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荧光PCR结合熔解曲线法检测JAK2 V617F突变方法的建立及其方法学验证被引量：5: 2013年; 目的参考美国病理学家协会（CAP）相关要求,验证本实验室自建的JAK2 V617F突变检测项目的各项性能参数.方法方法学建立.收集2010年4月至12月复旦大学附属华山医院已确诊的57例BCR/ABL融合基因阴性骨髓增殖性肿瘤患者的外周血和骨髓液标本.采用荧光PCR结合熔解曲线法建立JAK2 V617F突变方法检测标本.在准确度、重复性、分析灵敏度、干扰物质的影响等各方面对检测方法的性能进行评估.准确性使用Kappa检验评估,重复性使用符合率,分析灵敏度使用配对t检验进行统计分析.结果荧光PCR结合熔解曲线方法（试验方法）与参考方法（测序法）相比有非常好的一致性（Kappa=0.89）；重复性符合率为100％；血脂（＜24 mmol/L）和黄疸（＜450 μmol/L）对本试验无明显干扰；最低检测突变率为5％.结论基于荧光PCR结合熔解温度反应方法检测JAK2 V617F突变可应用于临床检测.; 胡婷婷陈宇明张心菊顾小叶关明刘维薇; 关键词：JANUS激酶2 聚合酶链反应

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上海市科学技术委员会资助项目(11JC1401800)