天津市自然科学基金(06YFJMJC13200)
- 作品数：2 被引量：9H指数：1
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- 相关机构：天津大学中国药品生物制品检定所更多>>
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- 相关领域：理学生物学医药卫生更多>>
- 酵母双杂交技术筛查与vasostatin相互作用的蛋白质
- 2008年
- 目的:通过酵母双杂交技术筛查与血管生长抑制因子vasostatin相互作用的蛋白质,为进一步阐明其抑制血管生成作用的分子机制奠定基础。方法:应用第3代酵母双杂交系统,构建vasostatin诱饵质粒,经过表达和自激活验证后筛选预转化的人内皮细胞cDNA方库。将在四缺培养基中筛选得到的阳性克隆提取酵母质粒转化大肠杆菌,进行限制性酶切和测序,寻找可能与vastotatin具有相互作用的蛋白序列。结果:经过酵母双杂交共获得21个克隆,经过验证,有3个阳性克隆;经过NCBI的BIAST进行同源性分析,它们的核酸和蛋白序列与已知基因高度同源,它们分别为层黏连蛋白α5(7547～8112)和整合素αV(1257～1820、316～878)片段,均为重要的配体结合部位。Vasostatin蛋白通过与该区域结合,影响FAK、VEGF和bFGF等的信号通路,抑制血管生成。结论:酵母双杂交筛选获得的层黏连蛋白和整合素蛋白的3个蛋白片段,它们与肿瘤内血管内皮细胞增殖和迁移等密切相关。
- 赵阳饶春明黄鹤甘一如王军志
- 关键词：酵母双杂交VASOSTATIN基因功能
- 盐酸克伦特罗完全抗原的合成及其偶联工艺的优化被引量：9
- 2009年
- 为获取用于快速免疫分析的免疫抗原和包被抗原,本实验采用重氮化反应制备盐酸克伦特罗(Clenbuterol hydrochloride,CL)完全抗原,在强酸条件下CL先经重氮化,再与鸡卵清白蛋白(OVA)发生共价取代制备了盐酸克伦特罗包被抗原(OVA-CL),并以正交实验确定了共价取代反应的关键影响因素,进一步采用单因素实验确定了反应所需的最佳条件,并通过紫外扫描对制得的包被抗原进行了鉴定。结果表明,投料比例是盐酸克伦特罗完全抗原合成的关键因素,搅拌转速和反应时间也起着至关重要的作用。而且偶联反应在1h内基本完成,延长反应时间对提高产物偶联比影响不大。当投料比例为30:1,pH值约为8,低速搅拌状况下,包被抗原和免疫抗原的偶联比分别高达29:1和48:1,盐酸克伦特罗完全抗原合成条件的优化筛选取得了预期的效果。
- 杨香瑜黄鹤
- 关键词：盐酸克伦特罗重氮化反应
