国家自然科学基金(30771172)
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
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- 相关机构：南京师范大学扬州环境资源职业技术学院扬州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家基础科学人才培养基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 毛冠鹿SRY基因克隆及进化的研究被引量：1
- 2010年
- 利用赤麂SRY基因序列设计引物,通过PCR反应分别扩增出毛冠鹿、黑麂、小麂的SRY序列,并测得630 bp的碱基序列。麂属动物之间的序列差异为0.79%-1.90%,毛冠鹿属与麂属之间的序列差异为3.02%-3.97%。以牛SRY为外源,用NJ法和MP法进行毛冠鹿和麂属3种动物分子系统进化树的构建与分析,结果表明：麂属3种动物之间的分歧时间为79万-190万年,毛冠鹿与麂属动物间的分歧时间为302万-397万年,梅花鹿与麂属动物的分歧时间为349万-460万年。
- 罗红梅吴海清蒋华云徐春茂曹祥荣
- 关键词：毛冠鹿SRY基因系统进化
- 基于CHD基因序列分析的帝企鹅性别鉴定研究被引量：5
- 2010年
- [目的]分析帝企鹅(Aptenodytes forsteri)CHD基因序列,以鉴定性别。[方法]采用苯酚∶氯仿抽提法提取6只未知性别的帝企鹅血液中的基因组DNA,运用P2/P8引物扩增CHD基因片段,将PCR产物克隆到T-Vector,利用NCBI的Blast程序,以短趾鹰(Circaetus gal-licus)同源序列为比对参照,将帝企鹅CHD基因片段序列与GenBank中的基因片段序列进行同源性比较分析,鉴定帝企鹅的性别。[结果]测序结果表明,CHD-Z和CHD-W基因的PCR产物大小分别为378、387 bp,雌雄结果并不明显,不易区分开来。Blast比对结果表明,帝企鹅LD、EK、ZF为雄性,帝企鹅DG、YA、YY为雌性。[结论]结合PCR扩增和测序分析CHD基因,是单态性鸟类性别鉴定的有效和准确的方法。
- 沈玮潘少坤罗红梅刘伟朱标曹祥荣
- 关键词：帝企鹅CHD基因测序性别鉴定
- 毛冠鹿AIF-1原核载体的构建及表达
- 2014年
- 从毛冠鹿睾丸cDNA文库中筛选出毛冠鹿AIF-1基因,对其进行生物信息学分析,设计引物克隆毛冠鹿AIF-1 cDNA,连入pMD19-T载体,测序正确后酶切,与表达载体pET-28a(+)连接,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,将诱导表达重组蛋白的菌体超声破碎后,进行可溶性分析,并对可溶性蛋白进行纯化,SDSPAGE电泳,Western Blot分析以及鉴定重组蛋白.结果表明,毛冠鹿AIF-1(TdAIF-1)含有1个438bp的开放阅读框,编码145个氨基酸,经测序和酶切鉴定后,成功构建重组质粒pET-28a(+)-TdAIF-1,表达大小约20 kD的重组蛋白,主要以可溶形式存在,提高洗脱缓冲液中咪唑浓度至50 mmol/L、100 mmol/L能够得到较纯的蛋白.成功构建毛冠鹿AIF-1原核表达体系,获得重组蛋白,为研究AIF-1蛋白的生物学功能奠定了基础.
- 周楠楠杨振罗丽芸宋菲白敏曹祥荣
- 关键词：毛冠鹿原核表达
- 毛冠鹿基因组大小的研究被引量：4
- 2008年
- 以人基因组(2C=7.0 pg)为参照,利用流式细胞术,测定雄性和雌性毛冠鹿细胞中DNA含量,研究毛冠鹿基因大小。结果表明:雄性和雌性毛冠鹿细胞中DNA含量分别为4.962和4.971 pg;毛冠鹿基因组大小为2.43×109bp。毛冠鹿基因组虽大于麂亚科赤麂,但小于后从麂亚科中分离出的小麂,由此推测毛冠鹿已经过较长时间的独立进化。
- 王如平刘伟曹祥荣
- 关键词：毛冠鹿基因组流式细胞术
