国家自然科学基金(30200190)
- 作品数:9 被引量:37H指数:4
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- 相关机构:南京农业大学山西林业职业技术学院安徽农业大学更多>>
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- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 苹果愈伤组织SSR-PCR反应体系优化被引量:2
- 2018年
- 以"嘎啦"苹果组培苗叶片诱导的愈伤组织作为DNA模板提取材料,采用正交设计,摸索了SSR反应体系中Mg^(2+)、Taq DNA聚合酶、引物、模板DNA、dNTP的最适浓度,可为苹果愈伤组织的遗传变异研究奠定基础。结果表明:各因素不同水平变化对反应体系的影响为Taq DNA聚合酶>dNTP用量>Mg^(2+)用量>引物用量=模板DNA浓度。确立了苹果愈伤组织SSR-PCR最佳反应体系总体积25μL,其中4μL 25mmol·L^(-1) Mg^(2+),0.25μL 5U·μL^(-1) Taq DNA聚合酶,3μL 0.01mmol·L^(-1) SSR引物,1μL 30ng·μL^(-1)模板DNA,4μL 2.5mmol·L^(-1)dNTP,2.5μL 10×PCR Buffer,10.25μL超纯水。
- 高兵安文杰孙俊
- 关键词:苹果愈伤组织SSR-PCR
- 苹果中Ty1-copia型逆转座子逆转录酶序列的克隆及分析被引量:17
- 2005年
- 利用苹果叶片为材料,通过PCR扩增、克隆研究了苹果中Ty1-copia型逆转座子的逆转录酶序列。结果表明:(1)逆转座子在1个砧木及7个品种中都能检测到,说明逆转座子在苹果砧木及不同种质中普遍存在。(2)克隆、分析了嘎拉品种中23条逆转座子的逆转录酶序列,分析表明同一基因组中克隆到的逆转录酶序列存在高度的异质性,具体表现为23条逆转录酶序列核苷酸序列长度变化范围是247-279bp,其长度相差32bp,主要表现为缺失突变;其中6条序列中存在1-4个程度不同的终止密码子突变;氨基酸序列同源性的变化范围为21%-98.9%。(3)将23条序列与已发表的不同物种同一类型逆转座子的逆转录酶序列进行聚类分析,表明苹果的Ty1-copia型逆转座子与甜菜、水稻、马铃薯、燕麦及挪威云杉等物种的同类型逆转座子可能有相同的起源。
- 孙俊房经贵高兵章镇孙其宝
- 关键词:逆转座子逆转录酶苹果进化
- 太原市花卉市场调查分析被引量:1
- 2017年
- 文章采用对消费者问卷调研的形式,调查了太原市花卉市场的现状与总体特征,结合资料查阅,利用excel软件对获得的数据进行分析,从而得知太原市花卉市场还处在发展期,具有很大的发展空间。针对花卉市场发展特征,提出了加强政府投入、重视消费群体和培养花卉人才的建议。
- 高兵
- 关键词:花卉市场
- 苹果Ty1-copia类逆转座子家族鉴定及其特性分析(摘要)
- 根据Ty1-copia类逆转座子逆转录酶(reverse transcriptase RT)区域序列特征,研究了苹果基因组中逆转座子家族构成、特性及其进化关系。根据逆转座子RT保守序列设计引物,利用PCR从苹果嘎拉中克隆...
- 孙俊房经贵孙其宝章镇
- 文献传递
- “嘎拉”苹果愈伤组织遗传变异的SSR分析
- 2017年
- 以不同处理的"嘎拉"苹果愈伤组织作试验材料,进行SSR分析,检测其遗传变异性。结果显示:愈伤组织培养中,极易产生分子水平的变异,SSR谱带出现增加、缺失和强度变化的类型,且伴随继代培养时间加长,谱带变异也增多。
- 高兵李彩虹
- 关键词:苹果愈伤组织SSR
- 组织培养条件下苹果Ty1-copia类逆转座子的转录活性(英文)被引量:5
- 2005年
- 研究了苹果基因组中Ty1-copia类逆转座子的转录活性、多样性及其甲基化水平。在培养基MS+2,4-D2mg/L+BA0.2mg/L+NAA0.5mg/L上诱导了1个月的愈伤组织中用RT-PCR方法检测到了270bp的目的条带,而对照、继代组培苗和不含2,4-D的愈伤中均没有目的条带的扩增,说明一定浓度的2,4-D可以诱导苹果中Ty1-copia类逆转座子的表达活性。将目的条带回收、克隆和测序后进行分析:所克隆的21条序列虽都为Ty1-copia类逆转座子逆转录酶保守序列,但存在很大的异质性,21个克隆的核甘酸序列变化范围为196-290bp;翻译成氨基酸后存在缺失、插入、移框和终止密码子突变,7个克隆在氨基酸保守序列‘SLYGLKQ’处有1-2氨基酸位点的突变,说明这些序列对应的逆转录酶多数可能已失去了其原有功能。将21条序列进行聚类分析,除ART20外,其它克隆可聚为3类,并分别与GenBank上某些物种的相应序列同源性很高,表明在不同物种间可能存在逆转座子的横向传递作用。甲基化试验表明苹果基因组内Ty1-copia类逆转座子甲基化水平高。这些都表明Ty1-copia类逆转座子对苹果基因型的多样性及基因组的进化具有重要意义。
- 孙俊房经贵陶建敏蔡斌华章镇
- 关键词:苹果转录活性
- “嘎拉”苹果叶片愈伤组织的诱导被引量:4
- 2017年
- 以"嘎拉"苹果单芽系组培苗叶片为外植体诱导愈伤组织,研究了愈伤组织诱导过程中植物生长调节剂种类及浓度配比、光照和黑暗条件以及继代天数对其形成及生长的影响。结果表明:各组合均能比较高效地诱导愈伤组织的形成,以MS+蔗糖30g·L^(-1)+2,4-D 2.0mg·L^(-1)+NAA 0.5mg·L^(-1)+BA 2.0mg·L^(-1)诱导效率最佳;愈伤组织的形成需要14~21d的暗培养,继代周期以15~30d为宜。
- 高兵孙俊
- 关键词:苹果叶片愈伤组织生长调节剂暗培养
- 利用S-SAP鉴定富士苹果芽变被引量:5
- 2009年
- 利用银染S-SAP技术对苹果富士及其14个芽变品种进行研究,结果发现,筛选出的6对引物中,L12/E7能够将所有富士芽变品种同富士区分开来,其余5对引物能够在芽变品种中区分秋富5号、烟富1、盛放富1和长富1号.由于S-SAP多态性主要由基因组内逆转座子的转座引起,因此富士苹果芽变品种的产生可能与逆转座子的插入有关.
- 贾怀志蔡斌华王飞孙俊王昆章镇
- 关键词:芽变
- 嘎拉苹果单芽系组培苗的获得被引量:4
- 2010年
- 以皇家嘎拉苹果芽为外植体,研究不同消毒方法、消毒时间、不同防褐化措施和不同激素配比对组培苗获得的影响。结果表明:嘎拉芽消毒选择0.1%HgCl2消毒7min为宜;接种前使用4g/L PVP、接种后暗培养10d左右可以较有效地减轻褐变;诱导、增殖培养基是Ms+BA 2.0mg/L+NAA0.1mg,/L,继代、扩繁培养基是MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L;继代周期以28-30d为宜。
- 高兵孙俊章镇
- 关键词:苹果组培苗消毒方法激素配比