国家大学生创新性实验计划(091055930)
- 作品数：5 被引量：32H指数：4
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- 疏肝健脾方药对NASH大鼠肝组织TLR4 mRNA及其蛋白表达的影响被引量：8
- 2013年
- 目的:观察疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病(NASH)大鼠肝组织TLR4 mRNA及蛋白表达的影响,探讨疏肝健脾方药抗大鼠NASH的作用机制。方法:SPF级雄性SD大鼠72只,随机分为正常对照组、模型组、疏肝高剂量组(9.6 g/kg柴胡疏肝散)、疏肝低剂量组(3.2 g/kg柴胡疏肝散)、健脾高剂量组(30 g/kg参苓白术散)、健脾低剂量组(10 g/kg参苓白术散)、合方高剂量组(39.6 g/kg柴胡疏肝散合参苓白术散)、合方低剂量组(13.2 g/kg柴胡疏肝散合参苓白术散),每组9只。采用高脂饲料(10 mL/kg)喂养建立NASH大鼠模型,16 w后各组大鼠以3%戊巴比妥钠腹腔麻醉,腹主动脉采血,全自动生化仪检测血脂、肝脂和肝功能;HE和油红O染色观察肝组织病理变化;Real time Q-PCR检测肝组织TLR4 mRNA表达水平;Western blot检测肝组织TLR4蛋白表达水平。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠肝细胞脂肪变性明显,肝细胞肿大,小叶内、汇管区炎细胞浸润,血清TC、LDL-C,肝组织TC、TG、肝组织TLR4 mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.01);与模型组比较,各用药组大鼠血脂、肝脂、肝组织TLR4 mRNA和蛋白表达均有不同程度降低(P<0.05或P<0.01),以高剂量作用最为显著。结论:疏肝健脾方药可能是通过下调TLR4 mRNA和蛋白表达水平发挥抗NASH的作用,TLR4可能是疏肝健脾方药抗NASH的有效靶点之一。疏肝健脾方药防治NASH可能存在一定的量效依赖关系。
- 杨钦河黄进张玉佩王强何秀敏冯高飞王文晶李哲华
- 关键词：非酒精性脂肪性肝炎疏肝健脾方药TOLL样受体4
- 疏肝健脾方药对NASH大鼠肝组织p38MAPK mRNA及蛋白表达的影响被引量：2
- 2013年
- 目的观察疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝组织p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)mRNA和蛋白表达的影响,探讨疏肝健脾方药抗NASH的作用机制。方法 72只SPF级SD雄性大鼠,适应性喂养1 w,随机分为8组。采用高脂饲料喂养建立NASH大鼠实验模型;造模同时,各用药组分别灌服高、低剂量的疏肝方、健脾方和疏肝健脾合方进行干预。16 w后处死大鼠,检测血脂、肝脂和肝功能;HE和油红O染色观察肝组织病理变化;RT-PCR和Western印迹检测肝组织p38MAPK mRNA和蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组肝小叶结构模糊,脂滴大量沉积,肝细胞肿胀,小叶内、汇管区炎细胞浸润。血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),肝组织TC、甘油三酯(TG)及p38MAPK mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,用药组大鼠血脂、肝脂、肝组织p38MAPK mRNA和蛋白表达有不同程度降低(P<0.05,P<0.01)。结论疏肝健脾方药能够下调肝组织p38MAPK mRNA和蛋白的表达水平,p38MAPK可能是疏肝健脾治法方药抗NASH的有效作用靶点之一。
- 王洪杨钦河何秀敏徐拥建张玉佩杨雪松韩莉冯高飞王文晶
- 关键词：P38丝裂原激活蛋白激酶疏肝健脾方药
- 疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织核因子-κB mRNA及蛋白表达的影响被引量：7
- 2013年
- 目的探讨疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝组织核因子(NF)-κB mRNA及蛋白表达的影响。方法采用高脂饲料喂养复制NASH大鼠实验模型,施以造模因素的同时,各用药组大鼠分别灌服疏肝方、健脾方和疏肝健脾合方的高、低剂量进行干预。16 w后,各组大鼠以3%戊巴比妥钠腹腔麻醉,腹主动脉采血,全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量,肝组织TC、TG含量;HE染色和油红O染色观察肝组织病理变化;实时定量PCR法检测肝组织NF-κB mRNA表达水平;Western印迹法检测肝组织NF-κB蛋白表达水平。结果与正常组相比,模型组大鼠肝细胞脂肪变性明显,血脂及肝脂均有不同程度的升高(P<0.05,P<0.01),大鼠肝组织NF-κB mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.01);与模型组相比,各用药组血脂和肝组织NF-κB mRNA及蛋白的表达均较模型组显著降低(P<0.05,P<0.01),尤以综合方高剂量及健脾高剂量作用最为显著。结论疏肝健脾方药对高脂饮食诱导的大鼠NASH有较好的防治作用,其机制可能与其下调肝脏NF-κB mRNA及蛋白的表达有关。
- 杨钦河闫海震张玉佩王强方梅霞韩莉王文晶冯高飞何秀敏黄进
- 关键词：非酒精性脂肪性肝炎疏肝健脾方药核转录因子ΚB
- 非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝细胞和库普弗细胞同时分离及鉴定被引量：10
- 2012年
- 目的建立一种稳定、高效、同时分离非酒精性脂肪性肝炎(nonalcohlic steatohepatitis,NASH)大鼠肝细胞(hepatocytes,HCs)和库普弗细胞(Kupffer cells,KCs)的新方法。方法采用离体循环灌注Ⅳ型胶原酶,低速离心获取HCs;差速离心、密度梯度离心和选择性贴壁获得KCs。用Typan blue染色和流式细胞术(FCM)分别进行活性和纯度鉴定。结果每只大鼠获得纯化的HCs[(4.0～4.5)×108]、KCs[(1.5～2.0)×107],经Typanblue染色活力均在95%以上,FCM检测纯度均在90%以上。结论此实验建立同时分离NASH大鼠HCs和KCs的方法高效、稳定,细胞数量和纯度都符合进一步实验的要求。
- 冯高飞杨钦河王文晶何秀敏张玉佩纪桂元李光秋赵亚凤沈灿宏杨晓蕾
- 关键词：非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝细胞库普弗细胞
- 疏肝健脾方药对NASH大鼠原代肝细胞NF-κB信号通路相关基因及蛋白表达的影响被引量：10
- 2013年
- 目的:探讨疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝细胞NF-κB信号通路相关基因及蛋白表达的影响。方法:将SD雄性大鼠随机分为8组:正常对照组、模型组、疏肝高/低剂量组、健脾高/低剂量组、合方高/低剂量组,每组15只。采用高脂饲料喂养复制大鼠NASH模型,16后检测肝脂、血脂,油红O和HE染色观察肝组织病理学变化。同时每组取6只采用离体循环灌注Ⅳ型胶原酶法分离肝细胞,Real time Q-PCR法Western blot法分别检测各组大鼠肝细胞IKKβ、NF-κB mRNA和蛋白及磷酸化IKKβ蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠肝细胞存在显著的脂质代谢紊乱;血清TC,肝脂及肝细胞IKKβ、NF-κB mRNA和蛋白表达及磷酸化IKKβ蛋白表达较正常对照组均显著升高(P<0.01);与模型组比较,健脾高剂量组、合方高剂量组大鼠肝细胞IKKβ、NF-κB mRNA表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01),各药物干预组大鼠肝细胞IKKβ、NF-κB及磷酸化IKKβ蛋白表达均显著下调(P<0.05或P<0.01),其中以健脾高剂量组、合方高剂量组下调趋势最为显著。结论:抑制肝细胞IKKβ/NF-κB信号通路相关基因及蛋白表达可能是疏肝健脾方药防治NASH的药理作用机制之一;上述蛋白可能是其药物作用的有效靶点。疏肝健脾方药对NASH的干预可能存在一定的量效关系。
- 杨钦河徐拥建冯高飞杨雪松韩莉张玉佩王洪
- 关键词：非酒精性脂肪性肝炎疏肝健脾方药核转录因子-ΚB原代肝细胞
