国家自然科学基金(30130150) 作品数:8 被引量:72 H指数:5 相关作者: 聂品 谢海侠 姚卫建 王改玲 孙宝剑 更多>> 相关机构: 中国科学院 江西师范大学 中国科学院研究生院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家杰出青年科学基金 中国科学院知识创新工程重要方向项目 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
鳜免疫球蛋白D重链基因的克隆与表达分析 被引量:8 2010年 用RACE-PCR和RT-PCR方法获得鳜(Siniperca chuatsi)膜结合型免疫球蛋白D(Membrane-bounded IgD,mIgD)重链基因的全长cDNA序列。鳜mIgD的cDNA全长为3358bp,其5l非编码区包含30bp,3l非编码区包含337bp;开放阅读框包含2991bp,编码996个氨基酸,基因结构为VDJ-μ1-δ1-δ2-δ3-δ4-δ5-δ6-δ7-TM。鱼类IgD恒定区氨基酸序列比对结果显示,鳜mIgD存在半胱氨酸和色氨酸保守位点,与其他鱼类IgD的相似性在37%~72%之间。用邻接法(Neighbor Joining)构建的鱼类免疫球蛋白基因的系统发育树表明,鱼类IgD形成独立的一支,鳜mIgD与牙鲆和庸鲽IgD聚为一支。荧光定量PCR结果显示,鳜mIgD的mRNA主要分布于外周血白细胞、胸腺、头肾、中肾和脾脏中。 王改玲 骆彦萍 孙宝剑 徐镇 许巧情 聂品关键词:免疫球蛋白D 克隆 荧光定量PCR 鱼类胸腺研究进展 被引量:19 2003年 Fish thymus is phylogenetically the first welldeveloped lymphoepithelial structure for most fish species. It supplies microenvironment for Tcell differentiation and is directly involved in defense mechanism. The current status of the fish thymus research was reviewed in the following aspects: 1) structure and possible functions; 2) origin, histogenesis and degeneration; 3) ontogeny and function of Tlymphocyte obtained with monoclonal antibody. 谢海侠 聂品鱼类免疫球蛋白基因结构及抗体多样性的遗传机制 被引量:7 2002年 本文对鱼类免疫球蛋白的基因结构以及抗体多样性产生的遗传机制作一综述。免疫球蛋白重链和轻链是由不同染色体上的多基因座编码的,在鱼类的不同分类单元中具有不同的基因组织方式。鱼类抗体可以识别外界为数众多的抗原,其多样性主要是由以下遗传机制产生的:种系V区编码区段的多样性、V(D)J区段组合的多样性、基因重组的不精确性、基因转换、体细胞突变以及H和L链的随机组合等。 张永安 聂品 朱作言关键词:鱼类 免疫球蛋白 基因结构 福尔马林灭活柱状黄杆菌对草鱼免疫相关基因表达的影响 被引量:11 2008年 在本研究中,将福尔马林灭活的柱状黄杆菌菌苗(FKG4)经腹腔注射免疫草鱼,以注射灭菌PBS作对照,分别在免疫后1、7、15和28d,提取受免鱼和对照鱼肝脏、脾脏和头肾3种组织中的总RNA并反转录成cDNA,利用Real-time PCR方法对不同组织中C-反应蛋白(CRP)、主要组织相容性复合体I(MHCⅠ)、肿瘤坏死因子(TNFα)、白介素1(IL-1β)、白介素8(IL-8)、Ⅰ型干扰素(IFNⅠ)等6种免疫相关基因的表达进行定量分析。结果发现CRP在受免鱼肝脏中的表达于免疫后1、7d显著高于对照鱼,而在脾脏与头肾中的表达未出现显著差异;MHCⅠ在受免鱼3种组织中的表达于免疫后1、7、15d都显著高于对照鱼;TNFα在3种组织中的表达水平都较低,但都于免疫后1、7d显著高于对照鱼;IL-1β在3种组织中的表达于免疫后1d都显著高于对照鱼,但只有在头肾中的表达在免疫后7d时仍保持显著差异;IL-8在3种组织中的表达都只是于免疫后1d显著高于对照鱼;TNFα、IL-1β及IL-8等3种炎症因子的基因表达在免疫后15d都恢复到对照鱼的水平;而IFNⅠ在3种组织中的表达与对照组之间未出现显著差异。结果表明,FKG4注射免疫可以显著提高草鱼3种组织中与抗菌免疫相关的基因表达,从而增强鱼体抵抗细菌性病原的免疫力。 刘毅 隗黎丽 李莉 李楠 姚卫建 聂品关键词:柱状黄杆菌 草鱼 免疫相关基因 实时荧光PCR 鳜鱼头肾的组织发生及成鱼头肾B淋巴细胞的分布 被引量:20 2005年 通过整体连续切片,研究了鳜鱼不同发育时期的头肾结构,并利用原位PCR方法检测了B淋巴细胞在鳜鱼头肾中的分布。在孵化后第1d观察到了肾组织,主要由肾小管组成。尔后头肾的发育经历了三个结构和功能的转变。第一个阶段为孵化后第1d到第7d,头肾作为滤过性器官存在,由肾小管及少量淋巴细胞组成。第二个阶段从第8d到第36d,是一个功能混合型阶段,头肾中既有肾小管,又有造血组织;随时间推移,肾小管数量减少,淋巴细胞数量剧增。紧接着进入第三个阶段:肾小管完全消失,头肾中开始出现大量的嗜铬细胞,头肾作为淋巴-肾上腺组织而存在。肾上腺首先出现在头肾前端,随发育成熟,集中分布于头肾门静脉周围。IgM在鳜头肾中大量表达,IgM分泌细胞分布于整个头肾组织,在血管周围有集中趋势[动物学报51(3):440-446,2005]。 田敬云 谢海侠 姚卫建 聂品关键词:鳜鱼 B淋巴细胞 鳜IL-1β基因的克隆及原核表达 2005年 用RACE PCR获得了鳜白介素-1β(IL-1β)的全长cDNA.鳜IL-1β的cDNA全长为1298 nt(核苷酸),其5′非编码区包含UTR 93 nt;3′非编码区包含452 nt;其开放阅读框内包含753 nt,翻译成251个氨基酸.将鳜IL-1β克隆到原核表达载体pET-32a上,在大肠杆菌Rosetta- gami(DE3)内以包涵体形式得以高效表达. 王改玲 孙宝剑 王高学 聂品关键词:Β基因 全长CDNA 非编码区 白介素-1 开放阅读框 鲢(Hypophthalmichthys molitrix)IL-10基因的克隆及表达分析 被引量:3 2006年 白细胞介素10(IL-10)是一种作用广泛的抗炎细胞因子,主要功能是限制和最终终止炎症反应.用RACE(rapid amplification of cDNA ends)-PCR方法扩增出鲢白细胞介素10(IL-10)的 cDNA,其全长为1248nt,包含5’非编码区156 nt,3’非编码区552nt,开放阅读框540nt.鲢IL- 10的开放阅读框编码179个氨基酸,其中包含构成两对二硫键的4个保守半胱氨酸.RT-PCR结果显示鲢IL-10 mRNA主要在脾脏、鳃、头肾和肌肉中表达.将鲢IL-10完整开放阅读框克隆到原核融合表达载体pET-32a-c(+)上,转入大肠杆菌Rosetta-gami(DE3)内进行表达,经SDS- PAGE电泳后显示重组融合蛋白在分子量约39 ku处有明显表达带,与预期分子量大小一致,且主要以不可溶的包涵体形式存在.变性条件下利用His·Bind树脂成功纯化了融合蛋白,将其免疫家兔,获得兔多克隆抗鲢IL-10抗体,Western blot检测到兔多克隆抗鲢IL-10抗体可有效地与重组蛋白结合.这些结果为进一步研究IL-10的功能奠定了基础. 肖凡书 昌鸣先 孙军 肖调义 聂品关键词:IL-10 克隆 原核表达 鱼用核酸疫苗研究进展 被引量:4 2004年 谢海侠 聂品 王桂堂关键词:鱼类 核酸疫苗 免疫机理 接种途径