将大肠杆菌(E.coliK12)S-腺苷甲硫氨酸合成酶(SAMS)基因克隆至质粒pBR322中,获得的重组质粒pBR322-SAMS转入大肠杆菌JM109菌株,构建了能高效组成型表达SAMS的重组菌E.coliJM109(pBR322-SAMS)。将重组大肠杆菌破碎后上清液经20%～40%硫酸铵分级盐析、Phenyl-Sepharose Fast Flow疏水层析和Q-Sepharose Fast Flow离子交换层析,即可得到纯度提高5倍,比活为48.7μ/mg的SAMS,三步纯化的总回收率为62%,纯度达到92%。SAMS表达量为1176μ/L,占到菌体可溶性总蛋白的20%。重组酶的最适反应pH为8.5,4℃下在pH7.5的缓冲液中保温10h酶活性几乎不改变。重组酶反应的最适温度为55℃,酶活性稳定的温度范围为20～35℃。重组酶的KmL-Met为0.22mmol/L,VmaxL-Met为1.07mmol/(L.h),KmATP为0.52mmol/L,VmaxATP为1.05mmol/(L.h)。
