再生体系的组织学和遗传转化的研究进展进行了总结,分析了大豆体细胞胚胎组织培养和遗传转化的影响因素。应在现有的组织学研究的基础上,充分考虑影响大豆体细胞胚胎诱导的因素,对遗传转化方法进行改良,以期为大豆体细胞胚胎遗传转化体系提供新的研究思路。 何禹璇 郭东全 钱雪艳 杨向东 李闯 董英山 王丕武关键词:体细胞胚 大豆 受体系统 转基因方法