背景与目的:Δ133p53具有促进肿瘤细胞生长的作用,但具体作用机制尚不明确,本实验是采用5-FU-MKN45胃癌细胞系模型,观察p53异构体Δ133p53表达与p53基因下游MDM2、cyclin G1基因表达的相关性。方法:使用不同浓度5-FU(50μg/m L,100μg/m L)作用于人胃癌MKN45细胞系后,MTT法检测细胞抑制率,巢式逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR法)检测Δ133p53、MDM2及cyclin G1 m RNA的表达变化。组间差异用单因素方差分析,组内比较用t检验,两变量相关性用Pearson直线相关分析。结果:MTT结果显示,随着5-FU浓度增高以及作用时间的延长,细胞抑制率逐渐增加,4组实验中50μg/m L 5-FU作用于MKN45细胞24、48和78 h后抑制率平均值分别为41.10%、54.79%和68.48%,差异有统计学意义(F=45.52,P=0.00)。100μg/m L 5-FU作用于MKN45细胞24、48和78 h后抑制率平均值分别为69.53%、78.21%和86.92%,差异有统计学意义(F=85.58,P=0.00)。50和100μg/m L 5-FU作用于MKN45细胞24 h后抑制率分别为41.10%和69.53%,差异有统计学意义(F=51.29,P=0.00)。50和100μg/m L 5-FU作用于MKN45细胞48 h后抑制率分别为54.79%和78.21%,差异有统计学意义(F=51.29,P=0.00)。50和100μg/m L 5-FU作用于MKN45细胞72 h后抑制率分别为68.48%和86.82%,差异有统计学意义(F=104.91,P=0.00)。RT-PCR结果显示,随着5-FU浓度的增加,胃癌细胞系MKN45细胞中Δ133p53 m RNA、MDM2 m RNA和cyclin G1 m RNA表达量逐渐下降,组间差异具有统计学意义(F值分别为738.532、1 396.607和2 785.560,P=0.00)。相关性分析显示,Δ133p53 m RNA与MDM2 m RNA在胃癌中表达呈正相关(r=0.871,P=0.01),而cyclin G1 m RNA的表达与Δ133p53 m RNA没有明显的相关性(P=0.13)。结论:在5-FU-MKN45模型中,Δ133p53参与的5-FU的抗肿瘤途径与MDM2有关,与cyclin G1无关。
[目的]研究rmhTNF对胃癌细胞系MKN45的生物学效应及其机制。[方法]采用不同浓度（50、100、200IU/ml）重组改构人肿瘤坏死因子（rmhTNF）处理胃癌细胞MKN45,增殖/毒性检测试剂盒（CCK-8）观察其细胞增殖抑制率;实时荧光定量PCR（RT-PCR）法检测MKN45细胞p53异构体Δ133p53、STAT1及STAT3 m RNA的表达变化。[结果 ]CCK-8结果显示,随rmhTNF作用浓度增高（50、100、200IU/ml）,MKN45细胞抑制率分别为17.133%,24.800%和31.733%,差异有统计学意义（F=16.246,P〈0.01）。RT-PCR结果显示,随rmhTNF浓度增高,MKN45细胞STAT1 m RNA表达上升（F=164.290,P〈0.001）,STAT3、Δ133p53 m RNA表达下降（F=29.921,F=24.243;P均〈0.001）。Pearson相关性分析结果显示,Δ133p53与STAT1表达呈负相关（r=-0.951,P〈0.01）,与STAT3表达呈正相关（r=0.840,P〈0.01）。[结论 ]MKN45细胞中,Δ133p53是STAT1、STAT3调控肿瘤细胞的共同靶基因,STAT1、STAT3-Δ133p53-p53通路可能是rmhTNF抑制胃癌细胞MKN45的机制。
目的观察顺铂对人胃癌细胞系p53异构体Δ133p53、PTEN表达的影响。方法不同浓度顺铂作用于MKN45胃癌细胞系,采用MTT法检测细胞的抑制率;巢式逆转录多聚酶链反应(n RT-PCR)法检测p53异构体Δ133p53、PTEN m RNA水平的表达的变化。结果 MTT法检测结果示:MKN45胃癌细胞生长受到抑制,且抑制率随浓度、时间的增加而增加,与药物浓度为0μg/ml的对照组比较,顺铂能显著抑制MKN45胃癌细胞生长,且各组间差异均有统计学意义(P<0.01)。n RTPCR法检测结果显示:随着药物浓度增加,Δ133p53 m RNA表达呈减少趋势,PTEN m RNA表达显著增加。结论在顺铂诱导的人胃癌细胞系MKN45生长抑制实验中,PTEN表达增强可能是细胞生长抑制的重要机制之一,Δ133p53异构体表达减弱可能是PTEN表达增强的重要因素。
