国家科技重大专项(2009ZX10602)
- 作品数：3 被引量：13H指数：2
- 相关作者：曹建平沈玉娟张梦妍陈喜凯樊学军更多>>
- 相关机构：中国疾病预防控制中心四川出入境检验检疫局四川大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 我国隐孢子虫病的现状和防治对策被引量：3
- 2009年
- 隐孢子虫病是全球六大腹泻病之一，属新发传染病，是艾滋病患者死亡的主要病因之一。隐孢子虫卵囊污染水源、食物造成隐孢子虫病暴发，引起的腹泻在寄生虫性腹泻中占首位或次位，已成为重要的公共卫生问题。该病目前尚无特效治疗药物和预防疫苗，在我国各地普遍流行。该文就我国隐孢子虫病的现状和防治对策作一综述。
- 沈玉娟陈勤曹建平
- 关键词：隐孢子虫病
- 采用实时PCR技术比较不同方法提纯隐孢子虫卵囊DNA效果被引量：2
- 2009年
- 目的比较不同方法提纯隐孢子虫卵囊DNA的效果。方法将分离纯化的隐孢子虫卵囊分别加入美国Promega公司(简称Promega)和上海捷瑞公司(简称捷瑞)基因组DNA纯化试剂盒的裂解液、2%TritonX-100和5%异硫氰酸胍,同时联合使用冻融法、蛋白酶K法和声裂法裂解卵囊,用试剂盒法或Chelex-100法提纯卵囊基因组DNA,用实时PCR测定隐孢子虫卵囊囊壁蛋白(COWP)基因拷贝数,以Promega试剂盒为参照比较不同纯化方法的提纯效果。结果Promega试剂盒的裂解液裂解隐孢子虫卵囊的效果最好,纯化所得卵囊COWP基因拷贝数可达(6.45～9.86)×106;其他依次为捷瑞试剂盒的裂解液[(2.38～3.69)×106]、5%异硫氰酸胍[(1.27～21.29)×105]和2%TritonX-100[(2.06～866.70)×103]。冻融法+蛋白酶K法+声裂法提纯隐孢子虫卵囊DNA效果最佳,其次为冻融法+声裂法和蛋白酶K法+声裂法,冻融法+蛋白酶K法效果最差。结论冻融法+蛋白酶K法+声裂法联合使用能使卵囊DNA的提纯效率达到最大,捷瑞基因组DNA纯化试剂盒和5%异硫氰酸胍裂解法提纯隐孢子虫卵囊DNA可获得与Promega试剂盒相近的效果。
- 陈盛霞吴亮沈玉娟章秋霞李婷婷姜旭淦徐馀信曹建平
- 关键词：隐孢子虫卵囊实时PCRDNA提纯
- 成都地区婴幼儿腹泻轮状病毒的基因分型研究被引量：8
- 2011年
- 目的了解成都市婴幼儿轮状病毒的基因分型特点,以及流行优势毒株VP4基因核酸序列变异情况。方法收集2010年3月华西第二医院75份门诊婴幼儿腹泻标本,RT-PCR检测轮状病毒并进行G、P基因分型。据检测结果确定流行优势株,对两株优势株VP4基因进行T-A克隆和测序比对。结果 A组轮状病毒检出率为17.3%(13/75),其中G1型7株,G3型2株,4株未分型;P基因分型结果为P[8]型6株,P[4]型2株,P[10]型、P[6]型、P[9]型各1株,2株未分型;G/P组合结果以G1P[8]型为主,共5株;G1P[4]型,G3P[6]型各1株。VP4测序结果显示,两株优势株均为P[8]基因型,且毒株之间具有高度同源性(97%),与标准株之间同源性也达90%以上。结论 A组轮状病毒是成都地区2010年春季婴幼儿腹泻的重要病原之一,其血清型主要为G1型,流行优势株G/P组合为G1P[8]型。
- 廖虹瑜张梦妍陈喜凯陈智瑾樊学军裴晓方
- 关键词：A组轮状病毒RT-PCRVP4
