国家自然科学基金(81202235)
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
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- 相关机构：广州医科大学广州市第一人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 三氧化二砷对恶性转化细胞生长的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨三氧化二砷对反式苯并芘(anti-BPDE)恶性转化细胞生长的影响,揭示小分子核酸(miRNA)在三氧化二砷抑制anti-BPDE恶性转化细胞生长过程中的作用。方法用不同浓度的三氧化二砷处理恶性转化细胞16HBE-T;利用CCK8试剂及软琼脂克隆形成实验观察三氧化二砷对16HBE-T细胞增殖和克隆生长能力的影响;以miRNA基因芯片检测三氧化二砷处理后细胞中miRNA的表达差异。运用生物信息学工具分析差异表达miRNA的整体功能。结果 25μmol/L三氧化二砷明显抑制16HBE-T的细胞增殖(P<0.05);25μmol/L三氧化二砷明显降低16HBE-T细胞克隆形成(P<0.01)。三氧化二砷处理后,53个miRNA的表达发生改变:11个表达下调,42个表达上调。生物信息学分析这些差异表达miRNA可影响细胞周期和肿瘤生长相关的信号通路。结论三氧化二砷可抑制anti-BPDE恶性转化细胞生长,且这种作用可能与miRNA表达谱的改变有关。
- 张慧白洪波许继德刘国辉黄家明刘煜桐梁登攀韩志远
- 关键词：三氧化二砷增殖
- miR-622抑制肺癌细胞的生长
- 2014年
- 目的探讨miR-622对H460肺癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法利用脂质体瞬时转染方法将miR-622模拟物及其对照核苷酸转染至肺癌细胞内。miRNA定量试剂盒检测miR-622的表达。CCK-8试剂盒检测细胞增殖。生物信息学分析miR-622的靶点。蛋白印迹方法检测K-Ras蛋白的表达。构建含K-Ras mRNA的3'非翻译区的报告基因载体,检测萤火虫/Renilla荧光素酶活性。结果转染miR-622模拟物可提高miR-622的表达,并使H460和16HBE-T的细胞增殖率分别降至(58.60±4.27)%和(65.17±4.67)%,P均<0.01。生物信息学分析K-Ras为miR-622的一潜在靶点。转染miR-622模拟物可明显抑制K-Ras蛋白的表达。共转染miR-622模拟物和K-Ras-3'UTR报告基因,可使萤火虫/Renilla荧光素酶的活性降低至(60.22±2.50)%。结论 miR-622可通过负性调控靶点K-Ras抑制肺癌细胞的增殖。
- 张慧韩志远刘熤桐梁攀登黄家明
- 关键词：K-RAS肺癌细胞增殖
- 白藜芦醇抑制H460肺癌细胞的增殖作用研究被引量：8
- 2014年
- 目的探讨白藜芦醇对肺癌细胞H460增殖的影响,以探索小分子核酸miR-622在白藜芦醇抗癌中的作用。方法用不同浓度的白藜芦醇处理肺癌细胞H460,利用CCK8试剂盒检测细胞增殖,以miRNA定量试剂盒检测miR-622的表达水平。利用Lipofectamine 2000将miR-622模拟物、miR-622抑制剂及其相应对照转染进入H460细胞内。结果 50μmol/L白藜芦醇处理48 h即可使H460的细胞增殖明显降低至(49.77±1.33)%,差异有统计学意义(P<0.01)。50μmol/L白藜芦醇处理48 h后,miR-622的表达增高(13.48±2.16)倍,差异有统计学意义(P<0.01)。转染miR-622模拟物可显著提高miR-622的表达,明显使H460细胞的增殖率降低至(60.27±5.93)%,P<0.01。在白藜芦醇处理组中,转染miR-622抑制剂可明显降低miR-622的表达;与miR-622抑制剂对照组(51.67%±4.22%)相比,继而使H460细胞的增殖率增高恢复至(86.67±1.11)%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论白藜芦醇可抑制H460细胞的生长,且这种作用与miR-622的表达上调密切相关。
- 韩志远张慧杨巧媛
- 关键词：白藜芦醇肺癌增殖
- 三氧化二砷通过自噬作用抑制A549肺癌细胞的生长被引量：2
- 2013年
- 目的探讨三氧化二砷对肺癌细胞生长的影响,揭示三氧化二砷抗癌作用的机制。方法培养人肺癌细胞A549,给予不同药物浓度三氧化二砷药物处理;利用CCK8检测三氧化二砷对A549细胞活力的影响;以自噬试剂盒观测细胞的自噬情况。结果 10、25、50和100μmol/L三氧化二砷明显抑制A549的细胞活力(P<0.05)。三氧化二砷处理后镜下见阳性自噬细胞增多,自噬率增加。结论 AS2O3可抑制A549肺癌细胞生长,这种效应可能通过诱导细胞自噬来发挥作用。
- 张慧黄家明刘熤桐梁登攀韩志远
- 关键词：三氧化二砷自噬肺癌细胞增殖
- BAD与JNK协同调节UV诱导的细胞凋亡被引量：2
- 2015年
- JNK和BAD(bcl-2相关死亡启动子)都是参与细胞凋亡的重要调控蛋白.然而,二者在功能上的联系及其在细胞凋亡中的相互作用尚未见报导.本研究证明,BAD可作为JNK的磷酸化底物,与JNK相互作用,协同调节紫外线(UV)诱导的细胞凋亡.蛋白质印迹检测PARP(聚ADP核糖聚合酶)裂解,以及流式细胞术检测细胞凋亡结果揭示,UV诱导的MEF细胞凋亡依赖JNK的激酶活性.siRNA敲降BAD的蛋白表达,可增加MEF细胞对UV诱导的细胞凋亡的敏感性.UV处理的野生型MEF细胞抽提液(含JNK激酶活性)可催化GST-BAD底物发生磷酸化修饰,而UV未处理的细胞抽提液却不能.结果提示,UV激活的JNK活性可催化BAD磷酸化;体外合成的持续活化的JNK与GST-BAD体外共孵育结合质谱分析证明,JNK可催化BAD蛋白的Thr-201磷酸化.提示BAD是JNK的底物.此外,野生型和T201A突变的BAD质粒转染BAD-/-细胞结果显示,BAD的T201磷酸化可抑制JNK激酶活性及其底物c-Jun的磷酸化,提示BAD磷酸化对JNK具有负反馈调节作用.上述结果证明,BAD作为底物可被UV激活的JNK激酶磷酸化;磷酸化BAD反过来又可抑制JNK的激酶活性,负性调节细胞凋亡.综上所述,BAD与JNK能够相互影响,协同调控UV诱导的细胞凋亡.
- 陈敏史薇赵俊韩志远
- 关键词：细胞凋亡JNK信号通路
