“十一五”国家科技支撑计划(2006BAI06B04)
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
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- 叔丁基对苯二酚对Chang肝细胞无机砷甲基化代谢的影响被引量：1
- 2011年
- 目的探讨叔丁基对苯二酚(tert-butylhydroquinone,tBHQ)对Chang肝细胞无机砷甲基化代谢的影响。方法将Chang肝细胞密度调整为1×105个/ml,采用25μmol/L tBHQ溶液预处理24 h后,再用5μmol/L的tBHQ溶液和0.1、0.5、1.0和5.0μmol/L亚砷酸钠溶液联合染毒24 h;并采用0.1、0.5、1.0和5.0μmol/L亚砷酸钠溶液单独染毒24 h;并设溶剂对照(三蒸水)。采用超低温捕集-氢化物发生-原子吸收分光光度法分别测定细胞内和培养液中的无机砷(inorganicarsenic,iAs)、一甲基砷(monomethylated arsenic,MMA)和二甲基砷(dimethylated arsenic,DMA)含量,并计算一甲基化率(primary methylation index,PMI)和二甲基化率(secondary methylation index,SMI)。结果随着亚砷酸钠染毒剂量的增加,亚砷酸钠单独染毒组和tBHQ+亚砷酸钠染毒组Chang肝细胞内tAs和iAs含量及Chang肝细胞和培养液中的总MMA含量均升高;亚砷酸钠单独染毒组细胞+培养液总DMA含量之间无差异;tBHQ+亚砷酸钠染毒组细胞+培养液总DMA含量呈上升趋势;0.5μmol/L亚砷酸钠单独染毒组和tBHQ+亚砷酸钠染毒组细胞+培养液中的PMI最高,然后随着亚砷酸钠染毒浓度的升高而逐渐降低;亚砷酸钠单独染毒组细胞+培养液中的SMI呈逐渐降低,而tBHQ+亚砷酸钠染毒组细胞+培养液中的SMI呈逐渐升高趋势。此外,与相同浓度的亚砷酸钠单独染毒组比较,tBHQ+0.5,1.0、5.0μmol/L亚砷酸钠染毒组Chang肝细胞内的tAs和iAs含量较低(P<0.05),而细胞+培养液中总DMA含量、PMI和SMI则较高(P<0.05)。结论高浓度砷暴露能够抑制砷的二甲基化过程;而tBHQ预处理能够增加砷的甲基化代谢,降低肝细胞内砷含量,从而增强Chang肝细胞对无机砷暴露的解毒能力。
- 李冰李昕朱博刘博莹王达刘丹邢晓越孙贵范
- 关键词：叔丁基对苯二酚无机砷甲基化
- 无机砷对Chang肝细胞核转录因子Nrf2及其下游抗氧化酶mRNA表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的观察亚砷酸钠(NaAsO2)对Chang肝细胞株核转录因子Nrf2及Nrf2调控的下游抗氧化酶醌氧化还原酶1(NQO1)和血红素单加氧酶-1(HO-1)mRNA表达的影响。方法分别以不同浓度NaAsO2(5、10、25和50μmol/L)染毒人类Chang肝细胞株6h,采用RT-PCR法测定Nrf2、NQO1和HO-1的mRNA表达水平。结果 5、10、25和50μmol/L NaAsO2暴露6h,Nrf2的mRNA表达分别为对照组的(100.74±3.70)%、(105.96±1.75)%、(101.76±1.01)%和(101.81±6.33)%,与对照组比较,差异未见统计学意义(P>0.05);各暴露组NQO1的mRNA表达均较对照组相比显著增加(P<0.05),分别为对照组的(106.52±3.11)%、(113.27±2.84)%、(111.96±6.96)%和(107.33±2.76)%;NaAsO2暴露还能够显著诱导HO-1的mRNA表达增强,且具有剂量-效应关系,差异具有统计学意义(P<0.01)。5、10、25和50μmol/L NaAsO2暴露,HO-1的mRNA表达分别为对照组的(186.92±1.75)%、(194.08±2.75)%、(196.93±2.55)%和(200.02±0.83)%。结论无机砷暴露未显著增强Chang肝细胞核转录因子Nrf2的转录,却能够显著提高Nrf2调控的下游抗氧化酶NQO1和HO-1的mRNA表达水平。
- 李冰李昕张新玉朱博刘丹邢晓越王欣马莹孙贵范
- 关键词：砷亚砷酸钠肝细胞
- 无机砷对红系相关因子-2及其抑制因子mRNA表达的影响
- 2011年
- 目的观察亚砷酸钠(NaAsO2,sodium arsenite)对Chang肝细胞株核转录因子红系相关因子(nuclear factor ery-throid 2-related factor 2,Nrf2)及其胞浆抑制因子Keap1(Kelch-like ECH-associated protein 1)的mRNA表达水平的影响。方法分别以不同浓度NaAsO2(0、50、200、400μmol/L)暴露人类Chang肝细胞株12 h,采用AlamarBlue法测定细胞增殖活性,采用RT-PCR法测定Nrf2和Keap1的mRNA表达水平。结果 50μmol/L NaAsO2暴露组的细胞增殖活性与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),而200μmol/L和400μmol/L NaAsO2暴露组的细胞增殖活性均显著低于对照组(P<0.05);50、200、400μmol/L的NaAsO2暴露12 h,Nrf2和Keap1的mRNA表达水平与对照组比较均显著下降(P<0.05),且呈剂量-反应关系。结论高浓度无机砷暴露能抑制Chang肝细胞株Nrf2和Keap1的mRNA表达水平,并可能与无机砷造成机体的高氧化应激水平有关。
- 李冰李昕刘丹邢晓越王欣孙贵范
- 关键词：亚砷酸钠NRF2KEAP1
- 无机砷对Chang肝细胞株血红素单加氧酶-1 mRNA和蛋白表达的诱导作用被引量：1
- 2011年
- [目的]观察亚砷酸钠(sodium arsenite,NaAsO_2)对Chang肝细胞株血红素单加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)mRNA和蛋白表达的诱导作用。[方法]以5μmol/L和10μmol/L的NaAsO_2作用Chang肝细胞株2、6、12h和24h,分别用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和WesternBlot法检测细胞内HO-1的mRNA和蛋白表达情况。[结果]5μmol/L和10μmol/L NaAsO_2暴露2h开始出现HO-1 mRNA的诱导表达;6h的表达水平明显高于对照组和2h暴露组(P<0.01)。其中,10μmol/LNaAsO_2暴露12h和24h的mRNA表达均明显高于该浓度的6h暴露组(P<0.01);但24h的HO-1 mRNA表达水平与12h组相比没有明显升高。NaAsO_2暴露诱导的HO-1蛋白表达则从6h开始出现,12h组明显高于6h组,24h组明显高于12h组(均P<0.01);5μmol/L和10μmol/L NaAsO_2分别暴露6、12h和24h的HO-1蛋白表达量分别是对照组的2.80、9.34、18.15和3.97、12.92、23.29倍;此外,10μmol/L NaAsO_2暴露12h和24h的HO-1mRNA和蛋白表达均明显高于对应时间的5μmol/L组(P<0.01)。[结论]NaAsO_2暴露能够有效和持续性诱导Chang肝细胞株HO-1的mRNA和蛋白表达,是无机砷暴露的一种细胞保护性适应性反应。
- 李冰李昕朱博张新玉刘丹邢晓越王欣张琪孙贵范
- 关键词：亚砷酸钠
