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肿瘤谱阵列芯片技术分析人体不同癌组织hHBrk1基因的差异表达被引量：1: 2008年; 目的检测不同肿瘤及其癌旁正常组织中hHBrk1基因的差异表达,为进一步研究hHBrk1基因对肿瘤生物学过程的影响提供线索。方法以154对正常及肿瘤组织(19种不同人体组织)和10种肿瘤细胞株的cDNA的肿瘤谱阵列芯片(Cancer profiling arrayⅡ)为研究材料,采用Northern杂交方法分析目的基因表达水平的差异。根据阳性结果收集临床肿瘤组织样本,用RT-PCR检测hHBrk1基因表达,以验证芯片结果的可靠性。结果154对组织及10个肿瘤细胞株均表达hHBrk1基因。其中肺肿瘤组织高表达hHBrk1基因,与正常配对肺组织表达丰度差异有显著性(P<0.01);在肾癌组织中的hHBrk1基因表达丰度低于配对肾组织(P<0.01)。RT-PCR证实8临床肺肿瘤组织中5例高表达hHBrk1基因。结论肿瘤谱阵列芯片技术能够快速检测hHBrk1基因在不同组织中的表达差异,hHBrk1基因可能与肺癌及肾癌的发生、发展有关。; 祝敏虞红珍周平坤隋建丽王豫徐勤枝汪思应; 关键词：基因表达癌基因

微丝相关蛋白hHBRK1/HSPC300与myosin Ⅵ相互作用的鉴定: 为了鉴定微丝相关蛋白 hHBRK1/HSPC300在肝脏中的结合蛋白,本实验采用 GST pull-down 结合肽指纹质图谱技术,发现 hHBRK1/HSPC300与 myosin Ⅵ共沉降。进一步构建 hHBRK1/...; 祝敏虞红珍王豫汪思应徐勤枝周平坤; 关键词：蛋白质相互作用; 文献传递

人微丝相关蛋白hHBRK1突变体的亚细胞定位被引量：3: 2007年; hHBrk1是本研究室利用抑制性消减杂交手段,从人支气管上皮细胞恶性转化株BERP35中克隆到的差异高表达基因.hHBRK1蛋白家族序列在动、植物界高度保守,含有一个7重复(heptadrepeat,HR)结构域.利用绿色荧光蛋白(GFP)报告系统,发现野生型hHBRK1蛋白在胞浆中弥散分布,在细胞运动前沿富集,与细胞片状伪足的微丝共定位.hHBRK1-R54和hHBRK1-S56G57蛋白在胞浆弥散分布,但失去了在细胞运动前沿富集的特征.hHBRK1ΔN(1-45)在细胞内弥散分布,而hHBRK1ΔC(46-75)选择性地在高尔基体富集.研究提示,hHBRK1蛋白为微丝相关蛋白,结构的完整性是其发挥功能的前提.hHBRK1蛋白可能通过HR结构域调控微丝聚合,从而参与微丝依赖性的细胞运动或物质运输.; 徐勤枝丁新民颜贤忠霍艳英隋建丽白贝吴德昌周平坤; 关键词：肌动蛋白绿色荧光蛋白高尔基体

沉默hHBrk1基因对肺癌细胞增殖及迁移能力的影响被引量：2: 2008年; 目的:研究玉米Brick1的人类同源基因hHBrk1(human homology of Brick1)对肿瘤细胞增殖及迁移能力的影响。方法:用质粒介导的siRNA(small interfering RNA)技术建立hHBrk1基因表达沉默的肺癌细胞模型;用细胞生长曲线、克隆形成率实验及流式细胞术分别比较不同处理的95D细胞增殖及细胞周期的变化;用Tran-swell细胞侵袭实验系统研究hHBrk1表达沉默对肺癌细胞迁移能力的影响。结果:成功筛选出hHBrk1基因表达抑制的细胞模型;hHBrk1表达沉默细胞增殖能力和细胞周期与对照组相比无明显改变,但hHBrk1表达沉默细胞迁移能力明显减弱。结论:hHBrk1可能参与调控肺癌细胞迁移能力。; 虞红珍祝敏周平坤隋建丽王豫徐勤枝汪思应; 关键词：基因 RNA干扰细胞运动细胞增殖基因沉默

Myosin VI在人体不同癌组织中的差异表达及意义: 2012年; 目的:检测肌球蛋白VI(myosin VI)在人体不同癌组织中的表达差异及其临床意义,探讨myosinVI在肿瘤转移中的机制。方法:以19种人体不同癌组织及10种人肿瘤细胞株制成的cDNA多肿瘤谱阵列芯片(cancer profiling arrayⅡ)为研究材料,采用Northern杂交方法分析myosin VI的表达;根据阳性结果收集临床不同病理分级卵巢上皮肿瘤组织制成组织芯片,免疫组化法检测myosin VI的表达,以验证芯片结果的可靠性。结果:19种人体不同癌组织及10种人肿瘤细胞株均表达myosin VI,其中卵巢癌和结肠癌组织高表达myosin VI,与正常配对卵巢和结肠组织表达丰度差异显著(P<0.01);免疫组化方法证实myosin VI在卵巢癌组织的表达率为100%(52/52),交界性上皮肿瘤表达率为81.3%(13/16),癌旁及囊腺瘤的表达率为10.4%(5/48),差异有统计学意义(P<0.05);且癌旁及囊腺瘤、交界性卵巢肿瘤和卵巢癌中myosin VI的表达呈逐渐增强趋势。结论:Myosin VI在人体不同癌组织特别是卵巢癌与配对的正常组织相比其mRNA和蛋白水平均异常高表达,提示myosin VI与恶性肿瘤特别是卵巢癌的发生、发展密切相关。; 虞红珍祝敏王豫徐勤枝周平坤

微丝相关蛋白HSPC300／hHBRK1与肌球蛋白Ⅵ相互作用的鉴定被引量：2: 2009年; 为鉴定微丝相关蛋白HSPC300/hHBRK1在肝脏组织的功能,采用GSTpull-down结合质谱技术,检测该蛋白在肝脏中的结合蛋白,结果提示,肌球蛋白Ⅵ与HSPC300/hHBRK1共沉降,Western印迹杂交证实了质谱的结果.构建HSPC300/hHBRK1原核表达载体,诱导并获得了His-hHBRK1融合蛋白.利用免疫共沉淀证实hHBRK1与肌球蛋白Ⅵ存在相互作用,激光共聚焦检测显示hHBRK1与肌球蛋白Ⅵ在肺癌95D细胞的胞浆共定位,提示其相互作用可能是直接结合.肌球蛋白Ⅵ参与细胞迁移、高尔基分泌泡的运输和维持高尔基体稳定性等作用.hHBRK1与肌球蛋白Ⅵ相互作用,为微丝相关蛋白HSPC300/hHBRK1参与细胞迁移和胞内物质运输提供了进一步佐证.; 祝敏虞红珍王豫汪思应徐勤枝周平坤; 关键词：微丝蛋白质相互作用

hHBrk1与WAVE1蛋白相互作用位点的鉴定被引量：1: 2011年; 目的:鉴定微丝相关蛋白hHBrk1与WAVE1的结合位点。方法:利用PCR的方法克隆人WAVE1及各结构域的基因片段,并将之亚克隆至真核表达载体;免疫共沉淀技术检测hHBrk1与WAVE1结合位点。结果:获得了WAVE1及各结构域基因的真核表达载体;免疫共沉淀发现hHBrk1与WAVE1的Scar同源结构域(SHD)结合,而WAVE1蛋白结合于hHBrk1的羧基端,羧基端七肽重复(HR)结构域点突变后获得的蛋白失去了与WAVE1的结合能力。结论:hHBrk1可能通过HR结构域与WAVE1的SHD区结合,参与WAVE1蛋白的细胞亚定位或维持其稳定性,从而调控肿瘤细胞的迁移。; 虞红珍祝敏王豫徐勤枝吴强周平坤

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