四川省应用基础研究计划项目(2009JY0076)
- 作品数：6 被引量：14H指数：3
- 相关作者：李燕陈庄钟森史小玲王晓燕更多>>
- 相关机构：泸州医学院附属医院成都中医药大学泸州医学院更多>>
- 发文基金：四川省应用基础研究计划项目四川省科技厅科技支撑计划项目更多>>
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- HSP70/CD80 DNA疫苗对哮喘小鼠气道重构的治疗及机制
- 2013年
- 目的:观察HSP70/CD80 DNA疫苗对哮喘小鼠气道重构的治疗作用,并探讨其可能的作用机制。方法:利用OVA腹腔注射致敏小鼠建立慢性哮喘模型。HSP70/CD80 DNA疫苗治疗后,ELISA检测眼球血OVA-IgE和支气管肺泡灌洗液中IL-5的含量,HE染色、AB-PAS染色和PCNA免疫组化观察小鼠肺组织气道重构改变,实时荧光定量PCR测定T-bet、GATA-3在脾脏中的表达。结果:哮喘模型小鼠较对照小鼠血清OVA-IgE升高,气道壁增厚,杯状细胞和黏液分泌增多,平滑肌细胞数增多明显(P<0.05),且IL-5的含量增加,T-bet/GATA-3表达比减低(P<0.05);疫苗治疗能减低血清OVA-IgE,减轻气道壁增厚,杯状细胞增多和平滑肌细胞增生(P<0.05),且减少IL-5含量,T-bet/GATA-3表达比升高(P<0.05)。结论:通过调节转录因子T-bet/GATA-3平衡,HSP70/CD80 DNA疫苗可能对哮喘气道重构存在抑制作用。
- 李燕夏晓群史小玲王晓燕唐利陈枫钟森陈庄
- 关键词：哮喘气道重构T-BETGATA3
- HSP70/CD80 DNA疫苗通过调节Th1/Th2/Treg/Th17细胞对小鼠急性哮喘的抑制作用被引量：5
- 2014年
- 目的考察热休克蛋白70(HSP70)/CD80 DNA疫苗治疗小鼠急性哮喘的疗效,研究该过程中Th1/Th2/Treg/Th17再平衡的作用机制。方法 BALB/c小鼠40只随机分为空白对照组(空白组),哮喘模型组(模型组),pVAX1(+)空载体对照组(空载组)和HSP70/CD80疫苗治疗组(治疗组),每组10只。鸡卵清蛋白(OVA)激发致敏小鼠构建急性哮喘模型,HSP70/CD80 DNA疫苗进行治疗。吸入性支气管激发试验测定气道反应性,ELISA法测定血清中IgE的含量,HE和AB-PAS染色观察肺组织病理学改变,ELISA法观察支气管肺泡灌洗液中γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)、转化生长因子β(TGF-β)和白细胞介素-17(IL-17)等细胞因子的含量变化,实时荧光定量PCR观察肺组织中T-bet、GATA连接蛋白3(GATA-3)、叉头蛋白3(Foxp3)和维甲酸受体相关孤儿受体(RORγt)等转录因子的表达。结果与模型组相比,DNA疫苗治疗后小鼠气道反应性明显下降(P<0.05),IgE浓度降低(P<0.05),肺组织炎症浸润减少,杯状细胞增生不明显,IFN-γ/IL-4和TGF-β/IL-17比值升高(P均<0.05),T-bet/GATA-3和Foxp3/RORγt比值升高(P均<0.05)。结论 HSP70/CD80 DNA疫苗可能通过改变IFN-γ/IL-4和TGF-β/IL-17的比值、T-bet/GATA-3和Foxp3/RORγt的比值,使Th1/Th2/Treg/Th17恢复平衡,从而发挥对哮喘的治疗作用。
- 李燕谢敏史小玲王晓燕唐利钟森陈庄
- 关键词：哮喘辅助性T细胞17
- 重组质粒pVAX1-Hsp70/CD80DNA疫苗体内外表达
- 2015年
- 目的构建p VAX1-Hsp70/CD80质粒,观察其在体内外的表达,初步评估其有效性和安全性。方法HindⅢ和XbaⅠ酶切质粒pc DNA3.1-Hsp70/CD80和载体p VAX1,将目的基因Hsp70/CD80定向连接入p VAX1中,鉴定构建的质粒p VAX1-Hsp70/CD8。将p VAX1-Hsp70/CD80质粒转染人胚肾293T细胞,Western blot法检测在转染细胞中Hsp70和CD80蛋白瞬时和稳定表达情况。用100μg p VAX1-Hsp70/CD80嵌合DNA疫苗免疫小鼠后,于第7天、15天、30天和180天用RT-PCR方法观察Hsp70和CD80在各组织中表达,Real time PCR检测IFN-γ和IL-4在脾脏中的表达。结果经酶切和测序鉴定,重组质粒构建成功。转染24、48和72 h后的细胞以及G418筛选的稳定表达细胞株均有Hsp70和CD80的表达。第7天和第15天肌肉、淋巴结、骨髓、脾、肝、肺、肾和胸腺组织均有Hsp70和CD80表达。第30天肌肉、肺和肝有Hsp70表达。第180天均未检测出Hsp70和CD80表达。第7天和第15天IFN-γ有较高水平表达。结论成功构建了p VAX1-Hsp70/CD80质粒,该重组质粒在一定时间内能高效表达Hsp70和CD80,并能诱导IFN-γ较高表达。
- 史小玲李燕王晓燕唐利陈枫钟森陈庄
- 关键词：CD80DNA疫苗免疫反应
- HSP70／CD80DNA疫苗通过调节趋化因子及受体对哮喘小鼠气道炎症的影响被引量：4
- 2013年
- 目的观察HSP70／CD80DNA疫苗通过调节趋化因子及趋化因子受体对急性哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性的治疗作用。方法以卵清蛋白（OVA）致敏小鼠，建立小鼠急性哮喘模型，同时肌肉注射HSP70／CD80DNA疫苗。观察小鼠气道反应性，外周血IgE，肺组织炎症和黏液分泌情况，CCL5和CCLl7在气道表达情况。Real—timePCR检测肺组织ccR5和CCR4基因表达。结果与对照小鼠相比，急性哮喘小鼠的气道反应性明显增高，血清IgE含量明显升高（P〈0．05），肺组织炎细胞浸润明显（P〈0．05），大量黏液形成。HSP70／CD80DNA疫苗治疗小鼠后，能有效减轻气道高反应性，降低血清IgE含量，降低抑制气道炎细胞浸润，减少黏液分泌（P〈0．05）；且CCL5在气道上皮呈阳性表达，CCLl7呈阴性（P〈0．05）；肺组织CCR5基因表达增加和CCR4表达减少（P〈0．05）。结论HSP70／CD80DNA疫苗可通过增强CCL5在气道上皮中的表达，减少CCLl7表达；上调CCR5抑制CCR4，使CCR5／CCR4升高，从而恢复Thl／Th2平衡，起到治疗哮喘的作用。
- 李燕郭宇史小玲王晓燕唐利陈枫钟森陈庄
- 关键词：哮喘气道炎症CCR4CCR5CCL5
- 热休克蛋白70/CD80 DNA疫苗与慢性哮喘气道重塑的影响
- 2013年
- 目的观察热休克蛋白(HSP)70/CD80嵌合DNA疫苗对慢性哮喘小鼠气道重塑病理学改变的影响。方法经肌肉注射HSP70/CD80DNA疫苗后,雌性健康BALB/c小鼠采用鸡卵清蛋白建立慢性哮喘小鼠模型。全身体积描记仪检测小鼠气道反应性。苏木素-伊红(HE)染色、过碘雪夫酸(PAS)染色、马氏(Masson)三色染色和免疫组化增殖细胞核抗原(PCNA)染色观察肺组织气道重塑病理学改变情况。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液中细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)含量。实时荧光定聚合酶链反应(PCR)测定脾脏组织IFN-γ和IL-4基因表达水平。结果与对照组比较,慢性哮喘组小鼠表现为明显的气道高反应性(P<0.05)和气道壁增厚(P<0.05)等气道重塑改变。与慢性哮喘组比较,疫苗组小鼠气道反应性降低(P<0.05),气道重塑减轻;且疫苗组小鼠细胞因子IFN-γ/IL-4比值升高(P<0.05),脾脏组织IFN-γ/IL-4基因表达量比值升高(P<0.05)。结论 HSP70/CD80DNA疫苗对慢性哮喘气道重塑存在抑制作用,表现为延缓气道病理学改变,降低气道阻力。其机制可能与促进IFN-γ的生成,增强Th1型免疫反应,恢复Th1/Th2平衡有关。
- 李燕史小玲夏晓群Jyothi Margapuvi李世宁钟森陈庄
- 关键词：疫苗哮喘气道重塑
