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4周中等强度有氧运动诱导大鼠心房肌蛋白质组差异表达的研究被引量：1: 2018年; 目的:探讨中等强度有氧运动对大鼠心房肌蛋白质组及其基因差异表达的影响,为运动心脏重塑和慢性心血管疾病康复研究提供研究依据。方法:20只雄性SD大鼠按照体重随机配对分为对照组、实验组(n=10),实验组大鼠每次按照速度24 m·min^(-1)、持续训练40 min(负荷强度相当于60%～70%VO_(2max)),每周训练6 d,持续训练4周中等强度有氧运动。应用双向凝胶电泳技术(2-DE)分离心房肌蛋白质点,串联飞行时间质谱仪技术鉴定电泳结果中表达量上调≥5倍以上,下调至1/5以下的13个备选目标蛋白质点。并对其中6个目标蛋白质用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测其mRNA。结果:通过软件分析,实验组与对照组比较,其中表达量下调至20%以下的点8个,上调5倍及以上点有5个,质谱鉴定分析其中的13个蛋白质点,最终鉴定出8种蛋白质和一个分子量为54 KDa的未知蛋白,包括:丙酮酸脱氢酶E1α1、线粒体乌头酸水合酶、蛋白质二硫键异构酶A3、甲基丙二酸半醛脱氢酶[酰基]、线粒体二氢硫辛酸脱氢酶、异戊酰辅酶A脱氢酶、谷胱甘肽合成酶、丝裂素活化蛋白激酶3等。RT-PCR检测结果表明,与对照组相比,4周中等强度有氧运动后,大鼠心房肌中甲基丙二酸半醛脱氢酶的mRNA表达量降低(P﹤0.05),线粒体二氢硫辛酸脱氢酶、蛋白质二硫键异构酶A3、线粒体乌头酸水合酶、谷胱甘肽合成酶的mRNA表达量降低(P﹥0.05);异戊烯辅酶A脱氢酶的mRNA表达量增高(P﹥0.05),表明mRNA表达水平与质谱鉴定结果的变化不完全一致。结论:4周的中等强度有氧运动诱导大鼠心房肌蛋白质组发生显著变化,有13个明显变化的目标蛋白,多数为能量物质代谢酶,这些目标蛋白质的变化与其mRNA表达量的变化并不完全一致,表明中等强度运动可能影响这些目标蛋白质上游基因转录的调控,也可影响下游翻译﹑修饰等的调控,导致表达的�; 彭勇史绍蓉黄思敏郭远盘徐哲万莉莉雷雄; 关键词：蛋白质组心房肌质谱鉴定双向凝胶电泳

中等强度运动对大鼠心室肌蛋白质组差异表达的影响被引量：9: 2008年; 目的:探讨4周中等强度运动后大鼠左、右室肌蛋白质组的差异性表达,初步筛选出心脏在运动反应与适应过程中的目标蛋白质;方法:将18只雄性SD大鼠随机分为实验组和平行对照组(n=9)。实验组经4周中等负荷强度(70%V.O2max～80%V.O2max)跑台训练后,与对照组一起,提取左、右室肌组织的全蛋白样品。进行2-DE蛋白样品分离,采用PD-Quest软件进行图像分析和数据采集。选择运动后差异表达量≥10倍的备选目标蛋白点,进行胶內原位酶解与一、二级质谱鉴定;结果:运动后左、右心室差异表达量≥10倍的蛋白质点共24个,取其中9个点,经一、二级质谱鉴定出ATP合酶偶合因子6、葡萄糖调节蛋白78、烯酰辅酶A水合酶、ATP合酶α亚基、丙酮酸脱氢酶E1α1、硒联蛋白1、类似信号增殖关联蛋白1和丝氨酸精氨酸前体-mRNA拼接因子SR-A1以及一个分子量为116kDa的未知蛋白;结论:1)实验大鼠在心脏重塑过程中,左、右室肌蛋白质组发生了显著的变化。2)成功筛选出在运动医学领域中尚未涉足的8种目标蛋白,其表达量发生的适应性变化表明,在中等强度运动下,会引起心肌能量代谢水平的提高、心肌应激反应与适应能力的增强、血压调节能力的改善等一系列有益变化。; 史绍蓉袁爱国王娟刘建荣刘田李颂; 关键词：运动心脏中等强度运动蛋白质组

α-心肌肌球蛋白重链与原肌球蛋白-1在不同负荷运动中的差异表达研究被引量：6: 2009年; 目的:从用蛋白质组学方法已经筛选出的不同运动应激条件下心肌的目标蛋白中,选择与心肌收缩和与心肌收缩调节有关的目标蛋白质。方法:利用双向凝胶电泳技术检测,比较不同运动刺激条件下心室肌和心房肌的总蛋白(与各自的对照组比较),建立二维凝胶电泳(two-di mensional gel electrophoresis,2-DE)图谱。从多个差异蛋白质点中选择出3个表达明显变化的蛋白质点用MALDI-TOF-TOF质谱仪进行鉴定。结果:1702、2701、0201号点在不同负荷运动后其表达发生不同变化,1702、2701、0201号点在一次性力竭和递增负荷大运动后表达变化明显大于中等强度运动后其表达的变化,且3个点在不同负荷运动后的心室肌中的变化比在心房肌中的变化更为明显。经质谱鉴定,1702和2701号点为α-肌球蛋白重链(α-MHC),0201号点为原肌球蛋白1(tropomyosin-1,TM1)。结论:1)α-肌球蛋白重链、心肌原肌球蛋白1对运动应激的敏感性高,可作为新的研究运动应激的心脏生物标志物。2)力竭运动和递增负荷大强度运动对心肌收缩功能可能产生负面影响,而中等强度运动对心肌收缩功能没有产生不良影响,甚至会促进其收缩能力增强。; 史绍蓉王娟; 关键词：蛋白质组学不同负荷运动

4周不同强度运动对大鼠右心室肌蛋白质组差异表达的影响被引量：6: 2012年; 目的:探讨在中小强度运动应激下右心室肌蛋白质组的差异表达及其规律,初步筛选与运动健康相关的备选目标蛋白质。方法:将20只SD雄性大鼠随机分为对照组和实验组,以跑台运动的方式,复制递增运动负荷至24 m/min的中小强度运动实验动物模型;提取右室肌组织的全蛋白进行双向凝胶电泳分离,运用ImageMaster 2D Platinum图像分析软件对2-DE胶进行分析。结果:2-DE图谱上,对照组检测蛋白质点(437±17)个,实验组检测(448±19)个;运动后47个蛋白质点发生了较明显的变化,其中,1个蛋白质点消失,表达量上调2倍以上的点20个,下调至50%以下的15个,上调在5倍以上的点8个,下调至20%以下的3个。结论:4周中小强度运动后,大鼠右心室肌蛋白质组发生了显著的变化,初步筛选出12个备选目标蛋白质点,为研究运动健康与运动康复具有重要意义的新蛋白奠定前期工作基础。; 万莉莉史绍蓉王娟郭远盘徐哲黄思敏雷雄彭勇; 关键词：蛋白质组双向凝胶电泳

中小强度有氧运动后大鼠右心室肌蛋白质组差异表达的研究被引量：5: 2010年; 目的:运用蛋白质组学的理论和方法来研究中小强度有氧运动对大鼠右心室肌蛋白质组的影响。方法:将20只SD雄性大鼠随机分为对照组和运动组(各1组,每组n=10)。采用中小强度运动负荷跑台训练建立运动实验模型,提取右心室肌组织全蛋白样品,采用双向凝胶电泳进行蛋白样品分离。运用ImageMaster 2D Platinum图像分析软件对2-DE胶进行分析,通过图像分析,选取运动后差异表达量≥5倍的蛋白点,用串联飞行时间质谱蛋白质仪(ULGRAFL-FLEX-TOF/TOF)进行质谱鉴定。结果:经过8周运动后,在2-DE图谱上运动组和对照组检测到的蛋白质点分别为(547±18)个和(530±14)个,匹配率分别为(71.34±3.25)%和(70.28±2.38)%。运动后共有58个蛋白质点发生了变化:表达量上调≥2倍的点有33个,下调≥2倍的点有25个,其中上调≥5倍的点有8个,下调≥5倍的点有8个。选择差异表达量≥5倍的蛋白质点为目标蛋白质进行质谱分析,共鉴定出了5个差异表达蛋白质点。结论:在长期中小强度有氧运动后,大鼠右室肌蛋白质组发生了明显的差异性表达,这些差异性表达的蛋白质点为进一步观察在运动应激状态下对心脏结构与功能影响的新的目标蛋白质提供了实验依据。; 徐哲史绍蓉谭军郭远盘王娟; 关键词：蛋白质组双向凝胶电泳质谱鉴定

中等强度运动大鼠左室肌蛋白质组差异表达被引量：3: 2013年; 目的:采用蛋白质组学技术,探究中等强度运动后大鼠左室肌蛋白质组的差异表达。方法:将SD大鼠分为运动组和对照组,训练完成后麻醉处死,计量大鼠心重,提取左室肌全蛋白样品,采用2-DE进行分离,选择运动后差异表达量≥10倍的备选目标蛋白点,进行质谱鉴定。结果:取5个目标蛋白点,经质谱鉴定4个。未知蛋白质训练后表达量下调≥12.5倍。结论:1)中等强度运动后,大鼠心脏发生形态学变化使心肌增厚,心收缩力增强;2)训练组大鼠在长期运动训练中,左心室心肌蛋白质组变化显著;3)鉴定出运动医学中还未涉及的4种蛋白质,分别是三磷酸腺苷合酶偶合因子6(CF6)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、烯酰辅酶A水合酶(ECH)和ATP合酶α亚基(ATP synthase subunit alpha),其表达发生的顺应性改变说明,中等强度运动可提高心肌的能量代谢水平。; 袁爱国史绍蓉; 关键词：中等强度运动蛋白质组运动心脏重塑热休克蛋白

长期中小强度有氧运动对大鼠左心室肌蛋白质组差异表达的影响被引量：3: 2021年; 目的:探讨长期中小强度有氧运动对大鼠左室肌蛋白质组差异性表达的影响,筛选出对中小强度有氧运动刺激敏感的目标蛋白质,丰富运动健身的基础理论及为慢性心血管疾病的康复治疗提供新的思路和实验依据。方法:20只雄性SD大鼠随机分为运动组(E组)和对照组(C组)(n=10)。建立大鼠长期中小强度有氧运动跑台训练模型,采用双向凝胶电泳(2-DE)对大鼠左心室肌全蛋白样品进行分离。采用串联飞行时间质谱蛋白质仪对部分分离后差异表达量上调大于5倍或下调超过80%的蛋白质点进行质谱鉴定。结果:与C组比较,E组大鼠心脏重量指数(HWI)增加了32.0%,具有显著性差异(P<0.05);与C组比较,E组有71个蛋白质点表达上调≥2倍或下调≥50%,对4个表达上调≥5倍或下调大于等于80%的蛋白质点进行质谱鉴定,鉴定出3个蛋白质和1个未知蛋白质。结论:长期中小强度有氧运动后,大鼠心脏发生了良好的适应性改变;大鼠左心室肌蛋白质组发生了明显变化,长期中小强度有氧运动能有效增强大鼠心肌抗氧化能力。; 郭远盘史绍蓉徐哲王娟黄思敏万莉莉雷雄彭勇; 关键词：蛋白质组左心室肌双向凝胶电泳质谱鉴定

基于蛋白质组学的中等强度有氧运动对大鼠心房肌物质能量代谢蛋白差异表达的研究被引量：2: 2019年; 目的:基于蛋白质组学的研究技术与方法,研究4周中等强度有氧运动对大鼠心房肌蛋白质组差异表达的影响,揭示中等强度有氧运动对心房肌物质能量代谢影响的规律。方法:建立速度24m/min、持续时间40min(负荷强度相当于60%—70%VO2max),持续训练4周的中等强度有氧运动实验动物模型。应用双向凝胶电泳技术(2-DE)分离心房肌蛋白质点,串联飞行时间质谱仪技术鉴定电泳结果中表达量上调≥5倍以上,下调至1/5以下的13个备选目标蛋白质点。结果:鉴定结果有7个与心房肌细胞物质能量代谢相关的蛋白或酶,其中线粒体乌头酸水合酶上调5.7倍,丙酮酸脱氢酶E1α1表达量上调6.4倍,线粒体琥珀酸脱氢酶黄素蛋白亚基下调6.9倍,甲基丙二酸半醛脱氢酶[酰基]上调 6.3倍,异戊酰辅酶A脱氢酶下调6.9倍,线粒体二氢硫辛酸脱氢酶下调5.7倍,细胞质苹果酸脱氢酶表达量下调7.3倍。结论:①中等强度有氧运动诱导心房肌蛋白质组表达量与强度出现显著变化,同时诱发心脏出现生理性肥大。②筛选出甲基丙二酸半醛脱氢酶[酰基],该蛋白在运动生物医学领域尚未展开深入研究,为运动改善心房肌物质能量代谢的研究带来新的研究内容。③中等强度有氧运动可能改善心房肌物质氧化代谢水平,上述差异蛋白是否具有运动依赖性和蛋白之间的联系还需进一步验证。; 彭勇史绍蓉黄思敏徐哲郭远盘; 关键词：蛋白质组有氧运动心肌能量代谢质谱鉴定双向凝胶电泳

运动心脏重塑中大鼠右心室肌的差异蛋白质组学研究被引量：7: 2009年; 目的:探讨在运动心脏的发生过程中,右心室肌蛋白质组的差异表达,筛选对研究运动心脏重塑机制有重要意义的右心室蛋白质。方法:18只雄性SD大鼠按运动能力和体重随机配伍分为对照组和运动组,每组9只。运动组进行12周中等强度有氧运动(70～80%VO2max),后与对照组同时称取体重、麻醉处死,称取心脏重量,提取右心室肌的全蛋白,对样品蛋白用双向凝胶电泳技术分离、后固定染色。运用Bio-rad PD quest图像分析软件对双向凝胶电泳图谱进行分析,选取差异蛋白进行质谱鉴定。结果:经过12周运动后,运动组心脏出现明显形态学变化。此次实验获得了重复性和分辨率较好的双向凝胶电泳图谱,与对照组相比,通过软件分析,上调到10倍以上或下调至1/10及以下的差异点31个,其中7个上调,24个下调。这些点最多位于分子量50～70kDa和10～20kDa、等电点7.0～9.0范围内。质谱分析并鉴定了其中2个蛋白点,包括丙酮酸脱氢酶E1α1(运动12周后下调)和一个未知蛋白。结论:12周运动后大鼠右室肌蛋白质组发生了明显变化。能量代谢酶的变化提示中等强度运动对心脏产生的重塑作用可能主要引起右心室肌能量代谢水平的变化。; 王娟史绍蓉袁爱国刘建荣刘田杨素文; 关键词：运动心脏蛋白质组 2-DE

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湖南省科技计划项目(2007FJ3075)

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