山东省自然科学基金(ZR2011HL039)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 相关作者：张明凯李玉明王凯苏庆亮孙庆磊更多>>
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- 人胃癌组织中间充质干细胞的生物学稳定性分析被引量：4
- 2012年
- 目的对从人胃癌组织分离培养的间充质干细胞(hGC-MSCs)进行生物学特性的研究分析,为hGC-MSCs及肿瘤的研究提供研究基础和理论依据。方法采用组织块贴壁法从新鲜的胃癌组织中分离培养hGC-MSCs,倒置相差显微镜下观察hGC-MSCs细胞形态,计数板计数并绘制hGC-MSCs生长曲线以观察细胞的增殖能力,染色体G显带实验观察hGC-MSCs核型情况,流式细胞术检测hGC-MSCs表面抗原的表达,使用诱导分化液体外诱导hGC-MSCs向成骨细胞和脂肪细胞分化。结果成功从人胃癌组织中分离培养hGC-MSCs;hGC-MSCs在倒置相差显微镜下呈梭形或多角形的成纤维样细胞,细胞间平行排列呈漩涡状或辐射状;生长曲线示细胞增殖能力很强,并随着传代有所降低;G显带核型分析细胞为正常的二倍体,无染色体异常;hGC-MSCs表面抗原高表达CD13、CD44和CD90,低表达CD45、CD34和HLA-DR;诱导分化实验显示hGC-MSCs具有多向分化潜能。结论人胃癌组织中存在hGC-MSCs,对其进行生物学特性研究发现生物学特性稳定,未发现恶性转化。hGC-MSCs的研究,对肿瘤微环境的研究及MSCs的临床应用有重要的价值。
- 张明凯李玉明蒋宏孙庆磊李河圣
- 关键词：间质干细胞胃肿瘤
- 人胃癌组织中间充质干细胞对胃癌细胞株SGC-7901增殖与侵袭能力的影响被引量：3
- 2014年
- 目的 观察人胃癌组织中分离培养的间充质干细胞（hGC-MSCs）对胃癌细胞株SGC-7901增殖与侵袭能力的影响.方法 提取hGC-MSCs条件培养液（MSC-CM）,用不同浓度（20％、40％、60％）的MSC-CM作用于SGC-7901细胞,噻唑蓝（MTT）法及Transwell侵袭实验检测各组细胞增殖与侵袭能力;实时聚合酶链反应（Real-time PCR）、Western blot和细胞免疫化学法检测增殖细胞核抗原（PCNA）和基质金属蛋白酶（MMP）-9在各组细胞中的表达.结果 MTT法证实MSC-CM对SGC-7901细胞增殖有抑制作用（P＜0.05）,抑制率与MSC-CM的浓度和作用时间呈正比.Transwell侵袭实验表明,经MSC-CM处理后,对照组及20％、40％、60％ MSC-CM组穿膜细胞数分别为（75.71±7.32）、（63.68 ±7.12）、（54.29 ±6.97）和（41.36±3.29）个,随MSC-CM浓度升高,细胞侵袭能力明显下降（P＜0.05）.Real-time PCR结果证实MSC-CM能明显下调PCNA和MMP-9的表达（P＜0.01）.Western blot检测20％、40％、60％ MSC-CM组PCNA表达分别为对照组的（73.99 ±16.71）％、（51.56±12.18）％和（40.11±9.37）％,MMP-9表达分别为对照组的（74.35±19.12）％、（53.59 ±10.41）％和（29.58±7.93）％,细胞免疫化学结果显示PCNA在对照组、20％、40％、60％ MSC-CM组中的平均吸光度值分别为0.201 ±0.049、0.185 ±0.031、0.154±0.019和0.128 ±0.012,MMP-9在4组中的平均吸光度值分别为0.182±0.032、0.164±0.028、0.136±0.017和0.098±0.008,各组之间差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 HGC-MSCs能抑制SGC-7901细胞的增殖及侵袭能力,其机制可能与下调PCNA和MMP-9的表达有关.
- 王凯李玉明张明凯姜吉祥苏庆亮
- 关键词：胃癌间充质干细胞增殖细胞核抗原基质金属蛋白酶
- 人胃癌组织中间充质干细胞对胃癌荷瘤鼠瘤体生长的影响被引量：2
- 2015年
- 目的 观察人胃癌组织来源的间充质干细胞（hGC-MSCs）对胃癌荷瘤鼠瘤体生长的影响.方法 培养胃癌细胞株SGC-7901,将浓度为1×10^7个/只的细胞接种于BABL/c裸鼠右侧背部皮下,建立荷瘤鼠模型.经不同剂量（0.5×10^6、1.0 ×10^6、2.0×10^6个/只）的hGC-MSCs作用于荷瘤鼠为实验组,磷酸盐缓冲液（PBS）作用于荷瘤鼠为对照组.测量肿瘤体积变化,采用免疫组织化学染色、实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）、Western blot检测增殖细胞核抗原（PCNA）和基质金属蛋白酶-9 （MMP-9）在各组中的表达.结果 对照组与各实验组的肿瘤体积分别为（1.06±0.15）、（2.21 ±0.44）、（3.38±1.23）、（4.60±0.86） cm3,各组差异有统计学意义（P＜0.05）.免疫组织化学结果示PCNA在对照组和各实验组中的吸光度（A）值分别为0.349±0.008、0.376±0.013、0.441 ±0.012、0.500±0.022;MMP-9在4组中的A值分别为0.341±0.027、0.429±0.015、0.474±0.006、0.527±0.033,各组之间差异有统计学意义（P＜0.01）.Real-time PCR证实hGC-MSCs能够上调PCNA mRNA的表达,在对照组和各实验组分别为1.000±0.000、1.640±0.013、1.890±0.021、2.150±0.021;MMP-9 mRNA在4组中的表达分别为1.000±0.000、1.810±0.101、2.310±0.004、2.700±0.034,各组之间差异有统计学意义（P＜0.05）.Western blot检测对照组和各实验组PCNA的表达分别为14.99 ±0.90、17.64 ±0.90、25.11 ±0.40、28.31±1.10;MMP-9在4组中的表达分别为18.48±1.30、32.95±1.20、67.26±1.20、141.16±3.80,各组之间差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 hGC-MSCs在体内能促进胃癌荷瘤鼠瘤体的生长,其机制可能与上调PCNA和MMP-9的表达有关.
- 苏庆亮李玉明王凯张明凯段长胜
- 关键词：胃癌增殖细胞核抗原
