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浙江省自然科学基金(Y2080949)

作品数:5 被引量:5H指数:2
相关作者:张旭夏君慧翁益云李佳张国勇更多>>
相关机构:温州医学院附属第一医院浙江大学医学院附属第二医院更多>>
发文基金:浙江省自然科学基金温州市科技局资助项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 5篇医药卫生

主题

  • 4篇细胞
  • 4篇脑脊髓
  • 4篇脑脊髓炎
  • 4篇脊髓炎
  • 3篇免疫
  • 2篇蛋白
  • 2篇调节性
  • 2篇多发
  • 2篇多发性
  • 2篇多发性硬化
  • 2篇少突胶质细胞
  • 2篇实验性变态反...
  • 2篇实验性自身免...
  • 2篇髓鞘
  • 2篇髓鞘少突胶质...
  • 2篇糖蛋白
  • 2篇自身免疫
  • 2篇自身免疫性
  • 2篇免疫性
  • 2篇节性

机构

  • 5篇温州医学院附...
  • 1篇浙江大学医学...

作者

  • 5篇张旭
  • 3篇翁益云
  • 3篇夏君慧
  • 2篇张国勇
  • 2篇李佳
  • 1篇叶好好
  • 1篇邓艳
  • 1篇王婷婷
  • 1篇鲍剑虹
  • 1篇叶强
  • 1篇厉向
  • 1篇杨得奖

传媒

  • 2篇中国病理生理...
  • 1篇中国免疫学杂...
  • 1篇中华微生物学...
  • 1篇浙江医学

年份

  • 2篇2011
  • 3篇2010
5 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
嗅鞘细胞移植对大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的影响被引量:2
2010年
目的:探索嗅鞘细胞移植实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠的移植途径、可行的移植时间窗,移植后的迁移特性以及发挥保护作用的可能机制。方法:分别采用豚鼠脊髓匀浆(GPSCH)与MOGIgd融合蛋白免疫Lewis大鼠,制作EAE模型;每组发病大鼠分别归入:MOG组和GPSCH组。MOG组分为:OECs空白对照组(MOG0组)4只、OECs尾静脉移植组(MOG1组)7只、OECs侧脑室移植组(MOG2组)4只;GPSCH组分为:OECs空白对照组(GPSCH0组)4只、OECs尾静脉移植组(GPSCH1组)4只。发病高峰期,按照实验分组,分别采用立体定向侧脑室细胞移植和尾静脉细胞移植,观察移植后大鼠的临床症状;移植后2周观察OECs在大鼠体内的分布情况及组织病理学方面的缓解情况。结果:OECs分别经尾静脉、侧脑室移植后,EAE大鼠症状改善,与空白对照组神经功能评分峰差值比较有显著差异(F=18.470,P<0.01;t=-7.147,P<0.01),MOG1组和MOG2组评分峰差值间无显著差异(P>0.05);Hoechst33342示踪证实了OECs能在大鼠体内存活及强大的迁移能力;OECs经尾静脉移植后,可以透过破坏的血脑屏障进入脑内,分布于软脑膜和病灶周围;经侧脑室移植的嗅鞘细胞,向病灶局部广泛迁移;组织病理学评分(HE染色和Luxol fast blue髓鞘染色),移植组与未移植组间无显著差异(P>0.05),2种途径移植组间亦无显著差异(P>0.05)。结论:纯化培养的成年大鼠嗅球嗅鞘细胞分别经尾静脉和侧脑室移植EAE大鼠,均可缓解发病大鼠的症状。
杨得奖叶强王婷婷李佳张旭
关键词:脑脊髓炎实验性自身免疫性嗅鞘细胞细胞移植
C57BL/6小鼠EAE模型的建立及Foxp3、CD4+CD25+调节性T细胞检测
2010年
目的以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白细胞外免疫球蛋白样结构域(MOG驯)为抗原免疫C57BL/6小鼠,建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型,并检测CIM+CD25+T细胞、Foxp3mRNA等指标的表达。方法采用分子克隆技术诱导表达MOGlgd-TrxA融合蛋白,纯化后以此融合蛋白为抗原于侧腹壁皮下多点注射免疫C57BL/6小鼠作为实验组(MOG组);同时以硫氧还蛋白(TrxA)、豚鼠脊髓匀浆(GPSCH)、生理盐水免疫小鼠分别作为阴性、阳性及正常对照组。双盲法连续早晚观察30d,通过评估动物的临床神经功能、组织病理(HE染色和Kltiver.Barrera法髓鞘染色、免疫组化法)情况,评价模型的质量。流式细胞仪(FACS)检测小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞;real—timePCR检测Foxp3mRNA的相对表达水平,并分析两者相关性。结果MOG组及GPSCH组小鼠均呈慢性非缓解型病程,两组在发病时问、达峰时间、临床神经功能评分等方面差异均无统计学意义(P〉0.05)。TrxA组及正常对照组无一动物发病。模型组(包括MOG组和GPSCH组)动物HE染色可见血管周围炎性细胞浸润,胶质结节形成,髓鞘染色可见斑片状髓鞘脱失,大脑、小脑、脑干和脊髓均有不同程度受累。免疫组化定性和半定量分析显示MOG组和GPSCH组病灶周围炎症浸润处AQP-4表达与TrxA组相比明显增高(P〈0.05);MOG组CIM+CD25+T细胞占CIM+T细胞比例为(4.71±1.61)%,GPSCH组为(1.44±0.65)%,均明显低于TrxA组和正常对照组(P〈0.01),且MOG组和GPSCH组之间的差异亦具有统计学意义(P〈0.01)。MOG组标准化Foxp3mRNA的表达量为2.26±1.97,GPSCH组为1.44±1.20,均低于TrxA组的8.58±3.34(P〈0.01);但MOG组和GPSCH组间的差异无统计学意义(P〉0.05)。相关性分析显示,模型组小鼠CIM+CD25+调节性T细胞与roxp3mRNA表达水平
翁益云夏君慧鲍剑虹张国勇张旭
关键词:髓鞘少突胶质细胞糖蛋白水通道蛋白-4FOXP3CD4+CD25+调节性T细胞
重组人髓鞘少突胶质细胞糖蛋白的表达、纯化及免疫原性被引量:3
2011年
目的:建立人少突胶质细胞糖蛋白细胞外Ig样结构域(MOGIgd)的硫氧还蛋白(TrxA)融合表达系统,探讨表达产物MOGIgd-TrxA融合蛋白的免疫原性。方法:(1)应用RT-PCR方法,以人脑组织的总RNA为模板扩增出编码MOGIgd的cDNA序列,将MOGIgd cDNA克隆到TrxA融合表达载体pET32a(+)中,重组质粒pET32a-MOGIgd经表型筛选、酶切鉴定及测序鉴定后,转化至BL21(DEB)trxB-宿主菌中经异丙硫代钠-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并通过金属鳌合亲和层析柱进行纯化。(2)C57BL/6小鼠分为MOGIgd-TrxA组(MOG组)、硫氧还蛋白组(TrxA组)及正常对照组(NC组),12只/组,各组以相应抗原乳剂免疫小鼠制作实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型后观察其临床神经功能和组织病理学改变(HE染色和髓鞘Luxol fast blue染色)评价模型质量。结果:(1)成功获取高产量32 kD MOGIgd-TrxA融合蛋白,以包涵体形式表达,纯化后纯度达95%左右。(2)MOG组小鼠75%(9/12)发病,于免疫后第(12.14±2.04)d发病,呈慢性非缓解型病程;发病动物组织切片HE染色和髓鞘染色显示不同程度炎性细胞浸润和髓鞘脱失。结论:成功建立人MOGIgd的TrxA融合表达系统,表达产物MOGIgd-TrxA融合蛋白可作为免疫原诱导EAE动物模型。
夏君慧翁益云李佳张旭
关键词:多发性硬化
实验性变态反应性脑脊髓炎AQP-4、CD4^+CD25^+调节性T细胞研究
2010年
目的:以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白细胞外免疫球蛋白样结构域(MOGIgd)为抗原免疫C57BL/6小鼠,建立EAE模型,并检测AQP-4、CD4+CD25+T细胞的表达水平。方法:①采用分子克隆技术诱导表达MOGIgd-TrxA融合蛋白,纯化后以此融合蛋白为抗原于侧腹壁皮下多点注射免疫C57BL/6小鼠作为实验组(MOG组);同时以硫氧还蛋白(TrxA)、豚鼠脊髓匀浆(GPSCH)免疫小鼠分别作为阴性、阳性组。评估动物的临床神经功能、组织病理情况,评价模型的质量。②免疫组化法、荧光定量PCR技术测定AQP-4表达水平;经流式细胞仪(FACS)检测小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞。结果:①MOG组及GP-SCH组小鼠均呈慢性非缓解型病程,两组在发病时间、达峰时间、临床神经功能评分等方面差异无统计学意义(P>0.05)。TrxA组无一动物发病。模型组(包括MOG组和GPSCH组)动物HE染色可见血管周围炎性细胞浸润,胶质结节形成,髓鞘染色可见斑片状髓鞘脱失,大脑、小脑、脑干和脊髓均有不同程度受累。免疫组化定性和半定量分析显示MOG组和GPSCH组病灶周围炎症浸润处AQP-4表达与TrxA组相比明显增高(P<0.05);②MOG组CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞比例为(4.71±1.61)%,GPSCH组为(1.44±0.65)%,均明显低于TrxA组(P<0.01),且MOG组和GPSCH组之间的差异亦具有统计学意义(P<0.01)。结论:用MOGIgd免疫C57BL/6小鼠诱导EAE模型稳定,发病率高,为今后进一步研究MS的免疫发病机制和采取有效治疗措施打下基础。EAE模型动物AQP-4的表达量与炎症浸润的严重程度相关。
翁益云夏君慧叶好好张国勇张旭
关键词:实验性变态反应性脑脊髓炎MOGAQP-4CD4+CD25+调节性T细胞
辛伐他汀对实验性变态反应性脑脊髓炎和多发性硬化单个核细胞增殖的影响
2011年
目的 研究他汀类药物对致敏实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)模型及多发性硬化(MS)患者单个核细胞增殖的影响,以及与人重组干扰素β1a(INFβ-1a)的协同作用.方法 (1)建立EAE模型,取其脾脏制成单个核细胞悬液,分别予ConA、LPS及MOG刺激,同时予不同浓度辛伐他汀、INFβ-1a进行干预,3H-TdR掺入法检测辛伐他汀对单个核细胞增殖的影响及两者协同作用.(2)根据McDonald(2005年)诊断标准,收集确诊为MS的患者15例,要求在近期均未行特殊免疫治疗,分离外周血单个核细胞,同上进行药物干预及检测.结果 (1)辛伐他汀以剂量依赖的方式抑制了致敏EAE小鼠脾单个核细胞的增殖;常规剂量的辛伐他汀对致敏EAE小鼠脾单个核细胞增殖有明显抑制作用,低剂量的两药联用对经ConA、MOG致敏的EAE小鼠脾单个核细胞抑制增殖作用增强,与阴性对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05或0.01).(2)辛伐他汀以剂量依赖的方式抑制了致敏MS患者外周血单个核细胞的增殖;常规剂量的辛伐他汀对致敏MS患者外周血单个核细胞增殖均有明显抑制作用,与阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05或0.01);低剂量的辛伐他汀与不同剂量INFβ-1a联用具协同作用.结论 他汀类药物是有效的免疫调节剂,不仅调节异常的细胞免疫及体液免疫,还可协同INFβ-1a抑制致敏的单个核细胞增殖.
邓艳厉向张旭
关键词:实验性变态反应性脑脊髓炎多发性硬化免疫作用
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