国家自然科学基金(30570546)
- 作品数：28 被引量：82H指数：6
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- 姜黄素对中波紫外线照射后HaCaT细胞氧化致癌的预防作用被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨姜黄素(Cur)对中波紫外线(UVB)照射后人类角质形成细胞(HaCaT)氧化致癌的预防作用及其机制。方法:细胞经UVB照射后,立即加入浓度分别为1.25、2.50和5.00mg.L-1的Cur继续培养,用酶化学法测定氧化和抗氧化物含量;由罗丹明123和Fluo-3/AM荧光强度计算细胞Δψ和[Ca2+]i,用流式细胞术检测凋亡相关因子蛋白表达。结果:与对照组比较,UVB照射组HaCaT细胞Δψ、SOD和GSH-Px含量及Bcl-2蛋白表达均显著下降(P<0.01),而细胞[Ca2+]i、ROS、NO和MDA含量以及caspase-3、cytochromc和Bax蛋白表达均明显升高(P<0.01);与UVB照射组比较,UVB照射后加入Cur各组细胞Δψ和Bcl-2蛋白表达以及2.50和5.00mg.L-1组的SOD和GSH-Px含量均明显升高(P<0.01),而各加药组的ROS、NO和MDA含量以及caspase-3、cytochromc和Bax蛋白表达和2.50和5.00mg.L-1组的[Ca2+]i均显著降低(P<0.01),Bcl-2/Bax比值为0.58～2.50,并显示Cur剂量-效应关系。结论:Cur可能通过提高线粒体膜电位和抗氧化酶活性,降低[Ca2+]i、氧化物含量及凋亡相关诱导因子蛋白表达,从而达到其抗UVB辐射细胞致癌的预防作用。
- 康顺爱郭彩霞王志成李艳博姚崇舜龚守良李校堃
- 关键词：姜黄素HACAT细胞中波紫外线
- 白桦脂醇对大鼠酒精性肝损伤的保护作用被引量：9
- 2009年
- 目的:观察白桦脂醇对大鼠酒精性肝损伤的保护作用及其机制。方法:将SD大鼠随机分为6组,正常组和酒精性肝病(ALD)模型组、白桦脂醇低、中、高剂量组和阳性药物(益肝灵片)对照组。采用白酒灌胃的方法建立大鼠酒精性肝病模型后,白桦脂醇各剂量组(10、20和40mg·kg-1·d-1)灌胃15d,阳性药物对照组给予益肝灵片(含水飞蓟宾100mg·kg-1·d-1)灌胃15d后,禁食12h处死大鼠,检测各组大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHO)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)以及血清、肝匀浆中甘油三酯(TG)水平,同时做肝脏的病理切片观察。结果:与正常对照组比较,ALD模型组的大鼠血清ALT、AST、ALP、GGT活性和TG、CHO、LDL含量均明显升高(P<0.01),而HDL的含量明显降低(P<0.01);血清、肝组织匀浆TG含量明显升高;肝组织病理损伤严重,肝小叶结构紊乱,肝细胞索消失,细胞肿胀,呈气球样变,胞质内可见大小不一、数量不等的脂滴。中、高剂量白桦脂醇能明显地降低ALD大鼠血清中ALT、AST、ALP、GGT活性和TG、CHO含量,且显著降低血清、肝组织中TG含量,与ALD模型组比较差异均具有显著性(P<0.01);高剂量白桦脂醇还能明显地改善由酒精引起的肝组织脂肪样变和坏死,与阳性药物对照组结果类似。结论:高剂量白桦脂醇对酒精性肝损伤有明显的保护作用,其作用机制可能为抗氧化、清除自由基代谢产物,抑制脂质过氧化反应;调节血脂、减少脂肪在肝脏的沉积。
- 狄英波张桂英吴光健王宝贵龚守良赵刚
- 关键词：酒精性肝损伤
- Smac/DIABLO与肿瘤被引量：6
- 2006年
- Smac/DIABLO是一种新近发现的线粒体膜间蛋白,与细胞色素c一样也是caspase的线粒体激活因子。在细胞凋亡中,Smac/DIABLO通过解除凋亡抑制蛋白(IAPs)对caspase3、7和9的抑制作用而发挥促凋亡作用。在肿瘤细胞凋亡中,Smac/DIABLO可以通过其N或C末端促进肿瘤细胞凋亡、增强肿瘤免疫及影响肿瘤细胞周期等机制抗肿瘤,这决定其在肿瘤治疗中具有较好的应用前景。
- 王志成龚守良
- 关键词：SMAC/DIABLO凋亡凋亡抑制蛋白肿瘤
- 携带Egr-1启动子和Endostatin基因的腺病毒穿梭质粒构建及鉴定
- 2008年
- 目的构建含辐射敏感启动子Egr-1和人内皮抑素(endostatin)基因的腺病毒穿梭质粒pshuttle-Egr1-Endostatin。方法利用RT-PCR方法从人胎肝中扩增出人endostatin cDNA序列,从T-Egr1质粒中扩增出Egr-1基因序列,并将它们连接到pMD19T质粒进行测序,利用基因重组技术构建含有辐射诱导启动子Egr-1的腺病毒穿梭质粒pshuttle-Egr1-Endostatin。结果经测序证实,获得的人endostatin基因和Egr-1基因与GenBank公布的完全一致,表明克隆人endostatin基因和Egr-1启动子成功,并经鉴定证实含有辐射诱导启动子Egr-1的腺病毒穿梭质粒pshuttle-Egr1-Endostatin构建正确。结论本实验成功克隆了人endostatin基因和Egr-1启动子并构建了含辐射敏感启动子的腺病毒穿梭质粒pshuttle-Egr1-Endostatin。
- 李艳博郭彩霞梁硕王志成康顺爱王剑锋龚守良
- 关键词：内皮抑素基因克隆腺病毒EGR-1启动子
- 低剂量辐射诱导EL-4淋巴瘤细胞凋亡及细胞周期进程适应性反应的时间效应被引量：1
- 2008年
- 目的：研究低剂量辐射诱导EL-4淋巴瘤细胞凋亡及细胞周期进程适应性反应的时间效应，以揭示低剂量辐射生物效应及其诱导适应性反应的可能机制。方法：实验分D2组（攻击剂量）、D1（诱导剂量）＋D2组和假照组。用X射线照射离体EL-4淋巴瘤细胞，其D1为75mGy（剂量率12．5mGy·min^-1），D2为1．5Gy（剂量率287mGy·min^-1），D1和D2间隔为3～60h。通过流式细胞仪检测其细胞凋亡和细胞周期进程的变化。结果：当D1和D2间隔为3～24h时，D1＋D2组细胞凋亡百分数明显低于D2组（P〈0．05或P〈0．01），G0／G1期细胞百分数不同程度低于D2组，而S期细胞百分数明显高于D2组（P〈0．05）。结论：75mGy（12．5mGy·min^-1）照射后3～24h，进行1．5Gy（287mGy·min^-1）照射，可诱导体外EL-4淋巴瘤细胞凋亡和细胞周期进程的适应性反应。
- 刘淑春赵文举孙丽光李鹏武吕喆龚守良
- 关键词：电离辐射淋巴瘤细胞细胞凋亡细胞周期
- taurolidine对小鼠黑色素瘤细胞辐射敏感性的作用及机制被引量：2
- 2008年
- 目的:研究taurolidine通过增强Bax和Bad蛋白表达,降低Bcl-2蛋白表达,提高小鼠黑色素瘤B16-F10细胞的辐射敏感性的作用及机制。方法:流式细胞仪检测0、10、25、50、100和150μmol·L-1 taurolidine诱导B16-F10细胞凋亡的百分比;细胞克隆实验检测放射增敏性;Western blotting分析检测蛋白的表达。结果:50μmol·L-1 taurolidine作用于B16-F10细胞48h,可诱导5%的细胞凋亡,随作用时间的延长及taurolidine浓度的增加,细胞凋亡的百分率增加(P<0.05),呈显著的时效和量效关系;细胞克隆存活实验显示,当25μmol·L-1 taurolidine与2GyX射线照射联合作用B16-F10细胞时,与单纯给药组和单纯照射组比较,给药联合放疗组的细胞存活率显著降低(P<0.05),并随着药物浓度及照射剂量的增加细胞存活率进一步下降。随着taurolidine的浓度逐渐提高,小鼠黑色素瘤细胞放射增敏比(SERD0和SERDq)增高,50μmol·L-1 taurolidine组与10μmol·L-1组比较差异有显著性(P<0.05);同时促凋亡蛋白Bax和Bad的表达增强,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达下降。结论:taurolidine联合X射线照射通过调节Bcl-2家族蛋白协同诱导小鼠黑色素瘤细胞凋亡,从而提高了放射敏感性。
- 孙宝胜刘士新王铁君黄国民龚守良刘林林
- 关键词：TAUROLIDINE细胞凋亡BCL-2蛋白
- 低剂量辐射诱导EL-4淋巴瘤细胞凋亡及细胞周期进程适应性反应的剂量率效应被引量：4
- 2008年
- 目的:观察低剂量辐射诱导EL-4淋巴瘤细胞凋亡及细胞周期进程适应性反应的剂量率效应,以揭示低剂量辐射生物效应及其诱导适应性反应的可能机制。方法:实验分D2组(攻击剂量)、D1(诱导剂量)+D2组和假照组。用X射线照射离体EL-4淋巴瘤细胞,其D1为75mGy(剂量率6.25～200.00mGy·min-1),D2为1.5Gy(剂量率287mGy/min),D1和D2间隔6h。通过流式细胞仪检测其细胞凋亡和细胞周期进程的变化。结果:当D1剂量率为6.25～50.00mGy,D1+D2组细胞凋亡百分数明显低于D2组(P<0.05),G0/G1期细胞百分数明显低于D2组(P<0.01),而S期细胞百分数不同程度高于D2组。结论:D1为75mGy(剂量率6.25～50.00mGy·min-1),D2为1.5Gy(剂量率287mGy·min-1)、D1和D2间隔6h,可诱导体外EL-4淋巴瘤细胞凋亡和细胞周期进程的适应性反应。
- 刘淑春赵文举吕喆李艳博康顺爱龚守良
- 关键词：淋巴瘤细胞剂量率细胞凋亡细胞周期
- pEgr-hp53体外稳定转染联合辐射对人肺腺癌A549细胞周期进程及增殖的影响被引量：1
- 2008年
- 目的探讨pEgr-hp53重组质粒体外稳定转染联合辐射对人肺腺癌A549细胞周期进程及增殖的影响,阐明其抑制肿瘤细胞增殖的机制。方法脂质体包裹重组质粒pEgr-hp53体外转染A549细胞,G418筛选稳定表达细胞株并扩增培养,采用细胞计数法检测肿瘤细胞增殖速度,流式细胞术检测肿瘤细胞周期的变化。结果经pEgr-hp53体外转染A549细胞10到20d,G418筛选得到稳定表达的细胞株,联合X射线照射可明显抑制A549细胞的体外增殖,细胞周期进程明显改变,G1期和G2期发生阻滞。结论提示pEgr-hp53体外稳定转染联合辐射可使人肺腺癌A549细胞周期阻滞于G1期和G2期,并可抑制肿瘤细胞增殖,本研究为提高肿瘤放射治疗效果提供新的治疗方案奠定了理论基础和实验依据。
- 董丽华刘锋李艳博龚守良
- 关键词：人肺腺癌细胞基因治疗
- pcEgr-hp53辐射诱导表达载体的构建及其体外抗肿瘤的作用被引量：1
- 2006年
- 目的构建辐射诱导表达载体pcEgr-hp53,并研究其体外稳定转染联合X射线照射对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制作用及其凋亡的影响。方法将野生型p53cDNA全长插入pcDNA3.1质粒的多克隆位点,用Egr-1的启动子替代pcDNA3.1质粒的CMV启动子,构建成pcEgr-hp53重组质粒;通过脂质体介导转染法将重组质粒pcEgr-hp53和pcDNA3.1分别转染入SKOV3细胞株,细胞株命名为SKOV3-hp53及SKOV3-vect,并经G418筛选稳定克隆并扩增培养,两组接受不同剂量X射线照射,观察其对肿瘤细胞生长及其凋亡的影响。结果经限制性内切酶酶切鉴定,辐射诱导表达载体pcEgr-hp53构建正确,稳定转染pcEgr-hp53联合X-射线照射可明显抑制肿瘤细胞的增殖,并诱导肿瘤细胞凋亡。结论本研究成功构建了辐射诱导表达载体pcEgr-hP53,体外基因-放射联合治疗诱导肿瘤细胞凋亡明显增多,具有显著的肿瘤抑制作用。本研究将为提高临床恶性肿瘤放疗疗效奠定了理论和实验基础。
- 董丽华付士波杨英刘扬龚守良
- 关键词：肿瘤基因-放射治疗
- 姜黄素对中波紫外线损伤HaCaT细胞保护作用被引量：3
- 2009年
- 目的通过姜黄素(Cur)影响中波紫外线(UVB)辐射HaCaT细胞线粒体膜电位(Δψ)及其相关因子,探讨其对UVB损伤细胞的保护作用及其机制。方法HaCaT细胞经UVB辐射后,加入不同剂量姜黄素继续培养,通过罗丹明123和Fluo-3/AM荧光强度检测细胞Δψ电位和细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i),以流式细胞术检测caspase-3和细胞色素c(Cytc)凋亡相关蛋白的表达。结果UVB辐射HaCaT细胞后,低线粒体膜电位的细胞数为(80.8±2.23)%,[Ca2+]i为(71.9±1.61)%,caspase-3和Cytc蛋白表达量分别为(29.00±1.60)%和(27.5±1.60)%,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);加入姜黄素后与UVB组比较,细胞线粒体膜电位、[Ca2+]i及Cytc和caspase-3蛋白表达均呈剂量-效应关系,即随着药物浓度的增加,具有低细胞线粒体膜电位的细胞数、Cytc和caspase-3蛋白表达均显著减少,[Ca2+]i显著降低。结论姜黄素可能通过提高细胞线粒体膜电位,降低[Ca2+]i含量,减弱Cytc和caspase-3的级联反应,达到其抑制UVB辐射引起的HaCaT细胞凋亡,具有对UVB损伤HaCaT细胞的保护作用。
- 康顺爱郭彩霞王志成李艳博姚崇舜龚守良李校堃
- 关键词：姜黄素HACAT细胞中波紫外线
