国家自然科学基金(30871205)
- 作品数：4 被引量：20H指数：3
- 相关作者：林帆林苗赵海燕罗敏傅雪莲更多>>
- 相关机构：福建省立医院上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省卫生厅青年科研基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 检测线粒体通透性转换孔道评价胰岛β细胞线粒体功能被引量：2
- 2011年
- 目的评价高糖高脂作用下胰岛β细胞线粒体功能损害情况。方法分别于5.6 mmol/L和25mmol/L葡萄糖中加入0.4 mmol/L软脂酸,培养胰岛β细胞株INS-1细胞24 h,通过荧光染色,利用流式细胞技术和荧光显微镜检测线粒体通透性转换孔道(mPTP)、线粒体膜电位和活性氧(ROS)的改变,了解β细胞线粒体功能损害情况。以溴脱氧尿核苷掺入法测定细胞增殖情况,以Annexin V法测定细胞凋亡情况。结果在给予25mmol/L葡萄糖干预后,mPTP活性下降,线粒体膜电位升高,细胞增殖增加(均为P<0.05),ROS生成未见明显增多;给予25 mmol/L葡萄糖+0.4 mmol/L软脂酸后,mPTP活性和线粒体膜电位均下降,细胞凋亡增多、增殖减少(均为P<0.05),ROS生成增多。结论高糖作用使INS-1细胞mPTP活性下降、线粒体膜电位升高,提示细胞可能处于一种高代谢的不稳定状态;mPTP的检测有助于更全面地认识细胞糖毒性作用下的线粒体功能改变。
- 林帆张宏利王晓罗敏
- 关键词：线粒体胰岛通透性流式细胞术
- 高脂饮食诱导肥胖大鼠模型的实验研究被引量：7
- 2009年
- 目的建立营养性肥胖大鼠动物模型。方法雄性SD大鼠50只随机分成高脂饮食组和普通饮食组,于喂养第12周时测大鼠体重、血脂、空腹胰岛素、葡萄糖耐量、胰岛素耐量,于第16周留尿测定微量白蛋白和肌酐,留取肾周和附睾脂肪称重,分离大鼠胰岛进行体外培养,测定胰岛及单个细胞直径。结果与对照组相比,高脂组大鼠体重、肾周及附睾脂肪含量、血脂、空腹胰岛素水平以及尿白蛋白的排出均明显升高,存在糖耐量减低、胰岛素抵抗。高脂组大鼠中直径大于200μm的大胰岛比例增多,胰岛细胞数目增多。结论建立的肥胖大鼠模型较接近成年人肥胖症的病理生理改变,可作为肥胖及相关疾病的研究平台。
- 林帆钱镭林苗王晓罗敏
- 关键词：肥胖动物模型胰岛蛋白尿
- 高糖对胰岛β细胞增殖活力、分泌功能及内质网应激相关分子表达的影响被引量：8
- 2009年
- 目的研究持续高糖刺激对胰岛β细胞株MIN6增殖活力、分泌功能及内质网应激相关分子表达的影响。方法将不同浓度葡萄糖(5.6、25和33.3 mmol/L组)分别加入胰岛β细胞株MIN6培养液中,于不同时间点(24 h和96 h)收集细胞进行相关检测。CCK-8法检测细胞增殖活力;ELISA法检测胰岛素和胰岛素原分泌能力;Real-time PCR和Western blotting分别检测内质网应激相关分子Total XBP-1、Spliced XBP-1 mRNA及磷酸化IRE1α蛋白的表达。结果加入葡萄糖后96 h,各组细胞增殖活力均显著低于孵育后24 h;在同一时间点,33.3 mmol/L组和25 mmol/L组显著低于5.6 mmol/L组(均P<0.05)。加入葡萄糖后96 h,33.3 mmol/L组胰岛素分泌较干预后24 h明显减少,而胰岛素原分泌显著增加(均P<0.05)。加入葡萄糖后24 h和96 h的各组Spliced XBP-1 mRNA表达,以及加入葡萄糖后96 h的各组Total XBP-1 mRNA和磷酸化IRE1α蛋白表达,均随葡萄糖浓度的增加而上调(P<0.05),呈现浓度依赖性。结论持续性高糖可使胰岛β细胞的增殖活力下降、分泌功能受损及内质网应激相关分子表达增加,而后者可能是导致葡萄糖毒性的原因之一。
- 赵海燕钱镭傅雪莲林帆张宏利王晓李果罗敏
- 关键词：内质网应激细胞增殖分泌功能胰岛Β细胞
- 肥胖大鼠足细胞Nephrin、Podocin、Podoplanin的表达被引量：3
- 2009年
- 目的探讨肥胖对肾小球足细胞的损害。方法以高脂喂养SD大鼠16周建立肥胖动物模型,检测尿肌酐及尿微量白蛋白,透射电镜观测肾小球足细胞的形态,抽提肾皮质总RNA并逆转录,采用荧光实时定量PCR法测定足细胞相关标志物mRNA表达。结果与对照组相比,高脂诱导肥胖组大鼠体质量、血脂、空腹胰岛素、空腹及糖耐量后血糖、尿微量白蛋白/尿肌酐比值均明显升高,透射电镜可见肥胖组出现足突融合现象,足细胞相关标志物Nephrin、Podocin、Podoplanin mRNA的表达量在肥胖组明显升高,而SPARC、Podocalyxin、αActi-nin-4、P27在两组间差别无统计学意义。结论高脂喂养SD大鼠16周的肥胖模型中已出现微量白蛋白尿、足突融合以及足细胞裂孔隔膜蛋白、表面阴性电荷蛋白mRNA表达量改变。
- 林帆罗敏林苗
- 关键词：淋巴管生成膜蛋白质类
