国家自然科学基金(81170487)
- 作品数：19 被引量：76H指数：6
- 相关作者：陆超胡毓华韩美园殷丽萍沈燕更多>>
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- Par-4基因增敏顺铂对肾母细胞瘤荷瘤裸鼠生长的抑制作用被引量：2
- 2015年
- 目的 :探讨腺病毒介导的前列腺凋亡反应因子-4(prostate apoptosis response-4,Par-4)协同顺铂(CDDP)对人肾母细胞瘤细胞SK-NEP-1裸鼠皮下移植瘤的影响。方法:采用人肾母细胞瘤细胞株SK-NEP-1建立BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型,分别用表达Par-4的腺病毒、CDDP及两者联合治疗,随机分成5组:Par-4+CDDP组、Par-4组、CDDP组、空Par-4(不表达Par-4的对照腺病毒)组、空白对照组。测定移植瘤的体积及瘤重,通过HE染色及免疫组化分析,检测移植瘤组织中Par-4、GRP78及BAX蛋白的表达水平。结果:Par-4+CDDP组、Par-4组及CDDP组均有抑制裸鼠移植瘤生长的作用,瘤重差异有统计学意义(P<0.05),其中,Par-4+CDDP组优于Par-4组与CDDP组。而空Par-4组与空白对照组相比,差异无统计学意义。Par-4+CDDP组能明显上调Par-4、GRP78及BAX蛋白表达(P<0.05)。结论:外源性Par-4协同CDDP抑制裸鼠移植瘤的生长可能是外源性Par-4通过结合GRP78后上调BAX蛋白所致。
- 李赟颉殷丽萍陆超
- 关键词：肾母细胞瘤
- 小呼吸道功能和痰嗜酸性粒细胞在儿童咳嗽变异性支气管哮喘缓解期测定的意义被引量：17
- 2013年
- 目的探讨小呼吸道功能及痰嗜酸性粒细胞（EOS）监测在咳嗽变异性支气管哮喘（哮喘）缓解期患儿中的意义。方法对52例咳嗽变异性哮喘缓解期患儿进行肺功能检查并采集诱导痰，记录小呼吸道功能观察指标，包括用力呼气25％流速（MEF25）、用力呼气50％流速（MEFS0）、用力呼气75％流速（MEF75），并进行痰EOS分类计数。另选择16例健康儿童为健康对照组。结果52例咳嗽变异性哮喘缓解期患儿存在一定程度的小呼吸道功能障碍，表现为MEFS0显著低于健康对照组（P〈0．01），而痰EOS计数显著高于健康对照组（P〈0．01）。哮喘复发t〉3次／年的患儿小呼吸道功能明显低于复发〈3次／年的患儿。MEF50低于80％预计值、痰EOS计数≥4％的患儿哮喘复发次数多。结论在咳嗽变异性哮喘缓解期同时监测小呼吸道功能及痰EOS计数对监测病情有重要作用。
- 陆彬彬陆超沈燕
- 转录因子THAP1在人肺泡Ⅱ型上皮细胞中结合靶基因的谱系分析被引量：2
- 2015年
- 目的 :确定转录因子THAP1的靶基因,为新生儿肺损伤的治疗寻找新策略。方法 :利用THAP1抗体进行染色质免疫共沉淀实验(chromatin immuno-precipitation,Ch IP),将富集到肺泡Ⅱ型上皮细胞来源的肺腺癌细胞A549上的DNA样品进行高通量测序,对得到的核苷酸序列进行生物信息学分析。结果:共得到20 417个THAP1结合位点的核苷酸序列片段,对应9 688个结合的靶基因,THAP1结合的主要区域分布在基因间区、内含子区和启动子区。其中包含1 051个基因的启动子区。将THAP1结合于启动子区的基因进行基因功能(gene ontology,GO)注释,表明THAP1参与包括蛋白质二聚化、同源蛋白质结合、蛋白质磷酸化调节、类固醇激素受体的激活等多种细胞生物学过程。THAP1结合的基因主要涉及9个代谢路径,以胞吞作用、多糖降解、硫酸软骨素或硫酸皮肤素的生物合成等路径为主。结论:初步确定了转录因子THAP1在肺泡Ⅱ型上皮细胞中的靶基因结合序列,提示THAP1广泛参与了多种生物学过程,为研究THAP1的功能及作用机制研究提供了线索,从而为新生儿肺损伤的治疗奠定了基础。
- 丁蓉胡毓华何思思陆超
- 关键词：高通量测序A549细胞
- Jurkat新基因J441与FLAG融合基因慢病毒载体的构建
- 2014年
- 目的 作者前期实验经“高通量测序”得到T淋巴细胞白血病细胞株基因表达数据,经生物信息学分析得一新序列,暂命名为J441.为了对这一新序列进行进一步深入研究,本实验构建了T淋巴细胞白血病新基因J441与FLAG标签肽融合基因慢病毒载体.方法 引物上引入FLAG标签,实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）从T淋巴细胞白血病细胞系Jurkat细胞中钓取J441的开放阅读框（ORF）片段,形成J441-FLAG融合基因,并将之克隆到带GFP荧光报告基因的慢病毒表达载体质粒pHAGE-CMV-MCS-IzsGreen中构建成pHAGE-J441-FLAG质粒,利用脂质体将其与包装质粒psPAX2和包膜质粒pMD2.G共转染293T细胞.收集含有病毒的上清,浓缩,鉴定.取浓缩纯化后的病毒上清感染293T细胞和宿主Jurkat细胞.观察荧光及测序鉴定293T细胞中J441的表达,细胞免疫荧光检测293T细胞中FLAG的表达及细胞定位,预测J441的细胞定位.结果 核酸序列测序证实成功构建了含J441-FLAG基因的重组慢病毒表达载体,病毒滴度为5×1010 ifu/L.重组慢病毒感染293T细胞可以检测到J441与FLAG标签融合基因的表达,初步预测J441在胞质中表达.结论 成功构建了J441-FLAG融合基因慢病毒表达载体,为进一步研究J441基因的相关功能提供了稳定转染载体,为揭示J441基因在T淋巴细胞白血病的发生发展过程中的重要作用奠定基础.
- 韩美园崔毓桂陆超
- 关键词：慢病毒重组质粒
- 吉西他滨联合奥沙利铂方案治疗儿童外周T细胞淋巴瘤1例并文献复习被引量：1
- 2017年
- 外周T细胞淋巴瘤（peripheral T-cell lymphoma,PTCL）是指成熟T细胞和自然杀伤细胞的异质性淋巴增生性疾病,目前尚未被完全认识清楚。PTCL约占非霍奇金淋巴瘤的10%[1],常发生于淋巴结,但也可表现为结外受累,包括肝脏、骨髓、胃肠道和皮肤等。PTCL各亚型具有明显的异质性,
- 陆彬彬李建勇陆超
- 关键词：外周T细胞淋巴瘤吉西他滨奥沙利铂
- 急性T淋巴细胞白血病相关长链非编码RNAT-ALL-R-LncR1的发现、鉴定及其功能研究被引量：1
- 2017年
- 目的对新发现的急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)相关长链非编码RNA进行鉴定并研究其功能。方法(1)提取T-ALL Jurkat细胞RNA进行全转录组深度测序,发现了一种新的T-ALL相关长链非编码RNA,命名为T-ALL-R-LncR1。用实时荧光定量PCR和琼脂糖凝胶电泳法观察Jurkat细胞和T-ALL患者骨髓单个核细胞中T-ALL-R-LncR1的表达情况。(2)将体外培养的T-ALL患者骨髓单个核细胞分为实验组、空质粒组和对照组。实验组转染T-ALL-R-LncR1小干扰RNA(siRNA),空质粒组转染空质粒,对照组不转染。转染24 h时用实时荧光定量PCR法检测各组细胞T-ALL-R-LncR1相对表达量。转染24、48、72 h时用CCK-8法观察各组细胞增殖情况(以OD450表示),转染48 h用流式细胞术测算各组细胞凋亡率。结果 (1)T-ALL-R-LncR1具有原癌基因特性,在人T-ALL Jurkat细胞及T-ALL患者骨髓单个核细胞中高表达。用逆转录实时定量PCR法从Jurkat细胞及急性T淋巴细胞白血病骨髓单个核细胞中获得PCR产物的琼脂糖凝胶电泳结果符合T-ALL-R-LncR1。测序结果证实PCR产物为T-ALL-R-LncR1。(2)实验组、空质粒组和对照组T-ALL-R-LncR1相对表达量分别为0.79±0.18、1.12±0.08和1。实验组骨髓单个核细胞T-ALL-R-LncR1相对表达量低于空质粒组和对照组(P均<0.05),空质粒组和对照组骨髓单个核细胞T-ALL-R-LncR1相对表达量相比P>0.05。转染24、48、72 h时实验组骨髓单个核细胞OD450值均低于空质粒组和对照组(P均<0.05),空质粒组和对照组骨髓单个核细胞OD450相比P均>0.05。转染48 h时实验组、空质粒组、对照组细胞凋亡率分别为38.67%±1.32%、1.80%±0.14%、1.79%±0.13%。实验组细胞凋亡率高于空质粒组和对照组(P均<0.05),空质粒组和对照组细胞凋亡率相比P>0.05。结论本研究发现了一种具有原癌基因特性的新T-ALL相关长链非编码RNA,即T-ALL-R-LncR1。沉默T-ALL-R-LncR1可以促进T-ALL患者骨髓单个核细胞凋亡并抑制�
- 张琳陆超李天宇
- 关键词：急性T淋巴细胞白血病长链非编码RNA细胞增殖细胞凋亡
- 极低出生体质量儿的早期积极营养支持被引量：7
- 2016年
- 目的观察早期积极的静脉营养联合早期微量喂养对极低出生体质量儿（VLBWI）的影响，并评价肠道屏障蛋白和感染相关MicroRNA的临床检测价值。方法选择2006年1月至2014年6月入住南通大学附属南通妇幼保健院新生儿重症监护病房的VLBWI62例。其中A组30例采用传统的静脉营养策略；B组32例采用早期积极的静脉营养联合早期微量喂养策略。比较恢复出生体质量时间、恢复出生体质量后每天增长克数、静脉营养时间、住院时间；记录并发症情况；住院期间监测肝肾功能、电解质、血脂分析、血气分析等。酶联免疫吸附法检测血浆中肠道屏障蛋白肠脂肪酸结合蛋白（I-FABP）。实时定量PCR（RT—PCR）检测感染相关MicroRNA155。结果2组患儿出生后体质量下降幅度[A组（13．70±3．10）％、B组（5．46±2．64）％]、恢复出生体质量时间[A组（12．20±3．38）d、B组（6．82±3．20）d]、静脉营养时间[A组（29．62±4．16）d、B组（20．80±3．20）d]、平均住院天数[A组（44．60±6．32）d、B组（28．91±4．36）d]比较，B组均优于A组（P均〈0．05）。住院期间高胆红素血症发生率（B组31．2％、A组56．7％）、宫外生长迟缓发生率（B组34．3％、A组73．3％）、胆汁淤积发生率（B组6．2％、A组23．3％）、喂养不耐受发生率（B组15．6％、A组53．3％）、坏死性小肠结肠炎发生率（B组0、A组16．7％），B组较A组显著减少，差异均有统计学意义（P均〈0．05）。A组肠道屏障蛋白I-FABP的血浆水平[（9．083±1．059）μg／L]高于B组[（7．563±0．739）μg／L]，但差异无统计学意义（t=1．190，P=0．0764）。A组中坏死性小肠结肠炎患者I-FABP的血浆水平[（19．500±3．510）μg／L]高于B组[（7．563±0．739）μg／L]，差异有统计学意义（t=5．231，P=0．0350）。A组的MicroRNA155基因表达量2也Ac‘为0．81±0。12，显著高于B�
- 顾谦学顾红兵李双双陆超胡毓华
- 关键词：婴儿极低出生体质量静脉营养
- 儿童后颅窝肿瘤的MRI影像特征被引量：6
- 2016年
- 目的探讨儿童后颅窝肿瘤的MRI影像特征。方法回顾性分析33例经病理学证实的后颅窝肿瘤患儿的MRI影像学表现。其中,髓母细胞瘤18例,毛细胞型星形细胞瘤8例,室管膜瘤3例,脉络丛乳头状癌、非典型畸胎瘤/横纹肌样瘤、皮样囊肿伴感染、脑膜瘤各1例。结果MRI检查显示,儿童后颅窝肿瘤好发于中线区。髓母细胞瘤以实性成分为主,增强扫描实性成分呈中度到明显强化;肿瘤实质扩散加权成像(DWI)序列呈高信号,表观扩散系数(ADC)图为低信号,ADC值为(0.68±0.05)×10-3 mm^2/s。毛细胞型星形细胞瘤实性成分DWI序列呈低信号,ADC图为高信号,ADC值为(1.80±0.03)×10^(-3) mm2/s。室管膜瘤为实性或囊实性肿块,增强后呈囊性改变,DWI序列及ADC图肿瘤实质信号强度介于髓母细胞瘤与毛细胞型星形细胞瘤之间。结论通过对MRI多序列扫描的综合分析,儿童后颅窝肿瘤术前一般可明确诊断。
- 赵萌蒋敏波陈相汛陆超胡毓华唐文伟
- 关键词：后颅窝肿瘤磁共振成像儿童
- 重组蛋白酶抑制蛋白拮抗中性粒细胞释放炎性介质的作用
- 2012年
- 目的克隆分泌型白细胞蛋白酶抑制(SLPI)蛋白基因并表达人SLPI重组蛋白,探讨其拮抗中性粒细胞释放炎性介质的作用。方法抽提人外周血中性粒细胞mRNA,克隆SLPI基因,构建质粒,转染后抽提纯化蛋白,实验分组后,分别进行不同剂量的SLPI和内毒素(LPS)共处理中性粒细胞。A组:正常对照组(不予LPS和重组SLPI蛋白处理);B组:LPS处理组(加终质量浓度0.001 g·L-1的LPS);C组:低剂量重组SLPI蛋白干预组(加重组SLPI蛋白0.010 g·L-1和终质量浓度0.001 g·L-1的LPS);D组:中剂量重组SLPI蛋白干预组(加重组SLPI蛋白0.050 g·L-1和终质量浓度0.001 g·L-1的LPS);E组:高剂量重组SLPI蛋白干预组(加重组SLPI蛋白0.100 g·L-1和终质量浓度0.001 g·L-1的LPS)。然后进行中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)活性实验、炎性介质释放实验以及转录因子STAT3活性实验,分别测定NE活性、炎性介质IL-6/IL-8表达量及转录因子STAT3的DNA结合活性。结果成功构建SLPI基因全长cDNA的真核表达载体,发现重组SLPI蛋白呈剂量依赖性地抑制LPS诱导的NE活性[(17.78±0.54)nmol·L-1vs(5.46±0.12)nmol·L-1,P<0.05]。重组SLPI蛋白也显著抑制LPS诱导的炎性介质IL-6[(179.51±6.61)ng·L-1vs(63.13±4.55)ng·L-1,P<0.05]和IL-8[(192.98±7.65)ng·L-1 vs(103.42±4.76)ng·L-1,P<0.05]的释放及转录因子STAT3的DNA结合力升高。结论 SLPI可有效抑制NE活性,减轻炎性损伤。
- 胡毓华朱亮华陆超
- 关键词：弹性蛋白酶炎性介质转录因子
- 急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株新转录本630序列的鉴定及其功能
- 2013年
- 目的急性T淋巴细胞白血病（T—ALL）细胞株Jurkat新转录本630序列的鉴定及功能研究。方法提取Jurkat细胞RNA进行全转录组测序；应用反转录聚合酶链反应（RT—PCR）联合测序分析，对新转录630序列进行鉴定；RT—PCR检测630序列在不同组织中的表达谱；小干扰RNA（siRNA）转染Jurkat细胞，实时荧光定量PCR（Real．timePCR）检测630序列的转录水平；采用流式细胞仪测定630序列下调后对细胞凋亡的影响。CCK-8法检测细胞增殖。结果证实新转录本630序列存在；630序列是肿瘤相关性转录本，在JurkatE6—1、Hb60和肝癌等细胞中高表达，而在正常组织和细胞中不表达；降低T—ALL细胞中630序列转录水平后凋亡细胞比例变化不大，但细胞增殖受到抑制。结论630序列为T—ALL细胞株Jurkat细胞的新转录本，降低其转录水平能抑制细胞的增殖可能参与T—ALL的发生发展。
- 殷丽萍张琳陆超
- 关键词：白血病JURKAT细胞转录组
