哈尔滨市科技攻关计划项目(2007AA6CN032)
- 作品数:9 被引量:38H指数:3
- 相关作者:葛菁萍凌宏志平文祥蔡柏岩江云飞更多>>
- 相关机构:黑龙江大学黑龙江东方学院教育部更多>>
- 发文基金:哈尔滨市科技攻关计划项目黑龙江省博士后基金黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 大麻沤麻液细菌种群多样性被引量:2
- 2010年
- 从分子水平分析大麻沤麻液中细菌种类及其优势菌群,为筛选出大麻微生物脱胶的生产菌种奠定基础。采用PCR-DGGE技术研究大麻沤麻液中细菌种群的多样性及动态变化,使用Gel-Pro Analyzer 4.5软件分析DGGE指纹图谱,并对优势条带进行分析。结果表明:从发酵初期过渡到主发酵期细菌种群多样性上升,群落演替迅速,从主发酵期进入到发酵末期,细菌种群多样性下降,群落演替缓慢;在整个发酵过程中,细菌种群多样性指数在发酵中期(72h)达到高峰,说明发酵中期细菌种群数量、优势菌群种类达到了最高值,发酵初期和末期以不可培养细菌为主,主发酵期以成团泛菌属为主。
- 蔡柏岩江云飞葛菁萍接伟光
- 关键词:大麻细菌种群多样性
- 大麻脱胶功能菌株在沤麻中的应用被引量:2
- 2012年
- 将实验室自行分离的功能菌株HDDMM02、HDDMG05培养至最大产酶时期后用于大麻(Cannabissativa)脱胶沤麻,并对大麻纤维化学成分进行测定。结果显示两种菌株最佳的接种量为麻原料体积的0.5%,尿素和NaCl的最佳添加量均为1.0 g/L。在此条件下进行中试,对麻纤维各项指标进行检测。结果表明加菌沤制麻纤维的平均出麻率比正常沤制时增加了1.45个百分点,平均强度提高了23.67 N,断裂比强度提高了0.21 cN/dtex,麻束有效强度伸长了0.16 m。扫描电镜图片显示加菌沤麻纤维脱胶完全且粘附在纤维表面,单纤维已基本游离出来。
- 于文杰王贵宾韩洁接伟光葛菁萍蔡柏岩
- 大麻沤麻液中细菌的分离和鉴定被引量:3
- 2008年
- 为了解大麻沤麻液中细菌菌群构成,确立麻液分离菌的种属地位,本研究以大麻原茎沤麻液为菌种筛选的来源,利用传统可培养法分离得到24株细菌,并通过16S rDNA序列与细菌菌落形态、菌体的显微形态鉴定、生理生化鉴定相结合的方法对菌株进行鉴定,同时构建24株分离细菌与常规已知菌的系统发育树,初步确立菌株种属地位。研究结果表明:24株细菌共分11属,15种,其中主要以芽孢杆菌属居多,占25%,包括巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium),蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)和炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis)。另有其他菌属,如宋内志贺菌(Shigella sonnei),大肠埃希氏菌(Escherichia coli),吉氏库特氏菌(Kurthia gibsoni-i),肺炎克雷伯氏菌臭鼻亚种(Klebsiella pneumoniae subsp.)等。
- 江云飞凌宏志蔡柏岩平文祥葛菁萍
- 关键词:大麻细菌RDNA系统发育
- 响应面法优化大麻果胶酶产生菌发酵培养基被引量:3
- 2009年
- 果胶酶是影响大麻脱胶的关键酶,应用果胶酶可以降低脱胶成本,提高精干麻的制成率和梳成率,为了使自行分离得到的菌株HDDMG05获得较高水平的产酶能力,优化了此菌株产果胶酶发酵培养基的条件。本项研究主要采用Plackett-Burman(PB)法和响应面分析方法(RSM),对培养基的橘皮粉、酵母提取物、硫酸铵、pH值和NaCl等因素进行优化。结果表明:培养基在橘皮粉16.1%、酵母提取物0.2%、硫酸铵0%、pH值4.98、NaCl0.5%、K2HPO4 0.05%、MgSO4.7H2O 0.01%时,菌株HDDMG05可以获得8100U/mL的最大产酶量。采用基于响应面分析方法能够较大地提高菌株产酶能力。
- 蔡柏岩王贵宾葛菁萍凌宏志平文祥
- 关键词:大麻果胶酶PLACKETT-BURMAN响应面法
- β-甘露聚糖酶产生菌HDYM-04的分离鉴定及产酶条件优化被引量:5
- 2009年
- 从实验室温水沤麻液中分离并筛选到了一株产β-甘露聚糖酶的细菌HDYM-04,经生理生化实验及16SrDNA序列分析鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。研究HDYM-04菌株72h连续发酵过程中产酶及生长的动态变化,通过单因素及序贯正交试验优化得到其摇瓶发酵产酶的最佳培养基组分及条件:碳源60g/L魔芋粉、氮源30g/L蛋白胨、MgSO4·7H2O0.2g/L、K2HPO45g/L、初始pH8.0、装液量60ml/250ml三角瓶、接种量2%、37℃振荡培养48h。在研究条件下发酵液酶活力为4890U/ml,比优化前提高了3.2倍。
- 葛菁萍赵丹宋刚凌宏志平文祥
- 关键词:Β-甘露聚糖酶正交试验
- 亚麻温水脱胶液中细菌菌群结构分析被引量:1
- 2009年
- 为了探讨实验室条件下模拟的工厂亚麻温水脱胶液中细菌菌群结构,采用纯培养技术和PCR-DGGE技术(Denaturing gradient gel electrophoresis)对细菌菌群结构进行了研究.用纯培养方法分离获得9类菌落,其中假单胞菌属(Pseudomonas)在有氧培养条件下总是处于优势.梭菌属(Clostridium)在厌氧培养过程中总是处于优势.微球菌属(Micrococcus)和葡萄球菌属(Staphylococcus)只有亚麻脱胶初期才有发现.PCR-DGGE指纹图谱显示,亚麻温水脱胶过程中条带数量较少且没有明显种群群落结构演替过程.通过对不同时期沤麻液中16S rDNA V3片段PCR产物d、e两个DGGE条带进行分子克隆、序列测定和Blast分析,发现e条带包含的16S rDNA V3片段除e_35外均属于假单胞菌属.d条带包含着较多不同的16S rDNA V3片段,其中有传统方法没有分离到的泛菌属(Pantoea)细菌、一些NCBI未收录的序列及一些非可培养微生物序列.纯培养技术和PCR-DGGE技术的共同使用,可以更全面准确地提供细菌多样性方面的信息.
- 凌宏志葛菁萍魏薇平文祥
- 关键词:亚麻细菌多样性
- 沤麻系统中一株甘露聚糖酶产生菌产酶条件的优化被引量:5
- 2008年
- 从实验室温水沤麻液中分离到了一株产甘露聚糖酶(mannanase)的芽孢杆菌HDYM-03菌株,经生理生化试验及16S rDNA序列分析鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。研究了菌株72 h连续发酵过程中产酶及生长的动态变化,通过单因素及正交实验优化得到其实验室最优产酶条件为:碳源6%魔芋粉,氮源3%蛋白胨,初始pH值8.0,装液量100mL/250mL三角瓶,接种量2%,37℃振荡培养48 h。在研究条件下发酵液酶活力为5 122 U/mL,比优化前提高了2.1倍。
- 平文祥葛菁萍赵丹凌宏志
- 关键词:甘露聚糖酶RDNA正交试验
- PCR-DGGE技术在细菌多样性研究中的条件优化被引量:16
- 2009年
- 基于聚合酶链式反应的变性梯度凝胶电泳(Polymerase chain reaction denaturing gradient gel electrophoresis,PCR-DGGE)技术作为研究微生物物种多样性和动态变化的分子检测工具之一,具有可靠性强、重复性好、方便快捷等优点。该技术无需传统的微生物分离培养,便能快速、准确地获取复杂样品中微生物的菌群多样性、动态性及其功能菌的遗传信息,被广泛用于环境生态学的研究中。该文概述了PCR-DGGE技术的基本原理,并对该技术的各个环节如DNA提取、PCR扩增、DGGE条件以及图谱染色等条件的优化进行探讨,提出可能出现的影响因素,并对该技术自身存在的局限性和应用前景进行了评价。
- 江云飞蔡柏岩
- 关键词:细菌PCR-DGGE
- 果胶酶产生菌HDYM-02发酵条件的研究被引量:3
- 2010年
- 由巴彦县亚麻有限公司沤麻池中分离选育得到一株果胶酶产生菌,命名为HDYM-02,通过对其进行生理生化、16srDNA序列分析及系统发育研究,初步鉴定该菌株为蜡状芽孢杆菌。对菌株HDYM-02进行发酵条件的单因子试验,结果表明,当发酵温度为33℃,发酵氮源选用尿素,发酵液初始pH值为7.0,NaCl浓度为0.5%~0.7%时,菌株HDYM-02分解果胶能力较强;对发酵产还原糖影响较大的三个因素,即发酵温度、尿素含量、发酵液初始pH值进行L9(33)的正交试验,结果表明发酵温度为35℃,尿素浓度为0.5%,发酵初始pH值为6.5时,菌株HDYM-02分解果胶能力较强。
- 平文祥赵丹宋刚葛菁萍凌宏志
- 关键词:果胶还原糖发酵