国家自然科学基金(81170437)
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
- 相关作者：袁耀宗章永平陈平王唯一孙蕴伟更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院北院上海交通大学医学院附属瑞金医院上海交通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脂质运载蛋白-2对急性胰腺炎继发急性肺损伤严重程度判断的实验研究
- 目的:本研究旨在构建急性坏死性胰腺炎(ANP)继发急性肺损伤动物模型,测定脂质运载蛋白-2(Lcn-2)的表达改变,为疾病的严重度判断提供依据。方法:SD大鼠构建ANP模型,分别在6,24,48 h收集标本,此外,建立对...
- 陈平丁燕飞忻笑容谢玲周郁芬吴云林
- 关键词：急性胰腺炎急性肺损伤预后
- 文献传递
- 脂质运载蛋白-2评估急性胰腺炎继发急性肺损伤严重程度的价值被引量：2
- 2018年
- 脂质运载蛋白-2(lipocalin 2,Lcn-2),又称中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白或噬铁蛋白,是一种新型的分泌性蛋白,与炎症、免疫反应、细胞分化、细胞凋亡和组织重构密切相关[1]。Lcn-2作为细胞化学趋化物N-甲酰硫亮氨酰苯丙氨酸的受体之一,可诱导白细胞内颗粒释放,趋化炎症细胞聚集,消灭病原微生物。
- 陈平丁燕飞忻笑容谢玲周郁芬吴云林
- 关键词：中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白铁蛋白急性肺损伤急性胰腺炎继发苯丙氨酸
- 活化STAT蛋白抑制剂1调控巨噬细胞迁移能力及机制的实验研究被引量：1
- 2017年
- 目的:通过绿色荧光蛋白标记巨噬细胞的转基因斑马鱼(Lyz-EGFP)实时观察活化STAT蛋白抑制剂1(protein inhibitor of activated STAT1,PIAS1)与巨噬细胞间的关系,揭示其作用的相关机制,从而为PIAS1参与炎性疾病的基础研究提供依据。方法:以PCSⅡ质粒为基础,体外构建Morpholino-PIAS1验证质粒PIAS1(213bp)-GFP、PIAS1-m RNA表达质粒并体外表达m RNA,并以随机错配5个碱基的错配(Mismatch)作为阴性对照。培养野生型斑马鱼和Lyz-EGFP转基因斑马鱼,利用显微注射技术,将Morpholino-PIAS1+PIAS1(213bp)-GFP-m RNA、PIAS1(213bp)-GFP-m RNA+Mismatch分别共注射单细胞期野生型斑马鱼胚胎,作为Morpholino组及Mismatch阴性对照组,发育6 h后在荧光显微镜下观察荧光表达变化,确定敲减和高表达靶向基因的效率和特异性。然后将Morpholino-PIAS1、PIAS1-m RNA、Mismatch组分别或共同注射单细胞期斑马鱼胚胎,发育60 h后行无菌手术刀斑马鱼切尾,采用共聚焦显微镜,实时动态观察在炎症区域巨噬细胞向伤口处迁移现象及计数,采用蛋白印迹法检测ERK/JNK/p38MAPK/MMPs信号转导通路蛋白的表达情况。结果:单细胞胚胎期观察6 h后发现,Morpholino-PIAS1注射组野生型斑马鱼胚胎可见绿色荧光的减灭,而Mismatch阴性对照组无改变,组间红色荧光无差异。Lyz-EGFP转基因斑马鱼胚胎发育60 h尾巴切除6 h后见Morpholino-PIAS1注射组绿色荧光细胞向尾部迁移增加,而PIAS1-GFP-m RNA注射组绿色荧光细胞向尾部迁移减少,拯救实组(Rescure)组(Morpholino-PIAS1+PIAS1-m RNA共同注射)引起荧光细胞的迁移增加有所减少,差异有统计学意义(P<0.05)。蛋白印迹检测结果显示,Morpholino-PIAS1注射组、Rescure组及Mismatch阴性对照组的ERK、JNK、p38MAPK总蛋白及磷酸化水平及MMP-9蛋白表达升高,TIMP-1蛋白表达下降;而PIAS1-m RNA注射组的ERK、JNK及p38MAPK磷酸化蛋白水平下降,随后MMP-9蛋白水平下降,TIMP-1蛋白水平升
- 王唯一章永平袁耀宗吴云林陈平
- 关键词：巨噬细胞
- PIAS1对重症急性胰腺炎继发急性肺损伤血气屏障影响的研究被引量：2
- 2013年
- 背景:研究发现STAT活化抑制蛋白1(PIAS1)可抑制急性坏死性胰腺炎(ANP)继发急性肺损伤,但机制尚不明确。目的:探讨PIAS1对ANP大鼠继发急性肺损伤血气屏障的作用及其机制。方法:构建重组腺病毒Ad5/F35-PIAS1和Ad5/F35-Null质粒。以3.5%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射诱导大鼠ANP模型,并于造模前1 d分别经阴茎静脉注射Ad5/F35-PIAS1、Ad5/F35-Null和PBS液,设立假手术组作为对照。造模16 h后处死大鼠。观察胰腺和肺组织的病理学变化和超微结构改变。测定支气管肺泡灌洗液炎性细胞计数和肺组织湿/干重系数,以免疫组化法检测RECK定位表达,蛋白质印迹法检测肺组织RECK、MMP-2、MMP-9、ICAM-1蛋白表达。结果:与ANP组和Ad5/F35-Null组相比,Ad5/F35-PIAS1组胰腺和肺组织病理学明显改善,肺组织病理学评分显著降低(P<0.01),超微结构示肺泡毛细血管间血气屏障结构破坏减轻;支气管肺泡灌洗液中性粒细胞和巨噬细胞计数、湿/干重系数均显著降低(P<0.01);肺组织RECK蛋白表达显著升高(P<0.01),MMP-2、MMP-9、ICAM-1蛋白表达显著下调(P<0.01);Ad5/F35-PIAS1组上述指标与对照组相比均无明显差异(P>0.05)。结论:PIAS1可能通过增强RECK蛋白表达、抑制MMP-2、MMP-9、ICAM-1蛋白表达,降低血气屏障通透性,抑制炎性细胞外渗,进而改善ANP继发急性肺损伤的炎症程度。
- 陈平孙蕴伟章永平袁耀宗
- 关键词：急性肺损伤RECK基质金属蛋白酶类
- Myc结合的锌指蛋白1评估实验性急性胰腺炎疾病严重程度的价值被引量：1
- 2015年
- 目的检测急性坏死性胰腺炎（ANP）大鼠血清及胰腺组织Myc结合的锌指蛋白1（MIZ1）表达，探讨其评估急性胰腺炎（AP）病情严重程度的价值。方法采用胰管逆行注射牛磺胆酸钠方法制备ANP模型。以注射生理盐水作为对照组。术后6、24、48h处死大鼠，取血及胰腺组织。采用ELISA法检测血清淀粉酶活性及C反应蛋白（CRP）、TNF-α、IL-6、MIZ1水平。常规行胰腺组织病理学检查，并采用免疫组化及蛋白质印迹法检测胰腺组织MIZ1蛋白表达。结果对照组及ANP6、24、48h组大鼠血清淀粉酶活性分别为（449±40）、（578±25）、（1021±205）、（971±143）U／L；CRP水平为（123±23）、（169±25）、（226±34）、（229±24）mg／L；IL-6为（20．16±4．11）、（38．60±12．05）、（52．33±6．77）、（44．83±4．30）ng／L；TNF-α为（55．334-3．32）、（82．8±5．26）、（120．66±16．00）、（108．33±12．17）ng／L；MIZ1为（5．51士0．34）、（3．44±0．56）、（2．11±0．11）、（2．41±0．43）ng／L；胰腺病理评分为（1．83±0．75）、（6．00±1．67）、（8．16±2．70）、（9．33±1．50）分；胰腺组织MIZ1表达量为0．81±0．05、0．53±0．07、0．31±0．06、0．21±0．08。除ANP6h组的血淀粉酶活性外，其他所有指标ANP各组与对照组差异均有统计学意义（P值均〈0．01），ANP24、48h组又与6h组差异有统计学意义（P值均〈0．01），而ANP24h组与48h组间的差异均无统计学意义。血清MIZl水平与血清淀粉酶、CRP、TNF-α、IL-6水平及胰腺组织病理学评分均呈负相关，差异均有统计学意义（P值均〈0．01）。结论MIZl在AP病程中低表达，并与病情严重程度密切相关，可作为评估AP预后的指标之一。
- 陈平王唯一章永平袁耀宗吴云林
- 关键词：胰腺炎急性坏死性
- 抵抗素样分子-α在急性胰腺炎继发急性肺损伤中的表达和作用
- 2014年
- 背景:抵抗素样分子-α(RELM-α)是一个富含半胱氨酸的分泌蛋白,具有促进肺血管生成和收缩、抗细胞凋亡、诱导肺成纤维细胞分化和细胞外基质沉积的功能。然而,RELM-α在急性胰腺炎(AP)继发急性肺损伤中的作用尚未完全明确。目的:探讨RELM-α在AP继发急性肺损伤中的表达和作用。方法:45只Sprague-Dawley大鼠随机分为急性坏死性胰腺炎(ANP)组、急性水肿性胰腺炎(AEP)组和正常对照组,分别以3.5%牛磺胆酸钠和20%L-精氨酸建立ANP和AEP模型。光学显微镜下观察肺组织病理学表现;测定肺湿/干重系数、支气管肺泡灌洗液炎性细胞数量以及血清CRP、淀粉酶水平;蛋白质印迹法和免疫组化法检测肺组织RELM-α的表达和定位。结果:ANP组肺组织病理学评分、肺湿/干重系数、支气管肺泡灌洗液炎性细胞数量、血清CRP和淀粉酶水平、肺组织RELM-α表达水平均较AEP组和正常对照组显著升高(P<0.05)。Spearman等级相关系数分析显示,肺组织RELM-α表达水平与肺组织病理学评分、肺湿/干重系数、支气管肺泡灌洗液炎性细胞数量呈正相关(P<0.01)。线性回归模型分析显示,肺组织RELM-α表达水平与血清CRP、淀粉酶水平呈正相关(P<0.05)。结论:RELM-α在AP急性肺损伤的肺组织中表达增高,其作为促炎细胞因子,参与激活炎性细胞,介导急性肺损伤发生,可作为监测AP预后的生物学标记物。
- 陈英陈平王唯一孙蕴伟章永平袁耀宗
- 关键词：多器官功能衰竭急性肺损伤
