内蒙古自治区自然科学基金(2009BS0403)
- 作品数：4 被引量：9H指数：1
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- 纹皮蝇HypoderminC基因真核表达质粒构建及小鼠免疫试验
- 2012年
- 根据GenBank发表的Hypodermin C(HC)基因序列设计引物,以原核表达载体pET-HC为模板,PCR扩增HC基因,将克隆基因插入到真核表达载体pVAX1中,构建重组真核表达质粒pVAX1-HC。将重组质粒pVAX1-HC转染小鼠胎儿成纤维细胞,以间接免疫荧光法检测HC基因在细胞中表达。用真核表达质粒pVAX1-HC经双侧胫前肌注射昆明小鼠,对小鼠进行体液免疫和细胞免疫研究。结果表明,小鼠血清抗体水平和淋巴细胞增殖水平明显高于非免疫对照组。本研究成功构建了真核表达质粒pVAX1-HC,为纹皮蝇核酸疫苗研发奠定了基础。
- 白红岩刘春霞呼和巴特尔王文龙
- 关键词：纹皮蝇HYPODERMINC基因真核表达质粒免疫小鼠
- 皮蝇素A基因DNA疫苗的构建及其免疫特性研究
- 2012年
- 本研究以实验室保存的原核表达载体pET-HA为模板,PCR扩增皮蝇素A(HA)基因,将克隆基因插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)中构建DNA疫苗pcDNA-HA。构建的DNA疫苗pcDNA-HA和空载体pcDNA3.1(+)体外转染小鼠胎儿成纤维细胞,间接免疫荧光试验检测细胞内目的基因的表达。将pcDNA-HA、空载体pcDNA3.1(+)和PBS免疫BALB/c小鼠后,对免疫小鼠的体液免疫水平进行了检测。结果表明,构建的DNA疫苗能在小鼠胎儿成纤维细胞中表达,能被抗HA抗体识别,可诱导小鼠产生特异性体液免疫反应,说明HA可作为牛皮蝇蛆病的候选疫苗抗原。本研究为牛皮蝇蛆病的DNA疫苗研究奠定了基础。
- 王文龙娜仁高娃刘春霞白红岩初一鑫
- 关键词：DNA疫苗免疫原性
- HypoderminC基因DNA疫苗的构建及其免疫原性试验
- 2013年
- 本试验以Hypodermin C(HC)基因原核表达载体pETHC为模板,PCR扩增HC基因,克隆测序后,亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建了DNA疫苗pcDNA-HC。pcDNA-HC体外转染小鼠胎儿成纤维细胞后,间接免疫荧光技术检测目的基因在转染细胞中的表达。以DNA疫苗pcDNA-HC免疫小鼠,对小鼠进行体液免疫水平检测。结果表明,所构建的DNA疫苗能转染到小鼠胎儿成纤维细胞中并正确表达,免疫小鼠血清IgG滴度随免疫次数的增加而升高。
- 刘春霞白红岩娜仁高娃呼和巴特尔王文龙
- 关键词：牛皮蝇蛆病DNA疫苗
- 牛皮蝇幼虫抗原基因原核表达条件的优化被引量：9
- 2011年
- 分别对构建的3种牛皮蝇幼虫抗原(Hypodermin A,B,C)基因重组表达菌BL21(pETHA)、BL21(pETHB)、BL21(pETHC)在不同的诱导时间、诱导剂浓度和诱导温度等条件下的表达情况进行了研究。结果表明,重组表达菌BL21(pETHA)、BL21(pETHB)、BL21(pETHC)最佳诱导时间均为4 h,最佳诱导剂浓度均为0.05 mmol/L,最佳诱导温度分别为37、37、30℃。研究结果为进一步获得大量重组抗原用于牛皮蝇蛆病的血清学诊断和免疫防控研究提供了依据。
- 娜仁高娃呼和巴特尔王文龙
- 关键词：牛皮蝇蛆病原核表达表达条件优化
