“十五”国家科技攻关计划(2002BA514A-16-05)
- 作品数：3 被引量：23H指数：3
- 相关作者：郭鑫杨汉春任慧英陈艳红查振林更多>>
- 相关机构：中国农业大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因对猪的DNA免疫被引量：9
- 2006年
- 目的检测PRRSVGP5DNA重组质粒在猪体诱导的免疫反应以及细胞因子的佐剂效应。方法将表达PRRSVGP5的DNA重组质粒与表达3种细胞因子的重组质粒联合免疫SPF猪,经3次免疫后人工感染PRRSV,检测体液免疫、细胞免疫以及攻毒保护性反应。结果重组质粒pCI-GP5可诱导免疫猪产生中和抗体,效价达1:19.2,并可诱导机体产生较强的细胞免疫,攻毒后组织中PRRSV核酸的检出率下降39%,表明表达PRRSVGP5的DNA重组质粒pCI-GP5可诱导一定的免疫效力。pcDNA-IL-4与pCI-GP5共免可将中和抗体效价提高到1:35.5,且可增强细胞免疫反应,与对照组相比,病毒血症的出现频率减少17%,PRRSV阳性组织检出率下降64%;pcDNA-IL-2与pCI-GP5共免也可增强猪的细胞免疫,与对照组相比,病毒血症的出现频率下降50%,PRRSV阳性组织检出率减少59%;pcDNA-IFN-γ与pCI-GP5共免对病毒血症的出现及病毒在组织中的分布均没有抑制作用。结论动物试验结果表明IL-4及IL-2可作为PRRSVGP5DNA重组质粒的免疫佐剂。
- 任慧英郭鑫杨汉春王芳赵东升杜希珍
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞因子免疫反应
- 猪γ-干扰素基因真核重组表达质粒的构建被引量：8
- 2005年
- 用 RT- PCR方法从长白猪脾脏淋巴细胞中扩增出猪 γ-干扰素 (IFN- γ)基因 ,经克隆测序表明与已发表序列同源性为10 0 %。将目的基因插入表达载体 pc DNA3.1(+) ,构建出真核重组表达载体 IFN-γ- pc DNA。将重组质粒转染 COS7细胞 ,检测转染细胞培养上清 IFN- γ活性 ,结果表明转染上清对猪繁殖与呼吸综合征病毒有抑制作用。
- 任慧英郭鑫杨汉春陈艳红查振林
- 关键词：真核重组表达质粒培养上清COS7细胞序列同源性
- 猪生殖与呼吸综合征病毒GP5基因对小鼠的DNA免疫被引量：7
- 2006年
- 将表达完整猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5和融合表达泛素与GP5成熟肽的真核重组表达质粒(pCI-GP5和pcDNA-U-GP5)分别肌肉注射免疫BALB/c小鼠,共免疫3次。采用间接ELISA法检测血清中抗GP5的抗体水平,MTT法检测脾淋巴细胞的增殖能力,LDH释放试验检测脾NK细胞的杀伤活性,并通过流式细胞术检测脾淋巴细胞亚群的比例。结果发现,2种DNA重组质粒免疫后均可诱导小鼠产生体液免疫和细胞免疫。三免后第5周,pCI-GP5质粒免疫组诱导产生的抗GP5抗体水平及NK活性明显高于pcDNA-U-GP5质粒免疫组;而pcDNA-U-GP5免疫组的淋巴细胞增殖指数及CD4-CD8+T细胞比例明显高于pCI-GP5组。表明,GP5基因可诱导产生较高的免疫反应,泛素与GP5的融合表达可增强PRRSV GP5诱导的细胞免疫反应。
- 任慧英杨汉春郭鑫陈艳红查振林
- 关键词：猪生殖与呼吸综合征病毒GP5泛素DNA免疫小鼠
