广州市科技计划项目(2010Y1-C521)
- 作品数：7 被引量：21H指数：3
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- 地塞米松对嘌呤霉素损伤足细胞nephrinmRNA表达的影响及意义
- 2012年
- 目的观察嘌呤霉素（PAN）和地塞米松（DEX）干预后足细胞形态及nephrinmRNA表达变化，探讨DEX保护PAN诱导体外培养足细胞损伤的作用机制。方法将体外培养的小鼠肾小球足细胞分为三组，分别为对照组、PAN组和DEX组。对照组加入等体积RPMI-1640培养液培养；PAN组加入PAN（终浓度50mg／L）；DEX组同时加入PAN（终浓度50mg／L）和DEX（终浓度1mmol／L）。培养8h、24h和48h后，相差显微镜下观察足细胞形态变化；用图像处理软件分析各组细胞胞体面积的差异。采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测培养24h、48h时足细胞nephrinmRNA表达。结果对照组足细胞形态正常，细胞胞体较大，可见树枝样突起及细胞间形成相互连接；PAN诱导足细胞损伤8h、24h和48h时，足细胞面积均较对照组明显缩小，分别为对照组的75％、46％和27％（P〈0．01），足细胞足突及细胞间连接消失。DEX组在干预8h、24h和48h时，足细胞胞体面积均明显大于PAN组（P〈0．01），部分足细胞可见足突及细胞问连接。PAN组足细胞培养24h和48h时，nephrinmRNA表达较对照组明显下降（P〈O．01）；DEX组干预后24h及48h，足细胞nephrinmRNA表达均较PAN组显著升高（P〈0．01）。结论DEX对PAN诱导足细胞损伤具有保护作用，其作用机制可能与上调足细胞分子nephrinmRNA表达有关。
- 王丽娜于力余治奇张瑶于生友
- 关键词：足细胞地塞米松嘌呤霉素NEPHRIN
- 血清胱抑素C与视黄醇结合蛋白检测在儿童狼疮性肾炎肾损害诊断中的意义
- 目的 探讨血清胱抑素C (CysC)与血清视黄醇结合蛋白(RBP)检测在系统性红斑狼疮(SLE)合并狼疮性肾炎(LN)早期肾功能损害诊断中的临床意义.方法20例狼疮性肾炎患儿采用免疫散射比浊法检测血清CysC与血清RBP...
- 马媛媛于力
- 关键词：视黄醇结合蛋白狼疮性肾炎肾功能损害
- 血清胱抑素C与视黄醇结合蛋白检测在儿童狼疮性肾炎肾损害诊断中的意义被引量：11
- 2012年
- 目的探讨血清胱抑素C(CysC)与血清视黄醇结合蛋白(RBP)检测在系统性红斑狼疮合并狼疮性肾炎早期肾功能损害诊断中的临床意义。方法 20例狼疮性肾炎患儿采用免疫速率散射比浊法检测血清CysC与血清RBP的水平。同时,用酶法检测血清尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)和血β2-微球蛋白(β2-MG)等生化指标。同时检测血补体C3、C4,抗核抗体、抗dsDNA抗体、抗Sm抗体,找狼疮细胞。结果狼疮性肾炎患儿临床分型以肾病综合征为主;血清免疫学指标有明显的变化:当BUN、Scr和β2-MG无变化时,血清CysC和RBP已经升高;当BUN、Scr和β2-MG有变化时,血清CysC和RBP明显升高;CysC和RBP均显著高于健康儿童(P<0.01)。结论 CysC与RBP可作为狼疮性肾炎早期肾损害的血清学指标,为临床早期判断狼疮性肾炎肾损害提供依据。
- 马媛媛于力郝志宏温捷
- 关键词：视黄醇结合蛋白狼疮性肾炎肾损害
- 福辛普利对大鼠肾小球系膜细胞β_1整合素表达及细胞外基质分泌的影响
- 2012年
- 目的观察福辛普利(fosinopril,FOS)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)β1整合素表达及分泌细胞外基质(ECM)的影响。方法大鼠GMC原代体外培养,鉴定3～10代后用于实验。实验分为5组:对照组、LPS刺激组(LPS)、FOS高、中、低剂量组(分别为FOS1组、FOS2组、FOS3组)。酶联免疫吸附试验(ELISA)测定6、12和24 h细胞培养上清液中ECM层黏连蛋白(LN),纤维连接蛋白(FN)和Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)含量;荧光半定量RT-PCR检测β1整合素mRNA表达。结果体外培养的大鼠GMC可分泌一定量的ECM,在各时间点,LPS组GMC的ECM分泌均高于对照组(P<0.01),而FOS各组GMC的ECM分泌均低于LPS组(P<0.01);体外培养的大鼠GMC可表达一定量的β1整合素mRNA,在各时间点,LPS组GMC的β1整合素mRNA表达量均高于对照组,FOS各组GMC的β1整合素mRNA表达量均低于LPS组。结论 LPS可诱导大鼠GMCβ1整合素表达及ECM分泌增加,而FOS可抑制LPS诱导的大鼠GMCβ1整合素表达及ECM分泌增加,FOS可以通过抑制细胞因子及ECM分泌等非血流动力学机制对肾脏起保护作用。
- 郝志宏于力王丽娜温捷张瑶
- 关键词：细胞外基质肾小球系膜细胞福辛普利Β1整合素
- 银杏叶提取物对大鼠肾小球系膜细胞中细胞外基质及β_1整合素表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的观察银杏叶提取物(EGB)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)中细胞外基质(ECM)分泌及β1整合素(Itgβ1)表达的影响。方法体外培养的大鼠GMC鉴定后第3～10代用于实验。实验分为5组:对照组,LPS组,EGB高、中、低剂量组。酶联免疫吸附试验法测定6 h、12 h和24 h细胞培养上清液中ECM层黏连蛋白、纤维连接蛋白和Ⅳ型胶原蛋白水平;荧光半定量-PCR法检测Itgβ1 mRNA表达的变化。结果 1.正常培养的大鼠GMC可分泌一定量的ECM,LPS组在各时间点分泌ECM均高于对照组(Pa<0.01),而EGB各剂量组分泌ECM均低于LPS组(Pa<0.01);2.正常培养的大鼠GMC可表达一定量Itgβ1mRNA,LPS组各时间点Itgβ1 mRNA表达量均高于对照组(Pa<0.01),EGB各剂量组Itgβ1 mRNA表达量均低于LPS组(Pa<0.01)。结论LPS可诱导GMC Itgβ1 mRNA表达及ECM分泌增加,EGB可抑制LPS诱导的GMC Itgβ1 mRNA表达及ECM分泌增加,EGB可通过抑制细胞因子及ECM分泌等分子生物学机制对肾脏起保护作用。
- 郝志宏于力张瑶王丽娜翁志媛
- 关键词：细胞外基质肾小球系膜细胞银杏叶提取物Β1整合素
- 瞬时受体电位阳离子通道蛋白6在肾小球足细胞损伤中的作用
- 瞬时受体电位阳离子通道蛋白6 (TRPC6)是新近发现的肾小球足细胞分子，定位于足细胞裂孔隔膜，与nephrin、podocin和CD2AP存在共定位分布，共同参与信号转导，并维持足细胞正常的结构和功能.TRPC6基因突...
- 马媛媛于力
- 关键词：足细胞蛋白尿
- 原发性小血管炎及其肾损害的研究进展
- 原发性小血管炎是一类自身免疫性疾病，可累及全身多个脏器。肾脏受累则多进展迅速，造成不可逆的终末期肾衰竭，肺受累则可引起大咯血而危及生命。抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)是其特异性的血清学诊断工具，也称之为ANCA相关性小...
- 马媛媛于力
- 关键词：血管炎原发性肾损害
- Bad在地塞米松抑制嘌呤霉素诱导足细胞凋亡中的表达及意义被引量：3
- 2011年
- 目的观察嘌呤霉素(PAN)诱导和地塞米松(DEX)干预后足细胞凋亡率及凋亡相关蛋白Bad表达的变化。方法体外培养小鼠足细胞,将其分为对照组、PAN组和DEX组。对照组用含二甲基亚砜的RPM I-1640培养液培养;PAN组加入PAN;DEX组同时加入PAN和DEX。处理8 h、24 h和48 h后,用实时荧光定量聚合酶链式反应及W estern blot分别检测各时间点Bad mRNA和蛋白的表达;用Annexin V-FITC/PI双染色法结合流式细胞仪检测足细胞凋亡率的变化。结果 1.PAN组各时间点Bad mRNA的表达均较对照组升高,并呈上升趋势,24 h和48 h时均显著升高(Pa<0.01);8 h时Bad蛋白表达与对照组比较无明显差异(P>0.05),24 h和48 h时均较对照组明显升高(Pa<0.05);各时间点足细胞凋亡率均较对照组升高,48 h时显著升高(P<0.01)。2.DEX组Bad mRNA和蛋白的表达8 h时与PAN组比较无明显差异,但24 h时明显降低(P<0.05),各时间点足细胞凋亡率均较PAN组降低,24 h时显著降低(P<0.01)。结论 PAN诱导足细胞后其凋亡率明显升高,可能与Bad mRNA及蛋白的表达增高有关,而DEX可能通过降低Bad mRNA及蛋白的表达减少足细胞的凋亡而抑制PAN的诱导,起到保护足细胞的作用。
- 吴汪丽于力张瑶王丽娜
- 关键词：足细胞BAD地塞米松
- CD2AP分子mRNA和蛋白的表达在肾组织及细胞损伤中的作用被引量：5
- 2013年
- 目的观察CD2AP分子mRNA和蛋白的表达在嘌呤霉素(PAN)肾病模型及肾小球足细胞系损伤中的作用。方法将雄性SD大鼠64只随机分为肾病模型组和对照组,每组32只。肾病模型组大鼠尾静脉注射PAN 5 mg/kg,建立PAN肾病模型;对照组注射8 mg/kg生理盐水。分别于第2、4、6和8周每组各处死8只大鼠用于实验。体外培养小鼠肾小球足细胞系(MPC5),分为细胞刺激组和对照组,细胞刺激组给予PAN刺激足细胞,于刺激后12、24和48 h收集足细胞用于实验;对照组用RPMI 1640培养液培养足细胞。光镜下观察肾病模型组肾组织的病理学改变;倒置显微镜下观察细胞刺激组足细胞的形态变化;应用荧光定量PCR、Western blot和免疫荧光染色检测肾病模型组、细胞刺激组和对照组不同时间点CD2AP分子mRNA、蛋白表达及分布的变化。结果(1)肾病模型组病理学变化为系膜和细胞外基质增生,部分或广泛肾小球呈局灶节段性硬化;肾病模型组注射PAN后第2周CD2AP分子mRNA和蛋白的表达量明显下降,一直持续至第8周。(2)细胞刺激组形态变化为刺激后12、24及48 h足细胞体积明显缩小,主要表现为足突回缩、消失及失去细胞间连接;细胞刺激组在给予PAN刺激后12 h CD2AP分子mRNA表达明显下降,mRNA表达下降持续至PAN刺激后48 h;CD2AP的蛋白表达在刺激足细胞12 h时无显著改变,在24和48 h时CD2AP的蛋白表达明显下降。(3)免疫荧光染色显示,正常情况下CD2AP均匀分布于足细胞的细胞核、细胞浆及细胞膜;细胞刺激组12和24 h CD2AP分布出现异常,在细胞核和细胞浆呈粗颗粒状分布,刺激48 h后在细胞膜和细胞浆出现分布缺失。结论 CD2AP在大鼠PAN肾病模型及体外培养肾小球足细胞系中mRNA和蛋白的表达明显下调,提示CD2AP分子是肾小球足细胞损伤的重要标志,CD2AP表达量及分布变化可能是临床上蛋白尿发生的分子机制。
- 李晓艳于力于生友温捷
- 关键词：嘌呤霉素CD2AP肾组织足细胞
- 瞬时受体电位阳离子通道蛋白6在肾小球足细胞损伤中的作用被引量：1
- 2012年
- 瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)是新近发现的肾小球足细胞分子,定位于足细胞裂孔隔膜,与nephrin、podocin和CD2AP存在共定位分布,共同参与信号转导,并维持足细胞正常的结构和功能。TRPC6基因突变可以导致常染色体显性家族性局灶节段性肾小球硬化,患者表现为大量蛋白尿和足细胞损伤,体外试验也表明其高表达可通过增加钙离子内流损伤足细胞,说明TRPC6与蛋白尿的发生、发展密切相关。现将阐明TRPC6在足细胞损伤中的作用,有望为肾脏病的诊断和治疗提供新的靶点。
- 马媛媛于力
- 关键词：足细胞蛋白尿
