河北省科技支撑计划项目(07275552)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 相关作者：吴琛康现江郭晓丹徐东刚王嘉玺更多>>
- 相关机构：河北大学军事医学科学院青岛大学医学院附属医院更多>>
- 发文基金：河北省科技支撑计划项目河北省自然科学基金河北省教育厅科学技术研究计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 乙酰氨基半乳糖转移酶14多抗的制备及鉴定被引量：2
- 2011年
- 利用生物信息学方法分析乙酰氨基半乳糖转移酶14(GALNT14)蛋白序列,根据亲水性、抗原性、柔韧性及表面性等指标选择一段多肽序列作为抗原用于抗体制备。将该DNA片段插入pET-DsbA,构建原核表达载体pET-DsbA-GALNT14。用IPTG诱导表达蛋白,经镍柱纯化蛋白后免疫新西兰大白兔,获得GALNT14多克隆抗血清。用免疫扩散和免疫印迹检测抗体效价及特异性。结果显示,成功表达并纯化了目的蛋白。免疫动物后获得了效价较高、特异性强的GALNT14多克隆抗体,GALNT14蛋白在人乳腺癌和肾癌细胞株中均有表达。该结果为进一步研究GALNT14的功能及其在肿瘤发生发展的作用方面奠定了基础。
- 吴琛郭晓丹宋玉华张博马思思邓昊葛建峰李世奇徐强康现江
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- IGFBP-3在真核细胞中的分泌表达及功能分析被引量：3
- 2008年
- 将人胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)的cDNA片段亚克隆入pSectagA载体,构建真核分泌型表达载体pSectag-IGFBP3。采用脂质体转染的方法将真核表达载体转染人肾癌786-O细胞,转染48 h后用免疫印迹法检测IGFBP-3的表达状况;同时以Annexin V-EGFP/PI染色,流式细胞仪检测细胞凋亡率,观察分泌表达的IGFBP-3对宿主细胞的促凋亡作用。转染48h后,经Western blotting检测,在细胞培养上清中有分泌表达的IGFBP-3蛋白。流式细胞技术检测结果表明,表达产物可直接作用于宿主细胞,发挥促肿瘤细胞凋亡的作用。由此表明所构建的重组表达质粒pSectag-IGFBP3能在真核细胞水平正常表达并发挥生物学功能,为进一步探索IGFBP-3的作用机制奠定了基础。
- 吴琛单耀军邹民吉王嘉玺徐东刚
- 关键词：胰岛素样生长因子结合蛋白3诱导凋亡
- UDP-GalNAc:多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶-14被引量：5
- 2010年
- UDP-GalNAc:多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族(简称GalNAc-T)是黏蛋白O-糖基化的起始酶,N-乙酰氨基半乳糖转移酶-14(GalNAc-T14)是该家族中最新发现的成员。近年来有人指出,O-糖基化可能与肿瘤的发生发展具有密切关系,因此对N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族的研究也受到越来越多重视。本文主要综述了GalNAc-T14的命名、结构、分布、功能以及潜在的应用价值。
- 郭晓丹吴琛康现江
- 关键词：肿瘤发生
