国家自然科学基金(81170473)
- 作品数：5 被引量：23H指数：4
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- 第三代流式细胞分选仪及96孔板分选单个细胞的方法及参数优化被引量：8
- 2016年
- 目的：用第三代流式细胞分选仪比较不同直径喷嘴分选的单细胞的得率及细胞活性,进一步完善单细胞微孔板分选的参数设置及条件优化。方法：用FACSAriaⅢ流式细胞分选仪及96孔板对Raji细胞、A549、DT 40、RAW 264.7细胞系进行单细胞分选,分别采用70μm、100μm和130μm喷嘴分选,比较分选后单细胞得率及克隆形成率。结果：在单细胞分选模式下,用3种不同直径喷嘴及96孔板分选后的单细胞得率为86.55%-93.44%,即96孔板有单细胞的孔数为84-92孔;分选后的单个细胞培养7d后,经70μm、100μm和130μm喷嘴分选的单细胞克隆孔数分别为31-52孔、49-70孔、58-78孔。结论：进行单细胞微孔板分选时,在精确调节及优化实验参数的前提下,为了保证单细胞的活性,应优先选择100μm或130μm喷嘴。
- 闵智慧程韵枫
- 关键词：喷嘴
- 抗原模拟法构建的免疫性血小板减少症小鼠模型中巨核细胞形态学及超微结构的研究被引量：5
- 2013年
- 目的:采用抗原模拟法构建免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia,ITP)小鼠模型,并观察模型小鼠的骨髓巨核细胞形态学及超微结构特点。方法:实验组CBA/Ht小鼠通过腹腔注射Wistar大鼠血小板免疫,对照组CBA/Ht小鼠仅注射0.9%氯化钠溶液。动态监测两组小鼠血小板计数,并取骨髓组织分别行涂片检查及扫描电镜观察。结果:与对照组比较,实验组小鼠在接受大鼠血小板免疫后第2周起血小板数量开始降低(P<0.05),至第4周达到最低点(P<0.01)。免疫后第4周实验组小鼠骨髓涂片中巨核细胞显著增生,且以幼稚巨核细胞为主;电镜下常可见巨核细胞核分叶减少,分界膜系统扩张或数量减少,胞浆内因颗粒物质减少且缺乏细胞器而显得更加致密,胞浆内常可见较多空泡。结论:该模型可较好地模拟人类ITP的发病特点,在模型中观察到的巨核细胞的形态及超微结构的改变进一步揭示了巨核细胞存在的发育异常与ITP的发病有关系。
- 陈朴季丽莉程韵枫王蓓丽郭玮潘柏申
- 关键词：免疫性血小板减少症小鼠模型巨核细胞超微结构
- 原发免疫性血小板减少症患者外周血CD5＋B细胞水平及其分泌IL-10的能力被引量：5
- 2012年
- 目的探讨原发免疫性血小板减少症（ITP）患者外周血CD5＋B细胞数量及其分泌IL．10的能力及意义。方法采用流式细胞术检测57例治疗前、40例治疗后IrrP患者及25名正常对照外周血CD5＋B细胞比例及其在体外培养后胞内IL-10的平均荧光强度（MFI），ELISA方法检测培养上清液IL．10浓度；分析CD5＋B细胞特征与疾病状态的关系。结果治疗前ITP患者外周血CD5＋B细胞占总淋巴细胞比例和绝对值计数[（3．75±2．37）％、（6．29±5．77）×10＋／L]均高于正常对照[（2．10±1．08）％、（3．06±1．90）×10＋／L]（P值均〈0．05）；ITP患者和正常对照外周血CD5＋B细胞的胞内IL-10的MFI水平均高于其他淋巴细胞亚群；治疗前ITP患者CD5‘B细胞中产生IL-10的细胞比例、胞内IL-10MFI[（29．51±20．73）％、27．95±13．99]均高于正常对照[（15．904-9．58）％、14．31±11．29]（P值均〈0．05），其细胞培养上清液中IL-10浓度[（173．05±102．50）ng／L]低于正常对照组[（230．61±76．96）ng／L]；治疗后ITP患者CD5＋B细胞比例下降至正常水平，其胞内IL．10MFI与治疗前无显著差异，仍高于正常对照组，但细胞培养上清液中IL-10水平恢复正常。结论治疗前ITP患者外周血CD5＋B细胞比例升高、细胞内IL-10积聚，但分泌IL-10的能力下降；疾病缓解后，CD5＋B细胞的数量及分泌IL-10的能力得到恢复。
- 李锋化范例季丽莉詹延霞邹善华王小云高松邬扬炯程韵枫
- 关键词：血小板减少B淋巴细胞白细胞介素10
- 滤泡辅助T细胞在外周T细胞淋巴瘤发生中的研究进展被引量：1
- 2014年
- 滤泡辅助T细胞（Tfh）是近年来新发现的T细胞亚群,其表面标记包括CXCR5、ICOS、PD-1、SAP及IL-21等,Tfh的分化发育依赖于转录因子Bcl-6及其下游的Stat3信号转导通路,可能是多阶段、多因素参与的过程.Tfh的主要生物学功能是形成并维持滤泡生发中心,并参与了大部分记忆B细胞和浆细胞的分化发育.血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤（AITL）是一种伴有显著自身免疫现象的外周T细胞淋巴瘤（PTCL）,其肿瘤细胞具有类似正常生发中心的Tfh表型,但伴有CD10、CXCL13异常表达;而伴有滤泡生长特征的外周T细胞淋巴瘤非特指型（PTCL-U）的肿瘤细胞多表达Tfh标记,并具有部分AITL的临床特征.
- 吴擘颋程韵枫
- 关键词：血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤外周T细胞淋巴瘤
- 原发性免疫性血小板减少症的治疗进展被引量：4
- 2014年
- 原发性免疫性血小板减少症是一种免疫介导的获得性血小板减少所致出血性疾病,其患者外周血小板计数<100×109/L,但没有引起血小板减少的明显诱因或基础疾病。近年来,随着对此疾病发病机制的认识逐渐深入,在其治疗方面也有了很多新的进展。
- 王伟光程韵枫
- 关键词：原发性免疫性血小板减少症血小板减少症
